太子参白芍方等补气生血系列方对失血性血虚小鼠的实验研究

太子参白芍方等补气生血系列方对失血性血虚小鼠的实验研究凌珊（江西中医学院330006）黄丽萍（江西中医学院药理学科组330006）中文摘要目的：观察太子参白芍方等补气生血系列方对失血性血虚小鼠的补血作用。方法：将不同补气药与补血药组成配伍，每只小鼠放血0.5mL的方法制造血虚模型，观察各补气生血方剂对血虚小鼠外周血液指标、骨髓有核细胞数及脾脏、肝脏重量的影响，比较不同补气生血方补血作用大小。结果：造模后第4d、第7d，补气生血系列方能明显升高外周血中RBC、HGB、HCT的值，与模型组相比有显著性差异。各补气生血方对脾脏系数、骨髓有何细胞数有一定的影响，但与模型组相比没有显著性差异。其中甘草何首乌组、黄芪当归组效果最佳。且当归黄芪组、甘草何首乌组、人参何首乌组、灵芝白芍组能使RET%明显减低，与模型组比较有显著性差异。结论：综合各项观察指标，补气生血系列方剂均有一定的补血作用，黄芪当归组与甘草何首乌组对失血性血虚小鼠的补血作用最佳，且后者在某些方面作用优于前者。关键词：补气生血方剂；失血性血虚；补血作用ABSTRACTPurpose:ToobserveheterophyllapeonyFangqiBloodseriesinhemorrhagicdeficientmicewithBlood.Methods:ThedifferentcompositionofqiandHematiniccompatibility,eachmousemethodofmanufactureofblood0.5mldeficientmodel,observedqideficientmiceBloodprescriptiononindicatorsofperipheralblood,bonemarrowandspleencells,theweightoftheliver,tocomparetheroleofnourishingthesizeofthebloodBloodside.Results:Aftertheseventhday,andthemodelgroup,AstragalusAngelica,LicoricehigherPolygonumgroupRBC;AstragalusandAngelicagrouphadhigherHGB;licoricehigherPolygonumgroupHCT,thedifferencesweresignificant.Andcomparedwithmodelgroup,RAgroupangelica,licoricePolygonumgroup,GinsengPolygonumgroup,GanodermapeonygroupRET%ofmore.Conclusions:Allindexes,comparedwithothercombinationsandliquoriceAstragalusAngelicagroupPolygonumdeficientmice,thebloodihemorrhagicbesteffect.江西中医学院毕业论文1KeywordsQiBloodprescription;hemorrhagicblooddeficiency;bloodeffect前言现代实验已证实当归补血汤作为补气生血的代表方具有很好的功效,方中重用黄芪（5份）大补脾肺之气，以资气血生化之源，为君药；配伍当归（1份）补血和营，为臣药。二者配伍，阳生阴长，气旺血生，正如李东垣所云：“血不自生，须得生阳气之药，血自旺矣。”然而补气之药非黄芪一物，尚有人参、西洋参、太子参等；补血之品亦非当归一味，另有何首乌、阿胶、白芍等。因此当归与黄芪的组合是否为最佳配伍，其他补气药与补血药的配伍可否替代它甚至达到更好疗效？本实验尝试从给药组、模型组、空白组表征小鼠外周血象、脾系数、骨髓有核细胞数各指标变化的角度，探索不同配伍药物的补气生血效果，丰富中医补气生血方剂理论。正文1实验仪器与材料1.1试验动物：小白鼠，昆明种，体重18-22g，均由江西中医学院动物中心提供，合格证号：SCXK-2005-0001。1.2试验药材：黄芪、太子参、灵芝、人参、甘草、西洋参、扁豆、当归、白芍、何首乌、阿胶。购自北京鹤元堂医药科技有限公司。1.3试验试剂：EDTA-K2，由国药集团化学试剂有限公司出品，批号：F20080423；火棉胶，天津市大茂化学试剂厂，批号：20050819；冰醋酸，由汕头市光华化工厂出品，批号：070121。1.4仪器设备：血球分析仪Sysmex-2000iV（SysmexCorporation，日本）；WS70-1型红外快速干燥器（上海锦屏仪器仪表有限公司）；数显恒温水浴锅HH-2(国华电器有限公司)；电子分析天平ARll40/C（奥豪斯上海公司生产）；电子天平（常熟市天量仪器有限责任公司）；40uL微量采血管（姜堰市建华医疗器械有限公司生产）；玻璃毛细管（华西医科大学仪器厂）；血球计数板（上海市求精生化试剂仪器有限公司生产）；一次性使用无菌注射器（江西三鑫医疗器械集团有限公司）。2.试验方法江西中医学院毕业论文22.1补气生血系列方表1.补气生血系列方剂实验安排表实验号补气药补血药1234567黄芪太子参灵芝人参甘草西洋参扁豆当归白芍白芍何首乌何首乌阿胶阿胶2.2药物的制备及给药方法称取黄芪45g，当归9g，加蒸馏水浸泡1h，然后加500mL和300mL蒸馏水煮沸2次，每次1h，合并水煎液，浓缩至水煎液浓度0.6g生药/mL。黄芪当归方（当归补血汤组）给药量12g/kg，给药0.2mL/10g，所需配成的浓度为0.6g/mL。太子参白芍方，灵芝白芍方，人参何首乌方，甘草何首乌方，西洋参阿胶方，扁豆阿胶方的煎煮方法及给药方法同上。2.3造模取90小鼠，雌雄各半，分为空白组，模型组，黄芪当归组，山药当归组，太子参白芍组，灵芝白芍组，人参何首乌组，甘草何首乌组，西洋参阿胶组，扁豆阿胶组。