兽医传染病第八章

第八章兔、犬、猫和貂的传染病第一节病毒性传染病一、概述本节介绍的兔、犬、猫等小动物的病毒性传染病共17种，涉及9个病毒科，即痘病毒(兔黏液瘤病)、腺病毒(犬病毒性肝炎)、疱疹病毒(犬疱疹病毒感染、猫传染性鼻气管炎)、反转录病毒(猫白血病和猫艾滋病)、呼肠孤病毒(猫呼肠孤病毒感染)、冠状病毒(犬冠状病毒感染和猫传染性腹膜炎)、杯状病毒(兔病毒性出血症、猫杯状病毒感染)、副黏病毒(犬瘟热、犬副黏病毒感染)、细小病毒(犬细小病毒感染、猫泛白细胞减少症、貂病毒性肠炎、貂阿留申病)。其中较重要的有兔黏液瘤病、兔病毒性出血症、犬瘟热、犬病毒性肝炎、犬细小病毒感染、貂病毒性肠炎、貂阿留申病。这些病大多发病率和病死率都较高，好在目前这些病大多都有疫苗可用。二、兔黏液瘤病兔黏液瘤病(rabbitmyxonlatosis)是由黏液瘤病毒引起兔的一种高度接触传染性疫病，其典型特征为全身皮肤，尤其是面部和天然孔周围皮肤发生黏液瘤样肿胀。因切开黏液瘤会流出黏液蛋白样渗出物而得名。本病有极高病死率，常给养兔业造成毁灭性损失。兔黏液瘤病是一种自然疫源性疾病，最早在1896年发现于乌拉圭，随后不久即传到巴西、阿根廷、哥伦比亚和巴拿马等国家，至今这些国家仍然有散发病例。此后，该病传人欧美多国，到目前为止已发生过本病的至少有56个国家和地区，其中以捷克和澳大利亚最为严重。【病原】黏液瘤病毒(Myxomavirus)是痘病毒科(Poxviridae)、兔痘病毒属(Leporipoxvirus)的成员。病毒粒子呈卵圆形或椭圆形，大小为230～280nm×75nm。病毒DNA约为160kb。负染检查，病毒粒子表面呈串珠状，由线状或管状不规则排列的物质和含有密集电子的中心体构成。本病毒只有一个血清型，但不同毒株的毒力和抗原性存在很大差异，弱毒株引起的死亡率低于30％，强毒株引起的死亡率高于90％，这种毒力的差异可能是病毒基因组大小不同造成的。强毒株如Larsanne株的DNA为163kb，并具有约10kh的末端重复序列(TIR)，而弱毒株尤其是疫苗株可缺失多于10kb的DNA。在已鉴定的毒株中，以南美毒株和美国加州毒株具有代表性。本病毒易在10～12日龄的鸡胚绒毛尿囊膜上生长繁殖，并形成痘斑。南美毒株产生的痘斑大，加州毒株产生的痘斑小，黏液瘤病毒不产生或产生的痘斑很小。病毒还可在鸡胚成纤维细胞、兔-肾细胞和睾丸细胞及人羊膜细胞上繁殖，产生典型的细胞病变，即形成胞质包涵体和合胞体。本病毒存在于病兔全身体液和脏器中，尤以眼垢和病变部皮肤渗出物中含量最高。病毒对理化因素的抵抗力较其他大多数痘病毒低。对热敏感，26~30℃时能存活10d，56℃经20min或50℃经1h以上即被灭活；对乙醚敏感；不耐pH4．6以下的酸性环境；能抵抗去氧胆酸盐和胰蛋白酶。在干燥的黏液瘤结节中可保持毒力3周之久；8～10℃可保持毒力达3个月以上；如置50％0甘油盐水中，则可长期保持其活力。对石炭酸、硼酸、升汞和高锰酸钾有较强的抵抗力，但用0．5％～2％福尔马林处理1h则很快死亡。【流行病学】本病只侵害家兔和野兔，其他动物不易感。家兔和欧洲野兔最为易感，可引起全身严重性、病死率很高的疾病，棉尾兔和田兔有抵抗力，北美野兔仅引起局部良性纤维瘤。据观察，1月龄以上幼兔较成年兔有抵抗力。病兔和带毒兔是传染源，与病兔或带毒兔的直接接触，或通过污染物的间接接触而发生传染。在自然界中主要是通过吸血昆虫机械传播，蚊子、兔蚤、刺蝇、蜱和螨等昆虫，或许还有秃鹰和乌鸦等鸟类可传播病毒。