有机溶剂残留量的测定2015

药物中有机溶剂残留量的测定残留溶剂（ResidualSolvent）定义：药物中的残留溶剂系指在原料药或辅料的生产过程中，以及在制剂制备过程中使用或产生的，但在工艺过程中未能完全去除的有机溶剂。（OrganicVolatileImpurities）研究的性质：杂质研究的范畴国内外主要相关指导原则和文件•ICHQ3c杂质：残留溶剂的指导原则•FDA：GuidenceforIndustry:Q3cImpurities:ResidualSolvents•EMEA:PositionPaperonSpecificationfroClass1andClass2ResidualSolventsinActiveSubstances•化学药物有机溶剂残留量研究技术指导原则国内研究现状：越来越重视，但仍存在很多不规范之处原因：时间短、经验少、对本质认识不够，对国际新研究结果跟踪不及时，对已有指导原则内涵领会不深刻本讲目标：通过分析和总结，明确一些问题，使研究更科学、更规范。各国药典中残留溶剂测定收载情况USP35版——ChemicalTests/467ResidualSolvents185EP7.0版——2.4.24.IdentificationandcontrolofresidualsolventsChP2010年版——附录ⅧP残留溶剂测定法以上药典方法是残留溶剂研究的重要参考依据ICH指导原则人用药品注册技术要求国际协调会议(InternationalConferenceofHarmonizitionICH)ICH将药品生产及纯化过程中常用的69种有机溶剂按照对人体和环境的危害程度分为4类。残留溶剂分类第1类溶剂:指已知可以致癌并被强烈怀疑对人和环境有害的溶剂,其残留量必须控制在规定的范围内;第2类溶剂:指无基因毒性但有动物致癌性的溶剂;第3类溶剂:指对人体低毒的溶剂。在无需论证的情况下,残留溶剂的量不高于0.5%是可接受的,但高于此值则须证明其合理性;第4类:尚无足够毒理学资料的溶剂。有机溶剂的分类类别毒性PDE（mg/天）第一类溶剂人体致癌物、疑为人体致癌物或环境危害物0.1以下(1,1,1)三氯乙烷除外第二类溶剂有非遗传致癌毒性或其他不可逆毒性、或其他严重的可逆毒性0.5-50第三类溶剂对人体低毒50第四类溶剂没有足够毒性资料限度的制定残留量表示方法：浓度限度计算公式：浓度限度（%）＝PDE/(1000×剂量)×100%•其中：PDE：mg/天•剂量：一般为10g/天质量标准的制订和修订PDE、浓度限度的比较PDE值：绝对值，控制精确，但可能忽略多种溶剂的综合影响。浓度限度：以PDE为基础，并采用比较大的每天给药量计算，给出了一个比较大的安全系数。目前情况下，采用浓度限度比较简便，而且只要日摄入总量不超过10g，就无需进一步计算。药物中有机溶剂的引入研究对象：原料药/辅料、制剂原料药/辅料：合成过程中引入包括：•作为合成原料或反应溶剂引入•作为反应副产物引入•由其他合成原料或其他溶剂带入制剂•各种成份（原料药、辅料）带入•制剂制备过程中引入制剂制备过程中引入（缓、控释微丸包衣过程使用有机溶剂；难溶性药物固体分散）他克莫司溶于无水乙醇和二氯甲烷中分散。药物中有机溶剂的引入研究集中在：原料药的第一种情况影响因素：•有机溶剂在合成过程中使用的步骤•后续溶剂的影响•中间体的影响•其他（如副反应等）有机溶剂的使用和残留与合成工艺密不可分，是评价合成工艺优劣，筛选、确定合成工艺的重要因素之一。药物中有机溶剂的引入第一类溶剂原则：考虑其毒性，建议尽量避免使用。当合成路线涉及此类溶剂时合成化学发展水平判断使用是否合理合理不合理严格控制残留量替代研究临床研究前临床研究期间产品上市后确定何种溶剂需进行研究的原则意义和目的•保障临床用药安全，控制产品质量与其他方面研究工作密不可分•进一步验证工艺控制的合理性•为确定合理可行的质量标准提供数据支持思考的出发点•有机溶剂的毒性•产品的合成工艺确定何种溶剂需进行研究的原则EMEA•第一类溶剂：不宜使用。