小鼠新颖寻求特质对酒精的运动激活效应的影响-文献报告

文献报告小鼠新颖寻求特质对酒精的运动激活效应的影响一问题提出1、相关名词解释（新颖寻求：一种对新奇的、具有奖励意义的刺激物表现出兴奋和愉悦的先天倾向，这种倾向引导个体趋利避害。（(Cloninger,1986）（感觉寻求：Zuckerman将感觉寻求定义为个体对变化的、新异的、复杂的感觉及体验的追求,以及为了获得这种体验而进行生理的、社会的、法律的、经济的冒险活动的愿望。（虽然感觉寻求和新颖求的提法不同,但是两者都是反映个体对新颖刺激的反应倾向。研究发现(Zuckerman&Cloninger,1996)两者具有显著相关。2、Ballaz(2009)认为,动物的新颖寻求行为可用于模拟人类感觉寻求特质。3、相关模型介绍不可逃避的新颖情境（其中的自发活动模型被广泛应用）--不可逃避，是新颖刺激所以也是一种应急刺激。（Misslin&Cigrang,1986)可逃避的新颖情境（为排除应激成分，采用新颖客体偏爱模型和新颖环境偏爱模型）4、有研究显示：新颖寻求与成瘾行为之间不是简单的线性关系。高、低新颖寻求动物对不同成瘾药物的药理学效应的反应存在差异。这些反应差异受到成瘾药物种类、给药剂量、新颖寻求测量模型以及成瘾模型等多方面因素的影响。5、生活中最常见的酒精成瘾与新颖寻求特质存在什么关系？目前尚未有研究。6、酒精成瘾的神经生化机制有别于其他药物成瘾：磷脂酶D是一种以乙醇为底物的酶。在有乙醇的情况下,它可催化乙醇生成磷脂酰乙醇胺;后者为唯一一种仅在有酒精的情况下生成的磷脂,易与膜融合而不易被磷脂酶水解,这可增加细胞膜的流动性,也是对酒精所诱导胞膜流动性的一种耐受(张振华,邱毅,赵振国,梁建辉,2008)。7、由于高、低新颖寻求动物对成瘾药物反应的差异与成瘾药物种类、新颖寻求测量模型以及成瘾模型有关,并且,酒精成瘾的神经生化机制也有别于其他药物成瘾。因此,酒精成瘾与新颖寻求特质的关系,值得研究。8、为了考察这两种模型所测量的新颖寻求特质是否都与酒精成瘾行为相关、抑或哪一种所测量的新颖寻求特质对酒精成瘾行为的影响更为显著,本实验首先采用两种新颖寻求模型(即新颖环境中自发活动模型和新颖客体偏爱模型)将昆明小鼠分别区分为高、低自发活动组和高、低新颖客体偏爱组。10、Newlin和Thomson(1990)研究发现,人对酒精的耐受或敏感化(chronictoleranceorsensitization)反应可以作为预测酒精偏爱和酒精滥用的指标。啮齿类动物的敏感化行为表现之一是自发活动(locomotoractivity,LA)的增加。11、本实验采用LA模型考察高、低新颖寻求动物对酒精运动激活效应的反应(酒精处理导致的自发活动)是否存在差异,以期揭示哪些类型的新颖寻求特质与酒精成瘾密切相关。二研究方法1、实验动物雄性成龄昆明小鼠63只(军事医学科学院提供),起始体重在28g至45g之间。每6只生活在一个饲养笼内,自由进水进食。光周期为8:00至20:00,环境温度22±1℃。在动物适应性饲养1周后进入正式实验阶段。所有实验程序的执行符合有关动物保护和使用条例。2、实验药品自行配置无菌生理盐水及20%酒精溶液。采用腹腔注射i.p.)形式,酒精注射剂量为2g/kg(Kim&Souza-Formigoni,2010;Didone,Quoilin,Tirelli,&Quertemont,2008;Stevenson,Besheer,&Hodge,2008;Meyer&Phillips,2007)。3、实验装置新颖环境中自发活动模型的测试装置为LA测试箱。