残留检测质量控制规范概述

上海出入境检验检疫－食品伙伴网（）残留检测质量控制规范概述上海出入境检验检疫局朱坚[e-mail]上海出入境检验检疫－食品伙伴网（）主要内容一、概述二、残留分析测试的质量保证三、标准操作程序的制定四、检测质量控制五、分析仪器的质量保证六、分析结果的可追溯性七、能力比对测试上海出入境检验检疫－食品伙伴网（）(一）残留分析的“质量”在残留分析测试中，从采样、样品制备到分析的全过程，直到计算结果，各个环节都存在质量问题，“质量”这一概念在分析实验室中常包含数据本身的质量、分析方法的质量和分析体系的质量一、概述上海出入境检验检疫－食品伙伴网（）一、概述(二)分析质量控制是用现代科学管理技术和数理统计方法来控制分析实验室的质量，把分析误差控制在限度内，保证分析结果有一定的精密度和准确度，使分析数据在给定的置信水平内有把握达到所要求的质量。实验室的质量控制主要包括•实验室内部质量控制•实验室间质量控制上海出入境检验检疫－食品伙伴网（）影响测定结果的常见因素分析过程分析前分析中分析后样品因素生物学采样理化人为因素工作态度工作能力环境影响实验因素方法学试剂质量实验用水标准品质控品仪器管理因素人员配置操作规程质量措施二、残留分析测试的质量保证QualityAssurance(QA)上海出入境检验检疫－食品伙伴网（）二、残留分析测试的质量保证QualityAssurance(QA)质量评定质量控制标准参考物质实验室内部评定控制图实验室之间对比联合测试统计分析质量保证实验室各项规章制度校正标准化仪器设备的维护保养教育和训练上海出入境检验检疫－食品伙伴网（）质量控制的内容主要包括：样品分析前的质量保证、分析中的质量控制和分析后的质量评估三个主要过程的质控二、残留分析测试的质量保证QualityAssurance(QA)上海出入境检验检疫－食品伙伴网（）（一）、残留分析测试的质量保证体系分析后质量评估分析中质量控制取样工具取样计划的制定样品采集样品运输样品制备人员素质工作环境标准品室内质控仪器质量保证方法选择与评价试剂选择与评价按操作规程前处理及分析测定监管人员反馈信息室内复查保留样品随时复查发送报告客户投诉室间质评登记填发报告分析前质量保证分析中质量控制上海出入境检验检疫－食品伙伴网（）（二）质量控制的基本步骤•1．有专人负责全面质控工作。•2．对工作人员进行业务培训，普及质控知识。•3．科学的管理和严格的规章制度是质控方案得以实施的保证。•4．有标准化的操作规程。•5．有分析前和分析后的质量控制程序。•6．仪器量器的定期鉴定、校正和正确使用。•7。实验用水、试剂、质控品及校准品的质量符合要求。•8．所采用的各种测定方法的准确度、精密度等技术性能良好。•9．选择合适的室内质量控制方法，开展室内质控，对失控结果及时采取相应的处理措施。•10．参加实验室间的质量评价活动或能力比对检验，认真分析回报结果，对失控的项目要及时检查原因，并采取相应的改正措施。上海出入境检验检疫－食品伙伴网（）（一）目标所有残留检测方法，包括残留监控检测方法和日常出口残留检测方法，应建立SOP，所有方法应尽可能通过ISO/IEC17025认可三、标准操作程序的制定StandardOperatingProcedure上海出入境检验检疫－食品伙伴网（）（二）编写依据•残留分析质量控制指南•残留检测标准操作程序(SOP)编写指南•起草残留检测标准操作程序SOP的格式要求•本实验室的《验证残留检测标准操作程序（SOP）的作业指导书》标准操作程序的制定StandardOperatingProcedure上海出入境检验检疫－食品伙伴网（）1、SOP需要提供的参数•分析物和基质特异性（特异性）•标准曲线（范围）•检出限•定量限•回收率•室内精密度（包括日内重复性和日间重现性）•室间精密度（若条件许可，做室间重现性）（三）对验证残留检测标准操作程序（SOP）作业指导书的基本要求上海出入境检验检疫－食品伙伴网（）2、应明确本实验室做方法验证的具体细则，包括：•具体操作步骤•标准品添加的方法•标准品添加的水平•平行样的个数•定性标准（定性离子的丰度比）•定量方法定量限的确定依据（三）对验证残留检测标准操作程序（SOP）作业指导书的基本要求上海出入境检验检疫－食品伙伴网（）（三）对验证残留检测标准操作程序（SOP）作业指导书的基本要求3、应尽量提供的参数1.判断限(CCα)2.检测能力(CCβ)3.耐用性4.稳定性－(溶液和基质)5.不确定度上海出入境检验检疫－食品伙伴网（）4.对各验证参数的要求(1)特异性－Specificity基质:具有典型性基质空白在分析物出峰时间段判断基质干扰(信号，色谱峰，离子流)对于验证基质，应分类别分别验证，例如肌肉、肝脏、肾脏、脂肪、皮肤、奶、蛋、鱼、虾、蜂蜜、蜂王浆、肠衣等，并在验证报告中具体写明验证所采用的具体基质，例如鸡肝还是鸭肝（三）对残留检测标准操作程序（SOP）编写作业指导书的基本要求上海出入境检验检疫－食品伙伴网（）4.对各验证参数的要求(1)特异性－Specificity分析物:与分析物相近化合物如异构体,代谢物,降解产物:将异构体,代谢物,降解产物添加到基质中，进行评估研究:•错误判断?•干扰物?