各组小鼠断尾采血，测定正常血象值。测定后每只小鼠眼眶放血0.5mL，造成血虚模型[1]。从造模当天起，各给药组灌胃给与相应的药物，给药方法见2.2。空白组和模型组给予等量的生理盐水，连续10d。测定造模后第1d、第4d、第7d、第10d的外周血液指标变化。于末次给药1.5h，测完血象后，处死全部小鼠，测定其肝脾系数、骨髓有核细胞数。2.4血虚小鼠外周血象测定用全自动血球分析仪测定HGB、RBC、、WBC和PLT等指标。小鼠断尾取血0.05mL到EDTA-K2抗凝管中，用微量移液器准确移取160uL的稀释液（血球分析仪专用稀释液）到0.5mL的离心管中，然后用微量采血管准确移取40uL血液到稀释液中，摇匀，然后用全自动血球分析仪进行检测。江西中医学院毕业论文32.5骨髓有核细胞计数[2]第10d颈椎脱位处死小鼠，取左侧股骨用3%醋酸液10mL冲出骨髓内细胞。在血细胞计数板上计数4个大方格的细胞数，所得数×2.5×104，即一根股骨中的骨髓有核细胞数。2.6脾脏相关指数比较[3]小鼠处死后，先用电子秤称出每只小鼠的体重，然后剖开，暴露肝脏和脾脏，小心完整的取出二脏器，洗去血污，去除系膜及脂肪，用分析天平称出每个肝脏、脾脏的重量，然后算出相应的系数。（计算方法：脾脏系数=脾重/体重×100%，肝脏系数=胸腺重/体重×100%）。2.7数据统计所有实验数据运用SPSS11.5软件处理，各组数据结果以x±s表示，组间比较用t检验。3.结果3.1补气生血系列方剂对失血性血虚小鼠RBC、HGB、HCT的影响结果见表2、3、4。在造模后4d、7d，补气生血系列方均对RBC、HGB、HCT有一定的提升作用，太子参白芍方、灵芝白芍方、人参何首乌方、甘草何首乌方、黄芪当归方与模型组相比，都有显著性差异。其中黄芪当归方、甘草何首乌方效果最佳，西洋参阿胶方、扁豆阿胶方效果较差。表2补气生血系列方剂对失血性血虚小鼠RBC的影响（x±s，n=10，1012/L）组别剂量(g生药/kg)造模前造模后第1d第4d第7d第10d空白模型黄芪当归太子参白芍灵芝白芍人参何首乌甘草何首乌西洋参阿胶扁豆阿胶-12g/kg12g/kg12g/kg12g/kg12g/kg12g/kg12g/kg11.11±0.2710.91±0.3711.18±0.3110.81±0.3211.25±0.4211.05±0.3211.45±0.3810.75±0.2410.73±0.2110.99±0.197.12±0.16▲▲7.16±0.24.46±0.267.48±0.177.56±0.247.61±0.257.57±0.297.34±0.3210.46±0.158.17±0.17▲▲8.39±0.228.83±0.259.00±0.33﹡9.13±0.29**9.42±0.26**8.93±0.29﹡8.65±0.2910.70±0.269.30±0.23▲▲10.11±0.23﹡9.48±0.189.67±0.279.66±0.2810.28±0.25**9.31±0.309.73±0.2510.69±0.1810.04±0.2510.79±0.2110.27±0.1810.61±0.2310.28±0.2911.03±0.2110.18±0.2910.61±0.25与空白组相比：▲P0.05▲▲P0.01与相应模型组相比：﹡P0.05，**P0.01江西中医学院毕业论文4表3补气生血系列方失血性血虚小鼠HGB的影响（x±s，n=10，g/L）组别剂量(g生药/kg)造模前造模后第1d第4d第7d第10d空白模型黄芪当归太子参白芍灵芝白芍人参何首乌甘草何首乌西洋参阿胶扁豆阿胶-12g/kg12g/kg12g/kg12g/kg12g/kg12g/kg12g/kg162.2±3.91162.7±5.02165.3±3.72163.6±5.06168.0±5.38160.3±3.74167.1±4.20159.2±2.98158.0±3.75157.8±4.58105.6±1.86▲▲102.8±3.51111.7±4.18111.7±2.27108.2±3.14114.2±3.93108.0±6.87107.1±4.08150.8±3.07127.4±2.98▲▲123.7±3.51135.4±3.53**133.9±5.05﹡134.4±3.59**140.6±3.21**132.5±4.74﹡128.9±3.14158.4±3.31140.0±3.97▲▲145.9±3.44﹡143.6±3.43146.1±4.16﹡143.7±3.69148.7±2.84**140.2±3.40142.8±2.41152.8±2.67152.1±3.27159.2±2.64155.7±3.36157.7±4.24151.3±3.22162.2±3.36148.5±4.11155.6±3.01与空白组相比：▲P0.05▲▲P0.01与相应模型组相比：﹡P0.05，**P0.01表4补气生血系列方失血性血虚小鼠HCT的影响（x±s，n=10，%）组别剂量(g生药/kg)造模前造模后第1d第4d第7d第10d空白模型黄芪当归太子参白芍灵芝白芍人参何首乌甘草何首乌西洋参阿胶扁豆阿胶-12g/kg12g/kg12g/kg12g/kg12g/kg12g/kg12g/kg57.53±1.3957.25±1.5358.34±1.3658.72±1.6659.82±1.8758.20±1.2359.95±1.5857.08±0.8156.16±1.1856.12±1.5439.55±0.72▲▲38.26±1.2541.70±1.5640.97±0.7740.93±1.1542.79±1.42﹡39.88±2.2639.52±1.3953.77±1.3148.18±1.10▲▲47.93±0.9651.80±0.99**49.87±1.5050.23±1.35﹡52.52±1.15**49.54±