一旦作为起始原料、溶剂，或者反应副产物，或者由其他溶剂带入时，残留量需符合ICH相关规定。•残留量控制方法：随引入情况不同而不同直接控制终端产品控制中间体控制引入第一类溶剂的物质确定何种溶剂需进行研究的原则EMEA•第二类溶剂：可直接对终产品进行控制，可对中间体进行控制，结果需符合ICH相关规定•当6批试生产规模或者3批生产规模的中间体检测结果显示残留量低于ICH规定限度的十分之一时，可不对终产品进行控制。确定何种溶剂需进行研究的原则研究原则：•考虑到各类有机溶剂有毒性和在终产品中残留的可能性，建议：第一类溶剂：无论任何步骤使用，均需进行检测第二类溶剂：无论任何步骤使用，均需进行检测第三类溶剂：建议可仅对用于终产品精制的此类溶剂进行研究。确定何种溶剂需进行研究的原则研究原则：•第四类溶剂若结构与毒性大的溶剂非常接近，建议尽量不使用注意中间体的处理，尽量除尽根据结构和理化性质，参考其他的有机溶剂的检测方法进行检测和控制注意检测图谱中未知峰的情况，尽量进行归属，若无法归属，可以控制挥发性杂质总量。若国家标准中未控制残留溶剂，建议根据起始原料的制备工艺，对可能存在的残留溶剂一并在终产品中进行控制。如果采用尚未批准的原料药、化工中间体等作为起始原料，建议根据起始原料的制备工艺，对可能存在的残留溶剂一并在终产品中进行控制。9质量标准建立附录中无限度规定和未收载的有机溶剂:如在药物的制备过程中使用到了这类溶剂，建议药物研发者尽量检索有关的毒性等研究资料，关注其对临床用药安全性和药物质量的影响。表1药品中常见的残留溶剂及限度第一类溶剂（应该避免使用）溶剂名称英文名限度（ppm)苯Benzene2四氯化碳Carbontetrachloride41，2－二氯乙烷1,2-Dicloroethane51，1-二氯乙烯1,1-Dichloroethene81，1，1－三氯乙烷1,1,1-Trichloroethane1500第二类溶剂（应该限制使用）溶剂名称英文名浓度限度（ppm)乙腈Acetonitrile410氯苯Chlorobenzene360氯仿Chloroform60环己烷Cyclohexane38801，2－二氯乙烯1,2-Dichloroethene1870二氯甲烷Dichloromethane6001，2－二甲氧基乙烷1,2-Dimethoxyethane100第二类溶剂（应该限制使用）N,N-二甲氧基乙酰胺N,N-Dimethylacetamide1090N,N-二甲氧基甲酰胺N,N-Dimethylformamide8801，4－二氧六环1,4-Dioxane3802－乙氧基乙醇2-Ethoxyethanol160乙二醇Ethyleneglycol62甲酰胺Formamide220正己烷Hexane290甲醇Methanol30002－甲氧基乙醇2-Methoxyethanol50甲基丁基酮Methylbutylketone50甲基环己烷Methylcyclohexane1180第二类溶剂（应该限制使用）N-甲基吡咯烷酮N-Methylpyrrolidone4840硝基甲烷Nitromethane50吡啶Pyridine200四氢噻砜Sulfolane160四氢化萘Tetralin100四氢呋喃Tetrahydrofuran720甲苯Toluene8901，1，2－三氯乙烯1,1,2-Trichloroethene80二甲苯﹡Xylene2170﹡通常含有60％间二甲苯，14％对二甲苯，9％邻二甲苯和17％乙苯第三类溶剂（GMP或其它质控要求限制使用）溶剂名称英文名浓度限度（ppm)乙酸Aceticacid5000丙酮Acetone5000甲