实验立克次体螺旋体及病毒的检测

第九次实验衣原体、支原体、立克次体、螺旋体、放线菌的形态观察病毒的形态及分离培养病毒血凝和病毒血凝抑制试验实验目的与要求1.掌握沙眼衣原体包涵体镜下形态。2.掌握支原体的菌落形态。3.掌握立克次体的镜下形态。4.掌握几种螺旋体的镜下形态。5.熟悉镀银染色方法。6.熟悉病毒种类和形态。7.掌握狂犬病毒包涵体的形态。8.熟悉常见病毒培养方法。1.沙眼衣原体包涵体的形态—示教图象2.支原体的菌落，脲酶试验—示教图象3.立克次体的形态4.螺旋体形态(1)钩端螺旋体—示教(2)梅毒螺旋体、回归热螺旋体—示教(3)奋森疏螺旋体的镀银染色—每人做实验内容•5.病毒：(1)病毒的形态—示教图象(2)病毒的培养方法—示教(3)狂犬病毒包涵体的形态—示教(4)病毒血凝试验—小组做(5)病毒血凝抑制试验—示教本次实验示教•恙虫病立克次体的镜下形态•钩端螺旋体的镜下形态•回归热疏螺旋体的镜下形态•病毒血凝实验和血凝抑制实验本次实验操作•镀银染色法•病毒血凝实验小结•衣原体、支原体、立克次体、螺旋体的检测方法•镀银染色方法•病毒培养方法衣原体包涵体支原体菌落普氏立克次体恙虫病立克次体镀银染色牙签取牙垢涂片干燥固定液固定1分钟媒染剂加温染半分钟水冲洗水冲洗硝酸银微加温染半分钟水冲洗、待干镜检梅毒螺旋体一期梅毒二期梅毒三期梅毒各期梅毒钩端螺旋体回归热螺旋体回归热螺旋体病毒的培养方法•动物接种—病毒的分离、鉴定、制备疫苗、制备免疫诊断血清等•细胞培养—分离、鉴定病毒•鸡胚培养—痘类病毒、粘液病毒和疱疹病毒的分离1.绒毛尿囊膜接种2.尿囊腔接种3.羊膜腔接种4.卵黄囊接种鸡胚接种1.绒毛尿囊膜接种2.尿囊腔接种3.羊膜腔接种4.卵黄囊接种1.原理:有些病毒如流感病毒在一定条件下，能与鸡、豚鼠或人的红细胞发生凝集现象。这是因为这些病毒表面有血凝素，能与红细胞表面的糖蛋白受体结合而形成凝集。病毒的血凝试验2.方法试管号123456789生理盐水（ml）0.20.20.20.20.20.20.20.20.2尿囊液（ml）0.20.20.20.20.20.20.20.2---病毒稀释度1:21:41:81:161:321:641:1281:256—0.5%鸡红细胞(ml)0.20.20.20.20.20.20.20.20.2终浓度振荡1分钟，置室温30~45分钟观察结果弃0.2病毒的血凝抑制试验1.原理：流感病毒可凝集红细胞，但相应的抗体可结合病毒的HA，使其失去凝集作用，借此可用已知的抗体鉴定未知病毒，或用已知的病毒抗原来测定病人血清中的相应抗体。2.方法试管号12345678910生理盐水0.250.250.250.250.250.250.250.250.250.5血清（1:5）0.250.250.250.250.250.250.250.250.25—稀释度1:101:201:401:801:1601:3201:6401:1280——病毒抗原0.250.250.250.250.250.250.250.25—0.250.5%鸡红细胞0.250.250.250.250.250.250.250.250.250.25（血清对照）（抗原对照）振荡1分钟，室温30~45分钟观察结果弃去0.25