LA测试箱为40cm×40cm×50cm黑色有机玻璃箱新颖客体偏爱模型的测试装置为直径98cm,高60cm的圆形旷场,所使用的新颖客体为6cm×6cm×18cm立方体。摄像跟踪系统自动记录动物的活动情况(水平运动距离,单位为厘米;中国科学院心理研究所提供)。4、试验程序A（分组：在实验的第1至4天进行新颖寻求特质测试---记录trial9中小鼠在新颖区域内停留时间--根据动物在新颖区域内的停留时间长短,将前1/3和后1/3的动物分别划分为高、低新颖客体偏爱组--然后再进一步将其分为四组,即高新颖客体偏爱–盐水组(HOP–S,n=17),高新颖客体偏爱–酒精组(HOP–A,n=15),低新颖客体偏爱–盐水组(LOP–S,n=13)和低新颖客体偏爱–酒精组(LOP–A,n=18)。（第4天(d4),采用新颖环境中自发活动模型,记录小鼠在首次接触LA测试箱30min内的水平运动距离(Kliethermesetal.,2006)据此将前1/3和后1/3的动物分别划分为高、低自发活动组。将其分为四组,即高自发活动–盐水组(HR–S,n=15),高自发活动–酒精组(HR–A,n=16),低自发活动–盐水组(LR–S,n=15)和低自发活动–酒精组(LR–A,n=17)。B、酒精处理及运动激活效应的观测LA模型一般分为3个时期：药物处理期(行为敏感化形成期)、戒断期(转化期)和激发期(行为敏感化表达期)。第5天(d5)所有小鼠注射生理盐水后,立即放入LA检测箱,记录其10min内水平运动距离,作为运动基值。连续10天(d6–15)酒精组接受酒精处理,盐水组接受等量生理盐水处理,给药后立即将动物放入LA检测箱并记录其10min内水平运动距离。戒断48h(d16–17)在实验的第18天(d18),所有动物接受2g/kg酒精激发。5、数据分析所有数据利用SPSS13.0软件进行处理,以平均值±标准误(M±SEM)的形式表示。采用重复测量两因素方差分析(two-wayANOVA)方法处理行为敏感化形成期数据。使用单因素方差分析(one-wayANOVA)方法处理新颖寻求测试、酒精急性处理和酒精激发期数据。三、实验结果3.1两种新颖寻求模型的相关性在新颖环境中的自发活动量均值为8778.57±315.28cm；在新颖区域内停留时间均值为22.14±5.28sPearson相关分析(Kliethermesetal.,2006)表明两者不存在相关(p0.05)3.2高、低自发活动动物的酒精运动激活效应新颖环境自发活动模型中,对各组自发活动情况进行方差分析,结果显示组间差异显著。F(3,36)=18.44,p0.01事后多重比较分析显示,HR–S组与LR–S组、HR–A组与LR–A组差异显著(均为p0.01),而HR–S组与HR–A组、LR–S组与LR–A组差异不显著(均为p0.05)。这说明,据测试结果进行的分组是有效的。3.2.1高、低自发活动动物在酒精处理期的表现第一天接受酒精或盐水处理之后动物的自发活动经单因素方差分析表明,组间差异显著,F(3,36)=15.61,p0.01。事后多重比较分析表明,LR–A组与LR–S组、HR–A与HR–S组、LR–A组与HR–A组差异显著(p0.01),这说明,酒精处理组的活动量显著高于对应盐水组,并且LR–A组比HR–A组对酒精急性处理的运动激活效应更敏感。图13.2.2高、低自发活动动物在酒精激发期的表现图23.3高、低新颖客体偏爱动物的酒精运动激活效应在新颖客体偏爱模型中,对各组在新颖区域内停留时间进行方差分析,结果显示组间差异显著,F(3,36)=8.65,p0.01。