•折中的定量方法（三）对残留检测标准操作程序（SOP）编写作业指导书的基本要求上海出入境检验检疫－食品伙伴网（）1非仪器分析目视法用已知浓度的被测物试验出能被可靠地检测出最低浓度或量.(2)检测限2仪器分析信噪比法用于能显示基线噪音的分析方法.以3倍信噪比（S/N=3)相对应浓度确定检测限量.对残留检测标准操作程序（SOP）编写作业指导书的基本要求（2）检测限(LimitofDetection,LOQ)上海出入境检验检疫－食品伙伴网（）（3）定量限(limitofquantitation,LOQ)指样品中被测物能被定量测定的最低量.（应具有一定的准确度和精密度）(3)定量限确定方法:1仪器分析S/N=102非仪器分析目视法（三）对残留检测标准操作程序（SOP）编写作业指导书的基本要求上海出入境检验检疫－食品伙伴网（）(4).回收率使用有证物质或者空白添加添加浓度:1、1.5和2xMRPL,0.5、1和1.5xMRL,n≥6计算:回收率%=100x(测得的浓度/添加的浓度)（三）对残留检测标准操作程序（SOP）编写作业指导书的基本要求上海出入境检验检疫－食品伙伴网（）(5).准确度确证方法–准确度：重复分析标准物质，测定的含量（经回收率校正后）平均值与真值的偏差指导范围如下：真实浓度（µg/kg）范围小于等于150%-120%1-1070%-110%大于1080%-110%（三）对残留检测标准操作程序（SOP）编写作业指导书的基本要求没有标准物质(CRM)时，准确度可以通过测定空白基质中加入已知量分析物的回收率获得上海出入境检验检疫－食品伙伴网（）•重复性是指在重复性条件下的精密度-室内精密度；重复性条件是指在同一实验室，由同一人操作，使用相同的设备，用同样方法获得独立测量结果的条件。•重现性是指在重现性条件下的精密度-室间精密度；重现性条件是指在不同实验室，由不同的人员操作，使用不同的设备，用同样方法获得测量结果的条件。(三)对残留检测标准操作程序（SOP）编写作业指导书的基本要求(6).精密度(变异系数)上海出入境检验检疫－食品伙伴网（）(6).精密度(变异系数)在重现性条件下，对参考标准或加标样重复分析的实验室间变异系数（CV），不得超出Horwita方程计算的水平。该方程如下：•CV=2xE(1-0.5logC)质量分数重现性%CV1µg/kg45*10µg/kg32*100µg/kg231000µg/kg16在重复性条件下，实验室内CV通常在上述数值的一半到三份之二之间。在实验室内重现性条件下进行的分析，其实验室内CV不应大于上述重现性CV。质量分数低于100μg/kg时，用Horwitz方程给出无法接受的高值。因此，浓度低于100μg/kg的CV应尽可能低(三)对残留检测标准操作程序（SOP）编写作业指导书的基本要求上海出入境检验检疫－食品伙伴网（）重现性与其他实验室进行比对或者进行协同实验（按照ISO5725-2）实验室内重现性不同分析员对同一批样品进行分析（尽可能使用不同试剂、不同仪器）(三)对残留检测标准操作程序（SOP）编写作业指导书的基本要求(6).精密度(变异系数)上海出入境检验检疫－食品伙伴网（）（7）标准曲线至少5个水平(包括原点)即0,0.5,1.0,1.5,2.0,4.0倍MRL/MRPL可接受范围线性回归方程y=kx+b相关系数:R2(0.97或更好,理想的为0.99)(三)对残留检测标准操作程序（SOP）编写作业指导书的基本要求上海出入境检验检疫－食品伙伴网（）分析技术96/23/EC附录I的物质局限性LC或GC/MSA组和B组仅在在线或脱机色谱分离时适用仅适用于使用全扫描技术，或使用不记录全质谱图但至少使用3（B组）或4（A组）识别点时LC或GC/IRA组和B组被测物需有红外光谱吸收液相-全扫描DADB组需要有UV光谱吸收液相-荧光B组仅适用于有天然荧光，及转变或衍生后有荧光的分子2-DTLC-全扫描UV/VISB组必须使用二维HPTLC和共色谱法GC-电子捕获检测B组仅在两根柱子极性不同时适用LC-酶免B组仅适用于使用至少两个不同的色谱系统或使用第二种独立的检测方法时LC-UV/VIS（单波长）B组仅适用于使用至少两个不同的色谱系统或使用第二种独立的检测方法时(三)对残留检测标准操作程序（SOP）编写作业指导书的基本要求5.对确证方法的要求上海出入境检验检疫－食品伙伴网（）(三)对残留检测标准操作程序（SOP）编写作业指导书的基本要求5.对确证方法的要求•一般性能标准–确证方法应提供分析物的化学结构信息。–当方法采用内标时，在提取步骤开始时就应将适当的内标加入到测试部分中去。–如果没有合适的内标可用，可以用共色谱法对分析物进行定性。在这种情况下,只应有一个色谱峰，且峰高（或峰面积）的增加相当于加入分析物的量。用GC或LC时，半峰宽应在原来峰宽的90-110%以内，保留时间的变化应在5%以内。–分析物含量等于或接近容许限或判断限的标样或加标样（阳性控制样品），以及阴性控制样和试剂空白都应在对每批样品进行分析时同时执行整个分析过程。在分析仪器上的进样顺序是：试剂空白、阴性控制样、要确证的样品、阴性控制样品再进样，最后是阳性控制样品。顺序的任何调整都应有充分理由证明其合理性。上海出入境检