学案动物细胞融合与单克隆抗体

纸上得来终觉浅，绝知此事要躬行。班级__________姓名___________小组__________评价等级_________编号________沅江三中四环八步教学模式生物导学案第1页（共5页）2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体【学习目标】1、掌握动物细胞融合与植物体细胞杂交的区别和联系。2、简述动物细胞融合和单克隆抗体制备的过程。3、了解单克隆抗体在医学实践中的应用，并说其应用实例。【学习重难点】单克隆抗体的制备课前预习一、动物细胞融合1、概念：_______或_______动物细胞结合形一个细胞的过程，也称细胞杂交。2、结果：形成___________。3、过程：两个或多个细胞PEG灭活的病毒或___________________________________。4、意义：克服了___________的不亲和性，成为研究___________、___________、肿瘤和____________培育的重要手段。二、单克隆抗体1、抗体⑴产生细胞：_________________。⑵成分：__________。⑶特点：从__________中分离出的抗体产量低、纯度低、特异性差。2、单克隆抗体的制备(1)过程⑵杂交瘤细胞的特点：____________________、____________________。⑶单克隆抗体的优点：____________、____________、____________。㈢、单克隆抗体的应用1、作为诊断试剂，具有__________、__________、__________、__________的优点。2、用于治疗疾病和运载药物：主要用于治疗_______、可制成___________。◆合作探究（结合已学知识，思考以下问题。将不能完成的问题用红笔画出来，并在小组内讨论交流，将交流的结果整理在学案上。）给小鼠注射特定的抗原蛋白培养骨髓瘤细胞→从________中分离B淋巴细胞→骨髓瘤细胞灭活病毒融合未融合细胞____________________选择培养基_____________克隆检测小鼠体内培养体外培养→__________抗体纸上得来终觉浅，绝知此事要躬行。班级__________姓名___________小组__________评价等级_________编号________沅江三中四环八步教学模式生物导学案第2页（共5页）【探究一】:动物细胞的融合思考：1、动物细胞融合原理和植物体细胞杂交原理是否相同？它们的融合过程是否相同？2、动物细胞融合后能形成杂种动物个体吗？3、诱导融合的方法有哪些？为什么灭活的病毒能作为诱导剂？不灭活的病毒能作为诱导剂吗？4、动物细胞融合的意义?5.动物细胞融合最重要的用途是什么？【总结】植物体细胞杂交和动物细胞融合的异同项目植物体细胞杂交动物细胞融合原理细胞融合的方法用去除细胞壁后诱导原生质体融合用使细胞分散后诱导细胞融合诱导手段离心、电刺激、振动、聚乙二醇（PEG）诱导除应用植物细胞杂交手段外，还有用结果应用培育植物新品种主要意义相同点原生质体融合原理相同；原生质体融合的方法相似【探究二】:单克隆抗体制备的原理聚焦一：制备的原理1、体液免疫中的抗体由何种细胞产生？传统的抗体生产方法及缺陷是什么？2、一种抗原侵入机体之后，引起机体免疫反应产生的抗体只有一种吗？一种B淋巴细胞能产生几种抗体？3、在体外培养的条件下，一个B淋巴细胞有没有可能无限增殖？4、什么细胞是可以无限增殖的？有什么办法让B淋巴细胞也具有这样的能力？5、杂交瘤细胞有什么特点?小结：我们可以利用产生特异性抗体的功能，利用无限增殖的特性，利用技术将两种细胞融合获得杂交瘤细胞，利用技术大量培养杂交瘤细胞。纸上得来终觉浅，绝知此事要躬行。班级__________姓名___________小组__________评价等级_________编号________沅江三中四环八步教学模式生物导学案第3页（共5页）聚焦二：单克隆抗体制备的过程1、用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的应该是什么细胞?2、如果把B淋巴细胞和骨髓瘤细胞放在一起时，会有几种融合方式（类型）？符合生产要求的是哪种类型？3、整个制备过程要经过两次筛选的目的各是什么？4、单克隆抗体制备的过程中用到了哪两种技术?5、单克隆抗体有什么优点?6.制备过程：第一步：将注射到小鼠体内进行免疫；第二步：从该小鼠脾脏中获得能够产生抗体的细胞，与小鼠的细胞在，或聚乙二醇的诱导下融合；第三步：在特定的培养基中，筛选出细胞；第四步：克隆化培养杂交瘤细胞，进行抗体检测，从中挑选出的细胞群，继续培养；第五步：将该杂交瘤细胞在条件下大规模培养或注射到小鼠内增殖，然后再从培养液或小鼠腹水中提取，分离纯化单克隆抗体；总结：1.产生抗体的细胞是：产生单克隆抗体的细胞是：2.杂交瘤细胞的特点：3.