事后多重比较分析表明,HOP–S组与LOP–S组、HOP–A组与LOP–A组差异显著(均为p0.01),HOP–S组与HOP–A组、LOP–S组与LOP–A组差异不显著(均为p0.05)。这说明据测试结果进行的分组是有效的。3.3.1高、低新颖客体偏爱动物在酒精处理期的表现单因素方差分析表明,第一天药物处理后动物的自发活动,组间差异显著,F(3,36)=7.69,p0.01事后多重比较结果表明,HOP–A组和HOP–S组、LOP–A组和LOP–S组差异显著(p0.01),但HOP–A组和LOP–A组不存在显著差异(p0.05)。这说明高、低新颖客体偏爱动物对酒精急性处理诱导的运动激活效应反应基本相同。图33.3.2高、低新颖客体偏爱动物在酒精激发期的表现在酒精激发期,高、低新颖客体偏爱动物的表现如图4所示,单因素方差分析表明,组间差异不显著,F(3,36)=2.76,p0.05。这说明高、低新颖客体偏爱动物都没有形成酒精行为敏感化,对酒精运动激活效应的反应强度也没有差别。图44讨论实验结果表明：两种新颖寻求模型所测得的特质对酒精成瘾行为的影响不同：高、低自发活动小鼠对酒精运动激活效应的反应存在显著差异——新颖环境中低自发活动小鼠,在酒精急性、慢性处理乃至酒精激发过程中均表现出高水平的自发活动,说明这一新颖寻求特质能够强化酒精成瘾但是高、低新颖客体偏爱小鼠对酒精运动激活效应的反应没有差异,提示新颖客体偏爱这一特质在酒精成瘾中的作用不大。4.1（1）当新颖刺激是动物从未接触过的新颖环境时,主要以动物的活动性作为测量指标,但动物的反应中会掺杂应激反应等因素（2）如果新颖刺激为熟悉环境中放置的新颖客体,主要以动物的趋向性行为作为测量指标,同时动物的反应中会掺杂记忆的保持和提取等因素。（3）而且,这些观测指标很容易受到焦虑等情绪因素的干扰。（4）以上表明测量指标可能受到无关因素的影响（5）可能是不同新颖寻求模型的测量指标互不相关,以及不同新颖寻求模型测得的特质对酒精成瘾行为影响不一致的原因。郑希耕等(2005)发现,低自发活动大鼠比高自发活动大鼠对吗啡(5mg/kg)急性运动激活效应的反应更剧烈,经过吗啡(5mg/kg/d)的慢性处理,只有低自发活动大鼠形成了吗啡行为敏感化。本实验证明,新颖环境低自发活动这一行为特质对酒精成瘾的影响与其对吗啡成瘾的影响相同本实验没有成功诱导出酒精行为敏感化。一些研究表明高、低自发活动动物对成瘾药物运动激活效应的反应受到给药剂量和激发剂量的影响(Hooks,Jones,Neill,&Justice,1992;Kalinichevetal.,2004)。因为酒精具有镇静和兴奋双重效应(张镛,秦震,1996),剂量过小难以产生运动兴奋效应,而剂量太大则会使动物处于镇静状态。同时,对于酒精诱导的行为敏感化,动物的种系和成熟度也是重要的影响因素。研究发现,同样的给药剂量,并不是所有种系的啮齿类动物都能诱发形成酒精敏感化。不同品系对酒精反应的差异可能与体内的乙醇脱氢酶有关。(Meyer&Phillips,2007;Chuck,McLaughlin,Arizzi-LaFrance,Salamone,&Correa,2006)不同品系对酒精反应的差异可能与体内的乙醇脱氢酶有关研究也发现(Stevensonetal.,2008),青龄小鼠对酒精的易感性要高于成龄小鼠。所以，用药剂量、小鼠种系和成熟度可能是影响本实验结果的因素。因此有必要在以后的研究中进一步摸索建立小鼠酒精行为敏感化模型的相关参数,包括用药剂量、小鼠种系和成熟度等。