此外，可经呼吸道飞沫传播。本病呈季节性发生，每年8～10月．在蚊子大量滋生季节，是发病高峰季节．尤其是低洼潮湿地带发病最多。冬季蚤类是主要的传播媒介。黏液瘤病毒在兔、蚤体内能存活105d以上，在蚊体内可越冬。本病还有周期性趋向，每8～10年流行一次。【临床症状】潜伏期4～11d，平均约5d。由于毒株间毒力差异以及兔的不同品种、品系间对病毒的易感性不同，所以临床症状比较复杂。用南美强毒株感染时，3～4d即可看到最早的肿瘤，但要6～7d才出现全身性肿瘤。病兔发热、不愿活动，眼睑、鼻、唇和耳水肿，两眼充血、流泪，眼鼻分泌物先是乳白色呈黏性，以后发展为脓性，病兔呼吸困难、喷鼻，头部广泛性肿胀，呈“狮子头”状。肛门、母兔阴唇、公兔阴囊处显著水肿。随后身体多处皮下出血．出现肿块。初期硬而凸起．进而充血、破溃，流出淡黄色的浆液，病兔直到死前不久仍保持食欲。病程一般8～15d，死前出现惊厥。毒力较强的欧洲毒株感染时，病兔全身各部都可出现肿瘤，但耳部较少见到，10d后肿瘤破溃，流出浆液性液体。颜面明显水肿，头呈“狮子头”外观。眼鼻流出浆液性或脓性分泌物。病死率100％。加州毒株感染后6～7d，病兔眼睑、肛门、外生殖器及El鼻周围发生炎性水肿。9～10d时，皮肤出血，伴有坏死。病兔肿瘤症状不明显。病死率90％以上，死前也常有惊厥。毒力较弱的南美毒株或澳大利亚毒株感染时，病兔仅表现轻度水肿，有少量鼻液和眼垢及界限明显的结节，病死率低。自然致弱的欧洲毒株，所致疾病比较轻微，肿块扁平，病死率较低。近年来，该病常表现为呼吸型。潜伏期长达20~28d，经接触性传染，无媒介昆虫参与，一年四季都可发生。表现初期为卡他性继而脓性的鼻炎和结膜炎，皮肤损伤轻微，仅在耳部和外生殖器的皮肤上见有炎症斑点，少数病例的背部皮肤有散在性肿瘤结节。【病理变化】最显著的肉眼可见病理变化是皮肤肿瘤结节(加州毒株所致的黏液瘤外)、皮肤和皮下组织水肿，尤其是颜面和身体天然孔周围的皮下组织充血、水肿，皮下黄色胶冻状液体聚集。心内外膜和胃肠浆膜下可见淤血和出血点，内脏器官广泛出血，有时淋巴结和肺水肿或出血，脾肿大。皮肤肿瘤切片检查，可见许多大型的星状细胞(未分化的间质细胞)、上皮细胞肿胀和空泡化，同时有炎性细胞浸润。在上皮细胞胞质内有嗜酸性包涵体。包涵体内有蓝染的球菌样小颗粒，即原生小体。【诊断】根据本病的特征性临床症状和病理变化，结合流行病学资料可做出初步诊断。对新疫区或弱毒株所致的非典型病例或因兔群抵抗力较高，临床症状和病理变化不明显时，则诊断较为困难。确诊需进行以下实验室检查。1．组织病理学诊断采取病变组织，用10%中性甲醛溶液固定，石蜡包埋后切片，HE染色，显微镜检查。在黏液瘤细胞及病变部皮肤上皮细胞内可见有胞质内包涵体。2．病毒分离无菌采取病变组织，用磷酸盐缓冲液清洗，按1：5～1：10研磨制成匀浆，反复冻融3次或以超声波裂解细胞，释放出病毒粒子或病毒抗原，悬液经1500r/min离心10min，上清液接种兔肾原代细胞、鸡胚成纤维细胞或RKl3传代细胞单层，24～48h后出现典型的瘤病毒细胞病变(细胞融合形成合胞体，细胞核发生变化，细胞质包涵体)。感染细胞变圆、萎缩和核浓缩，细胞单层溶解脱壁。也可将病料接种11～13日龄鸡胚绒毛尿囊膜孵育4～6d，观察绒毛尿囊膜上病毒产生的灶性痘斑。或取新鲜病料磨碎后经皮下接种幼龄易感兔，2～5d内接种部位出现病损，并可用血清学方法检查存活的兔。