爱爱医资源-微生物学卫生学基础知识及洁净作业知识

1一、微生物学、卫生学基础知识1、微生物——是一类形体微小、结构简单，大多数为单细胞，必须借助光学显微镜放大数千倍或电子显微镜放大数万倍才能肉眼可见微小生物的统称。2、特点：个体微小、结构简单、进化地位低等。3、微生物的特征：3.1个体微小，比面大（最基础特征），大多数在μm级，需用光学显微镜放大数百倍或千倍才能看到，如，细菌和真菌；有些微生物的大小为nm，则需用电子显微镜放大数万倍才能观察到其形态结构，如病毒。3.2具有一定的形态结构3.3新陈代谢旺盛、生长繁殖速度快。一般情况下，细菌20-30分钟即可繁殖一代。3.4适应强、易变异。3.5分布广、种类多（10万种以上）。4、微生物包括的种类：4.1原核生物类：单细胞---细菌、放线菌、支原体、衣原体等4.2真核生物类：单细胞----酵母；多细胞----霉菌、原生动物、藻类4.3非细胞类：病毒、类病毒、朊病毒5、细菌的生物学特性5.1细菌是一类单细胞的原核细胞型微生物。25.2细菌的基本形态：有球形、杆形和螺旋形三类，分别称球菌、杆菌、螺形菌（分弧菌、螺菌），大多数球菌直径为1μm左右，杆菌一般长2-3μm，宽0.5-1μm。5.3基本结构：各种细菌有细胞壁、细胞膜、细胞浆和核质等基本结构。某些细菌除具有上述基本结构外，还有一些特殊结构，如夹膜、鞭毛、菌毛和芽孢等。5.4芽孢又叫内生孢子，是某些细菌在一定生长阶段在菌体内形成一个圆形或卵圆形的特殊结构。一般认为芽孢是细胞的休眠体，对环境条件的抵抗力强，能保护细菌度过不良条件。与芽孢相对而言，未形成芽孢而正在繁殖着的细菌叫做繁殖体。芽孢对热、干燥、化学药品等有较强的抵抗力。有的芽孢在自然界中可存活达数十年之久。干热灭菌需160℃、2小时以上；高压蒸汽灭菌需121℃、15-30分钟才能杀灭芽孢。细菌的生物学特性，有两点值得注意：一是普遍存在的特性，它们以一种形式或另一种形式到处存在。二是细菌能以极快的速度繁殖，20-30分钟即可繁殖一代。还有细菌特性之一是具有产生修复休眠体芽胞的能力。6、真菌的生物学特性：真菌是有细胞壁，无叶绿素，无根、茎、叶分化的真核细胞型微生物，是微生物中种类最多的一类，约3十万余种。真菌主要包括酵母菌、霉菌和大型真菌。其实这些名称都不属于分类学上的名词。酵母菌为单细胞，无菌丝，菌落形态似细菌的非菌丝体状的类型；霉菌有单细胞或多细胞，由菌丝体和孢子组成，菌落疏松常能扩散生长的一些丝状真菌的统称。大型真菌是一些肉眼可见的体积超常的类型，因其菌体体积大而得名。如，木耳、灵芝、香菇、茯苓等。酵母菌和霉菌这两大类微生物基本包括了真菌中除担子菌亚门（主要是大型真菌）外的各种类型。真菌对营养要求不高，培养条件可概括为五字特点：甜、酸、温、湿、慢。因次，梅雨季节要特别注意防潮、防霉，要保持物料、设备、各种器具的干燥。真菌生长速度比细菌缓慢，要几天才能形成典型菌落。中药材的收购、保管上要做到去土、干燥、通风、合理贮藏，主要是为了防霉。7、药物生产中的微生物污染药物生产和保藏的一个重要问题是微生物污染造成变质的问题。在药物生产过程中，大多数制剂都含4有微生物。空气、水、操作人员、药物原辅料、设备容器具、包装容器、厂房环境等均可造成药物微生物的污染。即使经过灭菌或除菌处理的注射剂也可能因热原存在而引起发热反应。污染源及控制：7.1空气中的微生物空气中含有数量不少的微生物：细菌、霉菌、酵母菌等。空气中的微生物种类与数量随条件不同有很大的变化，如有活跃人群之处比人少的地方微生物多，不洁的房间比清洁的房间多。当人们讲话、咳嗽、打喷嚏时，可大大增加空气中的微生物的数量。下表是不同地区的大气含尘含菌浓度。由于空气中含有微生物，因此药物制剂的生产过程中，对生产场所的空气中含有的微生物数量的限度要进行控制，不同药物制剂的类型的要求不同，在后面作详细的介绍。7.2水中的微生物水在制药工业中至关重要，因除在配制各类制剂时需要用水外，在洗涤及冷却过程中均涉及到水。