两次筛选的目的：第一次筛选是为了获得，第二次筛选时为了获得4.单克隆抗体的优点是：拓展资料杂交瘤细胞的抗体检测及克隆化培养介绍融合后的细胞经选择性培养基培养后，能存活的细胞就是杂交瘤细胞，但这些杂交瘤细胞并非都是能分泌所需抗体的细胞，通常用“有限稀释法”来选择。将杂交瘤细胞稀释，用多孔细胞培养板培养，使每孔不超过一个细胞，通过培养让其增殖。然后检测各孔上清液中细胞分泌的抗体，那么上清液可与特定抗原结合的培养孔为阳性孔。阳性孔中的细胞还不能保证是来自单个细胞，挑选阳性孔的细胞继续进行有限稀释，一般需进行3～4次，直至确信每个孔中增殖的细胞为单克隆细胞。该过程即为杂交瘤细胞的克隆化培养。聚焦三单克隆抗体的应用1、单克隆抗体的应用有哪些？2、生物导弹的组成及优点？纸上得来终觉浅，绝知此事要躬行。班级__________姓名___________小组__________评价等级_________编号________沅江三中四环八步教学模式生物导学案第4页（共5页）◆训练达标（找规律，学方法）1、基因型为Aa与基因型为Bb的动物体细胞混合，用灭活的仙台病毒处理后，不可能获得下列哪种基因型的细胞()A．AAaaB．AaBbC．AabbD．BBbb2、动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是()①诱导融合的方法完全相同②所用的技术手段不相同③所采用的原理完全相同④都能形成杂种细胞A.①②B.①③C.②④D.③④3、单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（）①淋巴细胞②小鼠骨髓瘤细胞③B淋巴细胞自身融合细胞④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞⑤杂交瘤细胞A．②④B．①③⑤C．①②③④D．②③4、关于单克隆抗体，下列叙述不正确的是()A、可以制成诊断盒．用于疾病的珍断B、可以与药物结合，用于病变细胞的定向治疗C、可以利用基因工程技术生产D、可以在生物体内生产，不能体外生产5、“生物导弹”是指()A、单克隆抗体B、带有特定药物的单克隆抗体C、杂交细胞D、B淋巴细胞1---5、CCCDB6．1975年科学家首次利用B淋巴细胞杂交瘤技术制备出单克隆抗体。请观察下图，回答问题：（1）单克隆抗体是指，其特点是。（2）1984年以来，科学家针对如右图所示的单克隆抗体来自，应用于人体，会作为____________产生，加速排斥反应，以及完整的抗体分子的相对分子质量过大，难以穿透肿瘤组织，达不到有效治疗的浓度等问题，制备出可用于肿瘤治疗的相对分子质量小的单克隆抗体。（3）制备单克隆抗体的B淋巴细胞一般从_______（器官）培养基特殊成分主要作用次黄嘌呤骨髓瘤细胞不能利用氨基蝶嘌呤阻断DNA合成胸腺嘧啶核苷脾细胞用于合成DNA中采集。从下表看，用于筛选杂交瘤细胞的是特定的培养基。（4）大量制备单克隆抗体的方法主要有两种：①体外培养法，可获得10μg/mL的抗体；②动物体内诱生法可获得5~20mg/mL的抗体。你选择的方法及原因纸上得来终觉浅，绝知此事要躬行。班级__________姓名___________小组__________评价等级_________编号________沅江三中四环八步教学模式生物导学案第5页（共5页）是。（1）化学性质单一，特异性强的抗体特异性强，灵敏度高（2）鼠异物免疫反应（3）脾选择（4）大量生产选①，小规模生产选②（答案合理即可）7、下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图。（1）技术是单克隆抗体技术的基础。（2）在图中HAT培养上，未有融合的_________________和融合的_________________都会死亡，只有融合的杂种细胞才能生长。（3）单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最主要的优点是_________。（4）选出的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞的迅速特点，又具备淋巴细胞的_________特点，经过选择性培养的杂交瘤细胞，还需进行______________和___________，经多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。最后将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养，或小鼠腹腔内增殖，从________________或________________中，就可以提取出大量的单克隆抗体了。（5）淋巴细胞是由动物体中的细胞分化、发育而来。(1)动物细胞培养(2)亲本细胞具有同种核的细胞(3)特异性强，灵敏度高，并可能大量制备(4)大量增殖分泌专一抗体克隆化培养抗体检测细胞培养液小鼠腹水(5)骨髓造血干