实验三线粒体和液泡系的超活染色与观察

实验三线粒体和液泡系的超活染色与观察活体染色是能使生活有机体的细胞或组织特异性着色但对活样品有没有毒害作用的一种活体染色方法，其目的是显示生活细胞内的某些结构，而不影响细胞的活动和产生任何物理化学变化以致引起细胞的死亡。活体染色技术可以用来研究生活状态结构和生理、病理状态。通常吧活染色体分为体外活染色体与体外活体染色两类，体外活体染色又称超活染色，它是有活的动植物分离出部分细胞或组织小块，以染料溶液侵染，染料被选择固定在活细胞的某些结构上而显色，活体染色之说所以能固定‘堆积在细胞内某些特殊的部分，主要是靠染料的电化学特性。碱性染料的胶粒表面带阳离子，酸性染料的胶粒表面带阴离子，而被染得部分本身也是具有阴离子或阳离子，这样，他被彼此之间就发生了吸引作用。但并非任何染料均可用于活体染色，理论上应选择那些对细胞无毒性或毒性很小的染料，且使用时需要配成稀的溶液-实验目的观察动植物活细胞内线粒体、液泡系的动态、数量与分布2学习一些细胞器的超活染色技术实验原理线粒体是细胞内一种重要的细胞器，使细胞进行呼吸的场所。细胞的各项活动所需要的能量，主要是通过线粒体呼吸作用来提供的。活体染色是应用无毒或毒性很小的染色剂真实的专一姓活体染色剂。线粒体中细胞色素氧化酶使燃料保持氧状态呈蓝绿色，而在周围的细胞质染料被还原，成为无色状态中性红为若碱性染料，对液泡稀（高尔基体）的染色有专一性，只将活细胞的液泡系然成红色，细胞核与细胞质完全不变色，这可能是与液泡中某些蛋白有关。三、实验用品1、器材显微镜、恒温水浴锅、解剖盘、剪刀、镊子、双面刀片、载玻片，凹面载玻片、盖玻片、表面皿、吸管、牙签、吸水纸2（1）Ringer溶液氯化钙0.03氯化钾0.25g、氯化钠0.85g蒸馏水100ml（2）10%、1/3000中性红溶液:称取0.5g中性红溶于50mlRinger液，稍加热30~40使之很快溶解，用滤子过滤，装入棕色瓶于暗处保存。临用前,取已配好的1%中性红溶液1毫升，加入29毫升Ringer溶液混匀，装入棕色瓶备用材料人口腔上皮细胞、小麦种子或黄豆幼根根尖四、实验步骤（一）人口腔粘膜上皮细胞线粒体的超活染色与观察清洁的载玻片放在37摄氏度恒温水浴锅的金属板上；滴两滴1/5000詹纳斯绿B染液；用牙签在口腔颊粘膜处稍用力刮去上皮细胞，刮下的粘液状物放大载玻片的染液滴中染色10分钟（注意不可使染液干燥，必要时可加让染液）盖上盖玻片，显微镜下观察(二)植物性能液泡系的超活染色与观察取豆芽的根尖放入中性红染色液滴中，染色5分钟洗去染液，滴一滴Ringer液，盖上盖玻片在油镜下观察