水也是药物中微生物的重要来源。水中常见的微生物有假单胞菌、产碱杆菌、黄杆菌、产色细菌和沙雷菌等。如受到粪便的污染时，则可有大肠埃希菌、变形杆菌5和其他肠道细菌等。因此，用于生产的工艺用水必须经处理符合水质的卫生标准。7.3人体中的微生物自然界广泛存在着微生物，人与自然界相接触，因此人的体表及与外界相通的腔道如口腔、鼻咽腔、肠道、眼结膜、泌尿生殖道等都存在不同种类和数量的微生物。微生物可以从操作人员传递给药物制剂，因此必须注意操作人员的个人卫生，不得是带菌（如肺结核杆菌、痢疾杆菌、乙肝病毒等）者。在制药过程中要求戴口罩，清洗和消毒双手，穿上专用工作衣帽才能进行操作，以减少微生物污染。7.4原辅料和包装材料天然来源的未经处理的原辅料，常含有各种各样的微生物如动物来源的明胶、脏器，植物来源的阿拉伯胶、中药材等。事先或制药过程中加以消毒处理可得到减少微生物的满意效果。良好的贮藏环境条件，也可以防止或减少微生物的污染繁殖。包装材料包括包装用的容器、包装纸、运输纸箱等应按不同要求考虑是否需要消毒和如何合理封装。原则是尽量减少微生物的污染。7.5生产厂房、生产设备容器具要符合要求，并按6规定清洁消毒，以防止或减少微生物的污染繁殖。8、影响微生物生长繁殖的主要因素:营养物质、温度、pH、氧气、水的活度。9、无菌与灭菌、消毒与防腐的定义、概念9.1无菌的定义：ISO的定义为不含存活微生物的状态。（注：实际上关于不存在微生物的说明是无法证明的。）9.2灭菌的定义：ISO的定义为用于使一个产品不含所有类型存活微生物的工艺。注：在一个灭菌过程中，微生物死亡性质可由一个指数函数描述。因此，在任何个别物件上微生物的存在可以用概率来表示，这个概率可以减低至一个极低的数目，但不能降低至零。9.3消毒的定义：是指用物理的或化学的方法杀灭物体上的病原微生物，通常只杀死细菌的繁殖体。9.4防腐的定义：是指防止或抑制微生物生长繁殖的方法。9.5无菌的一些概念：无菌是完全没有活的微生物存在；在实际应用中的含义是当使用生长培养基实验时，无任何细菌生长。灭菌后的物品所处的状态即为无菌状态。无菌操作是防止微生物污染机体和其他物品的操作技术。无菌制药工艺则是防止微生物污染所进行药品生产的7工艺。灭菌是达到无菌状态的一种方法或一个过程。9.6灭菌的概念灭菌是用物理的方法（如加热、辐射、过滤）或化学的方法（如臭氧、环氧乙烷、灭菌剂、抗生素等）杀灭物体上的一切微生物的方法。灭菌制药工艺是用物理的方法（如加热、辐射、过滤）或化学的方法（如臭氧、环氧乙烷、灭菌剂等）杀灭药品生产过程中物体上的一切微生物的工艺。灭菌剂定义为杀灭在没有其他生命环境内的所有微生物生命形态的一种化学试剂。无菌制药工艺与灭菌制药工艺的区别：无菌制药工艺是用于生产不能最终灭菌的药品，灭菌制药工艺是用于生产最终灭菌的药品。9.7消毒的概念用物理的或化学的方法杀灭物体上的病原微生物，称为消毒。通常只杀死细菌的繁殖体。常规的化学消毒剂的使用稀释液不具有杀灭孢子的能力。消毒剂是指杀灭病原微生物的化学药物。消毒剂品种应定期更换，防止产生耐药菌株。9.8防腐的概念防腐是指防止或抑制微生物生长繁殖的方法。防腐剂是指能防止或抑制微生物生长繁殖的化学物质。8消毒剂和防腐剂没有本质区别。一种化学物质在高浓度下是消毒剂，在低浓度下就是防腐剂。一般可称为消毒（防腐）剂。10、灭菌方法概述灭菌方法是指应用物理或化学等方法杀灭或除去一切存活的微生物增殖体或芽孢，使之达到无菌的方法。灭菌法的简要分类：物理灭菌法：（1）湿热灭菌法：包括热压灭菌法、流通蒸汽灭菌法、煮沸灭菌法、低温间歇灭菌法。（2）干热灭菌法（3）紫外线灭菌法（4）过滤除菌法（5）微波灭菌法（6）辐射灭菌法化学灭菌法：（1）气体灭菌法：包括臭氧灭菌法、环氧乙烷灭菌法、甲醛灭菌以及其他气体灭菌（如,丙二醇和乳酸）。（2）化学杀菌剂：如0.1%-0.2%苯扎溴銨（新洁尔灭）溶液、2%酚溶液或煤酚皂溶液、75%酒精等。