奴卡菌的初步鉴定

奴卡菌的初步鉴定来源：《中外健康文摘》2011年第4期供稿|作者：王发表时间：2011-5-17[导读]菌株：2003.7-2004.7年临床上分离菌株.星形奴卡菌一株（全国微生物质控菌株）巴西奴卡菌（标准菌株）。王欣（抚顺市第四医院检验科辽宁抚顺113001）【中图分类号】R446.1【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2011)04-0202-02【关键词】奴卡菌奴卡菌属于放线菌属，可引起人的奴卡菌病，本菌多由呼吸道及皮肤创口进入人体，主要引起原发性化脓性肺部感染，出现类似肺结核的症状，从肺部病灶可转移至皮下组织，形成脓疡和多发性瘘管。也可扩散至其他脏器，脑脓肿，腹膜炎，在组织内及脓汁中亦有类似“硫磺样颗粒”，呈淡黄色，红色及黑色不等，称为色素颗粒。在显微镜下检查可见此小颗粒由分叉的菌丝组成，颗粒周围的菌丝呈棒状；但在痰和脑脊液标本中则见不到此种颗粒，只能见到革兰阳性的分叉或杆状杆菌。经改良抗酸染色，疑似该菌感染并不困难，但将其鉴定到种则很困难。本文以临床患者标本中培养分离出奴卡菌20株，结合药敏试验，生化反应和Biomeriex公司的酵母菌鉴定用API20CAUX系统，对其进行初步鉴定[1]。1材料与方法1.1菌株：2003.7-2004.7年临床上分离菌株.星形奴卡菌一株（全国微生物质控菌株）巴西奴卡菌（标准菌株）。1.2试剂：血培养基；MH培养基；药敏纸片庆大霉素、妥布霉素、阿米卡星、红霉素；API20CAUX（法国梅里埃公司）；细菌生化微量鉴定管（杭州天和微生物试剂有限公司）。1.3试验方法1.3.1药敏试验：将0.5麦氏单位的菌液接种于MH琼脂培养基，约10min后加药敏纸片：庆大霉素10ug,妥布霉素10ug，阿米卡星30ug,红霉素15ug,温育于35℃经72h。判定耐药的标准为：庆大霉素抑菌环≤15mm，妥布霉素≤20mm,阿米卡星≤20mm,红霉素≤30mm，环丙沙星≥35mm。[2]1.3.2API20CAUX系统的应用：依说明书将2.0麦氏单位的菌液分别加入系统的个孔内，温育于35℃经7d。为防止干燥应在装置内加无菌的湿纸。观察结果时与对照孔比较，记录糖的同化能力。1.3.3生化试验明胶液化试验:将菌液用白金针刺入明胶培养基内，35℃温育7d.取出放4℃15min,反复摇动试管至45°，观察有无液化的明胶流动。乙酰胺利用试验：将菌液接种于乙酰胺斜面，于35℃温育7d.斜面由淡黄橙色变为鲜明粉色为阳性。枸橼酸盐利用试验：将菌液接种于枸橼酸盐斜面，于35℃温育7d，如斜面呈蓝色为阳性。2结合奴卡菌的药敏试验和生化反应的鉴定程序（见图1）查看大图3实验结果3.1药敏类型结果（表1）。表1药敏类型结果3.2药敏类型RRSRSSSR生化试验结果（表2）。表2药敏类型RRSRSSSR生化试验结果查看大图3.3根据生化反应RRSRSSSR型最终鉴定结果（表3）。表3根据生化反应RRSRSSSR型最终鉴定结果查看大图4讨论如今，与感染人有关的奴卡菌已有10种，仅星型奴卡菌复合群即分为6种，传统的方法已不能满足临床的需要。本文结合应用药敏试验，生化反应和Biomeriex公司的酵母菌鉴定用API20CAUX系统鉴定20种临床分离的奴卡菌，结果表明用此方法可以全部正确鉴定，对奴卡菌的鉴定具有重要意义。参考文献[1]孙慧芳，王金良.奴卡菌的新鉴定方法和程序.中华检验医学杂志.[2]KiskaDL,Hicksk,PetlitDJ.IdentificationofmedicallyrelevantNocardiaspecieswithanabbreviatedbatteryoftests.JclinMicrobiol,2002,40;1346-1351.