氧基苯Anisole5000正丁醇1-Butanol5000仲丁醇2-Butanol5000乙酸丁酯Butylacetate5000叔丁基甲基醚tert-Butylmethylether5000异丙基苯Cumene5000二甲亚砜Dimethylsulfoxide5000乙醇Ethanol5000乙酸乙酯Ethylacetate5000乙醚Ethylether5000甲酸乙酯Ethylformate5000第三类溶剂（GMP或其它质控要求限制使用）甲酸Formicacid5000正庚烷Heptane5000乙酸异丁酯Isobutylacetate5000乙酸异丙酯Isopropylacetate5000乙酸甲酯Methylacetate50003－甲基－1－丁醇3-Methyl-1-butanol5000丁酮Methylethylketone5000甲基异丁基酮Methylidobutylketone5000异丁醇2-Methyl-1-propanol5000正戊烷Pentane5000正戊醇1-Pentanol5000正丙醇1-Propanol5000异丙醇2-Propanol5000乙酸丙酯Propylacetate5000第四类溶剂（尚无足够毒理学资料）溶剂名称英文名1，1－二乙氧基丙烷1，1－Diethoxypropane1，1－二甲氧基甲烷1,1-Dimethoxymethane2，2－二甲氧基丙烷2,2-Dimethoxypropane异辛烷Isooctane异丙醚Isopropylether甲基异丙基酮Methylisopropylketone甲基四氢呋喃Methyltetrahydrofuran石油醚Petroleumether三氯乙酸Trichloroaceticacid三氟乙酸Trifluoroaceticacid残留溶剂测定方法干燥失重：专属性差GC法(普通)：首选方法顶空进样法直接进样法HPLC法：例如测定吡啶离子色谱法：测定N-甲基吡咯烷酮气质联用有机溶剂残留量测定方法分类1.直接进样法适用范围：沸点高溶剂或受热不易分解样品。优点：简便、无需专用设备，绝对进样量大。缺点：污染进样口及柱子，溶剂峰响应大，样品分解产物或溶剂杂质峰可能影响测定，对溶剂的纯度要求高。2.顶空进样法（HeadspaceAnalysis)2.1静态顶空技术2.2动态顶空技术（吹扫捕集法）适用范围：沸点低溶剂或样品本身对测定有影响。优点：在较低温度下进行，避免组分分解；减少溶解样品的溶剂量和样品本身对色谱系统的干扰和污染，增加色谱柱的寿命。缺点：需要特定的顶空进样装置，成本较高，对沸点较高的溶剂检测灵敏度不够，一般多应用于沸点100℃以下的溶剂。顶空进样法的原理顶空分析是通过样品基质上方的气体成分来测定这些组分在原样品中的含量。这是一种间接的分析方法，其基本理论是在一定条件下气相和凝聚相（液相或固相）之间存在着分配平衡。所以气相的组成能反映凝聚相的组成。当样品的蒸气压相当低时，色谱峰面积(Ai)与挥发性组分（i）的蒸气压（Pi)成正比Ai=CiPiCi与物质种类及检测器有关的特定常数。对于理想混合体系，依据拉乌尔定律：Pi=γiP0iXiP0i为纯组分（i）的蒸气压，Xi为组分（i）的摩尔分数,γi组分的活度系数。服从拉乌尔定律的混合体系，其峰面积与浓度成线性关系。但在高浓度区域内分压的变化与浓度变化不成线性关系，有时甚至与浓度无关。如果不注意这一点，顶空分析会得到错误的结果。因此分析中定量校正尤为重要。在很多情况下，样品溶液若能充分稀释，则能使其接近理想体系，服从拉乌尔定律。顶空进样法的特点１、样品不需要前处理，它只取气相部分进行分析，大大减少了样品基质对分析的干扰。２、进样量大，灵敏度高，可用于痕量有机挥发性物质的测定。３、对于易挥发或易分解和无法直接进样分析的液体或固体样品而言，更有它的实