10.1湿热灭菌湿热灭菌法是利用饱和水蒸汽或流通水蒸汽进行灭菌的方法。ISO定义为：采用湿热以生产灭菌产品的工艺。湿热是由水所产生的热，可以为液体或压力下的蒸汽。9高温是最可靠而普遍应用的灭菌法，高温可以使微生物蛋白质变性凝固，或破坏细胞膜的结构而使微生物死亡。湿热灭菌比干热灭菌好,其主要原因是水蒸汽的比热远比干热空气大，且穿透力强,在水分存在情况下菌体蛋白质更易变性凝固。此外，由于水蒸汽遇到较低温度的被灭菌的物体立即凝结成水，放出潜热，致使温度升高效力增加。10.1.1热压灭菌法热压灭菌法是湿热灭菌技术中最常用的方法。热压灭菌法是在密闭的容器中利用高压的饱和水蒸汽进行的灭菌。此法灭菌作用强。适用于不受高温高压湿气影响的物料的灭菌。在常规情况下，用115.5℃即表压0.7kg/cm2时加热30min，即能杀死所有微生物增殖体和芽孢。灭菌的温度、压力与时间如下表温度压力时间115℃121.5℃126.5℃6.68×104Pa(10磅)9.81×104Pa(15磅)13.72×104Pa(2030min20min10min10磅)使用热压灭菌器时应注意：(1)将灭菌器的空气排尽。若灭菌器内有空气在，则压力表上所指示的压力，是灭菌器内蒸汽和空气二者的总压而非单纯的水蒸汽压力，结果压力表所指示的压力达到了，但温度却未达到，所以不能产生应有的灭菌效果。同时，由于空气携带热气低于蒸汽，穿透力也差，致使灭菌效能降低。(2)灭菌时间必须是从全部内容物均已达到规定温度时开始计算，故测定预热时间和尽量缩短升温时间，具有重要意义。（3）避免压力聚然下降。灭菌完毕后，停止加热，使灭菌器内的温度和压力逐渐下降。（主要是要注意安全）(4)注意灭菌器的防锈和除锈，保持各种管路畅通。10.1.2流通蒸汽灭菌法是在不密闭的容器内用蒸汽灭菌的方法。10.1.3煮沸灭菌法是将灭菌物放入水中煮沸30-60min进行灭菌的方法。高原地区由于水的沸点降低，应适当延长灭菌时间或在水中加入1%-2%碳酸钠或适量食盐以提高水的沸点。此法不能杀灭所有芽孢。10.1.4低温间歇灭菌法系将灭菌物品于80℃加热111小时后，在20-25℃保持24小时，使芽孢发育成增殖体后，再第二次加热时被杀灭，如此连续操作三次以上。此法所需时间长，效果并不可靠，仅用于遇高温极易破坏，且本身有抑菌作用或添加抑菌剂的物料。凡用此法灭菌的注射剂不得用于静脉注射和椎管注射。10.1.5水浴式灭菌法水浴式灭菌法是目前国内外采用的较为先进的方法。其灭菌方式是采用以去离子水为载热介质，用加热介质去加热输液瓶内的药液，并通过高温将药液中的微生物杀灭。10.1.6巴氏消毒法此法因巴斯德首创而得名，是一种较低温度消毒法。虽然嗜热微生物在此温度下可能免于一死，但它们在人体体温条件下不能生长，主要针对牛奶中的的病原菌如结核杆菌和沙门氏菌，在巴氏消毒条件下它们均被杀死。其方法可分两类：低温维持法，即63℃下维持30分钟；高温瞬间法，即72℃下维持15秒。10.2干热灭菌法干热空气的穿透力弱且不均匀，空气的比热低，是不良的传热物质。与湿热灭菌相比，干热灭菌需要较高的温度（140－170℃）和较长的时间（2-3小时），才能达到灭菌12的目的。灭菌时间必须从灭菌物品全部达到该温度时开始计算。被灭菌物料上的细菌，主要是通过提高了的温度使细胞成分产生非特异性氧化而被破坏（细胞固有的水分也起了重要作用），高温干热可使微生物的酶受热变性、细胞内的核糖核酸破坏以及细胞膜受损伤而死亡；细胞被破坏的过程是可预测的和可靠的。此法适用于耐高温的玻璃、金属或陶瓷制品以及不允许湿气穿透的油脂类药物和耐高温药物的灭菌。不适用于橡胶、塑料制品和大部分药品。需灭菌物品在灭菌前必须用适当的包皮包裹，或置于密闭的容器中可使灭菌完毕仍能保持无菌状态。10.3火焰灭菌法在火焰中烧灼是最迅速、可靠、简便、应急的灭菌方法，使所有的生物质碳化。适用通过火焰不受损坏的物品，如镊子、铂丝、玻棒等。欲灭菌的物品一般在火焰中加热20秒。并将物品迅速通过火焰3-4次。10.