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常用抗凝剂种类及应用一、基本概念凝固:将血液从血管中抽出,如果未经抗凝,也不做其他处理,通常在几分钟内便自动凝固。一定时间分离后上层析出的淡黄色液体为血清。血浆与血清的区别是:血清中无FIB抗凝:应用物理的或化学的方法,除掉或抑制血液中的某些凝血因子,阻止血液凝固,称为抗凝。离心分离后的上层淡黄色液体为血浆。抗凝剂:能够阻止血液凝固的化学试剂或物质,称为抗凝剂或抗凝物质。促凝:帮助血液快速凝固的过程。促凝剂:帮助血液快速凝固以达血清快速析出的物质。一般成分为胶类物质。二、常用抗凝剂的抗凝原理及适用1、肝素是用于血液化学成分检测的首选抗凝剂。肝素是一种含有硫酸基团的粘多糖,是分散相物质平均分子质量为15000。其抗凝原理主要是通过与抗凝血酶Ⅲ结合引起抗凝血酶Ⅲ构型发生变化,加速凝血酶-凝血酶复合体形成而产生抗凝作用。此外,肝素还能借助血浆辅助因子(肝素辅助因子Ⅱ)来抑制凝血酶。常用肝素抗凝剂是肝素的钠、钾、锂、铵盐,其中以肝素锂最好,但其价格较贵,钠、钾盐会增加血液中的钠、钾含量,铵盐会增加尿素氮的含量。通常用肝素抗凝的剂量为10.0~12.5IU/ml血液。肝素对血液成分干扰较少,不影响红细胞体积,不引起溶血,适用于做细胞渗透性试验、血气、血浆渗透量、红细胞压红积及普通生化测定。但肝素具有抗凝血酶作用,不适合做血凝试验。另外,肝素过量可引起白细胞聚集和血小板减少,所以不适合做白细胞分类和血小板计数,更不能用于止血检验。此外,肝素抗凝血不能用于制作血涂片,因为Wright染色后出现深蓝色背景,影响显微镜减产。肝素抗凝血应于短时间内使用,否则放置过久血液又可凝固。2、乙二胺四乙酸盐(EDTA盐)。EDTA能与血液中Ca2+结合成螯合物,凝血过程被阻断,血液不能发生凝固。EDTA盐有钾、钠、锂盐,国际血液学标准化委员会推荐使用的是EDTA-K2,其溶解度最高,抗凝速度最快。EDTA盐通常配成质量分数是15%的水溶液,每ml血液加1.2mgEDTA,即每5ml血液加0.04ml15%EDTA溶液。EDTA盐可在100℃下干燥,抗凝作用不变。EDTA盐不影响白细胞计数及大小,对红细胞形态影响最小,抑制血小板的聚集,适用一般血液学检测。如果抗凝剂浓度过高,渗透压上升,会造成细胞皱缩。EDTA溶液pH与盐类关系较大,低pH可使细胞膨胀。EDTA-K2可使红细胞体积轻度膨胀,采血后短时间内平均血小板体积非常不稳定半小时后趋于稳定。EDTA-K2使Ca2+、Mg2+下降,同时使肌酸激酶、碱性磷酸酶降低,EDTA-K2的最佳浓度为1.5mg/ml血液,如果血少,中性粒细胞会肿胀分叶消失,血小板会肿胀、崩解,产生正常血小板的碎片,使分析结果产生错误。EDTA盐能抑制或干涉纤维蛋白凝块形成时纤维蛋白单体的聚合,不适于血凝和血小板功能检测,也不适用于钙、钾、钠及含氮物质的测定。此外,EDTA能影响某些酶的活性和抑制红斑狼疮因子,故不适合制作组化染色和检查红斑狼疮细胞的血涂片。3、枸橼酸盐主要是枸橼酸钠,其抗凝原理是能与血液中的Ca2+结合形成螯合物,使Ca2+失去凝血功能,凝血过程被阻断,从而阻止血液凝固。枸橼酸钠有Na3C6H5O7·2H2O和2Na3C6H5O7·11H2O两种晶体,通常用前者配成3.8%或3.2%的水溶液,与血液按照1:9体积混合。大部分凝血试验都可用枸橼酸钠抗凝,它有助于Ⅴ因子和Ⅷ因子的稳定,并且对平均血小板体积及其他凝血因子影响较小,可用于血小板功能分析。枸橼酸钠细胞毒性较小,也是输血中血液保养液的成分之一。但是,枸橼酸钠6mg才能抗凝1ml血液,碱性强,不适用于血液分析和生化测验。三、各种一次性真空采血管用途优点1、安全:易于彻底销毁,减少医源性传染病。2、方便:一次静脉穿刺可采集多管标本,减少不必要的重复操作,省时省力,减轻病人痛苦,容易混匀。3、形势需要:与发达国家接轧,发达国家已有长达60年的使用经验,国内二级以上医院已经采用。4、标识清楚,满足不同标本采集的需求。黄头管(或橘红管):用于生化、免疫等一般检验。标有3、4、5ml刻度。一般采血3ml±。橘红管含有促凝剂,抽血时混匀几次。(在冬天或急诊时使用,促进血液尽快凝固,便于血清分离)蓝头管:凝血项目检查、PLT功能分析、纤溶活性测定。精确采血至2ml刻度(静脉血1.8ml+0.2ml抗凝剂)。1:9。颠倒混匀5次以上。黑头管:0.32ml3.8%枸椽酸钠抗凝管。用于ESR检验。精确采血至第1条标志线,0.4ml抗凝剂+静脉血1.6ml)。缓缓颠倒混匀8次。紫头管:血细胞分析、血型鉴定、交叉配血、G-6-PD测定部分血流变试验免疫学试验。静脉血0.5-1.0ml。抗凝剂:EDTA盐。颠倒混匀5次以上或弹拨混匀。绿头管:主要急诊生化、普通生化、血流变试验、血气分析、免疫学试验、RBC渗透试验。采血量3.0-5.0ML。抗凝剂:肝素钠/肝素锂。颠倒混匀5次以上。四、几点注意事项:1、特殊病人静脉采血应避免输液端。2、蓝头管、黑头管采血量必须精确。3、蓝头管采血尽量放在第2位(红头管之后)。4、抗凝管至少颠倒缓缓混匀5次以上,紫头管采因采血较少可轻轻弹拨混匀。
本文标题:常用抗凝剂
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