3.琼脂扩散试验1%琼脂糖磷酸盐缓冲液高压溶解后制成琼脂板，打直径5mm的小孔，分别在小孔内加入标准阳性血清和接种细胞用的被检病料抗原。如在12～24h内出现2～3条沉淀线。表明有黏液瘤病毒抗原存在。此法准确率极高，适用于临床诊断和口岸检疫。4．血清学诊断在感染后8～13d兔体内可产生病毒抗体，抗体效价在20～60d时最高，在6～8个月后消失。可采用琼脂扩散试验、ELISA、dot—ELISA、间接荧光抗体技术、补体结合试验、血清中和试验等血清学方法进行检测。5．鉴别诊断主要应与兔纤维瘤病相区别，后者用琼脂扩散试验检查时仅出现1条沉淀线。将前述病料人工接种易感兔，产生高度致死性疾病的是黏液瘤病，兔纤维瘤病仅在局部发生纤维瘤。电镜检查有病变部位的渗出物或涂片，观察病毒特征性形态，可与痘病毒相区别。【防控】目前，我国尚无此病的发生，因此应严防传人。严禁从有本病的国家或地区进口兔及其产品。毗邻国家流行本病时，应封锁国境。引进兔种及兔产品时，应严格口岸检疫。新引进兔必须在防昆虫动物房内隔离饲养14d，检疫合格者方可混群饲养。做好兔场清洁卫生工作，采取杀灭吸血昆虫的措施，防止吸血昆虫叮咬。严防野兔进入饲养场。一旦发生本病，应立即采取扑杀措施，并进行彻底消毒。本病目前无特效的治疗方法，预防主要依靠疫苗接种。国外使用的疫苗有Shope纤维瘤病毒疫苗或加州I及法国生产的弱毒疫苗，3周龄以上的兔接种，4～7d产生免疫力，免疫保护期5年，免疫保护率90％以上。近年来推荐使用的MSD／S株和Mml6005株疫苗，均安全可靠，免疫效果更好。三、兔病毒性出血症兔病毒性出血症(rabbitheorrhagicdisease，RHD)又名兔出血性肺炎、兔出血症、兔瘟，是由兔出血症病毒引起的一种急性、败血性的高度接触性传染病。以呼吸系统出血，实质器官水肿、淤血、出血和肝脏坏死为特征。该病潜伏期短、发病急、病程短、传播快，发病率及病死率极高，对易感兔致病率可达90％，病死率可达lOO％。该病常呈暴发性流行,是兔的一种毁灭性传染病，可给养兔业造成极大经济损失，已成为危害养兔业最严重的一种疾病。本病于1984年初首先在我国江苏无锡等地暴发，随即蔓延到全国多数地区。此后，世界上许多国家和地区也报道了本病，迄今朝鲜、韩国、意大利、法国、德国、捷克、美国及新西兰等国家均有本病的流行。欧洲对兔病毒性出血症的病毒学和血清学回顾性调查发现1982年保存的病料中含有RHDV相关的病毒，且早于中国首次发生12～13年之前的兔血清样品RHD抗体也呈阳性，表明该病在欧洲的兔群中已经存在了多年，因此该病实际上起源于欧洲。【病原】兔出血症病毒(Rabbithemorrhagicdiseasevirus，RHDV)属于嵌杯病毒科(Caliciviridae)、兔病毒属(Lagovirus)。病毒粒子呈球形，直径32～36nm，为二十面体对称结构，无囊膜，表面有短的纤突。RHDV基因组为单股正链RNA，全长7437个核苷酸。基因组含有两个开放阅读框架(ORF)，3’端的ORF编码VPl0，含量较低。功能尚不明确。5’末端的ORF编码一个2344氨基酸的多聚蛋白前体，该前体被病毒蛋白酶进一步分解为衣壳蛋白和非结构蛋白，其中衣壳蛋白VP60为RHDV唯一的结构蛋白。与诱导抗病毒感染的免疫反应直接相关。除基因组RNA外，在病毒颗粒和感染的组织中，还含有2．4kb的亚基因组RNA，也编码衣壳蛋白VP60。从不同地区分离出的RHDV的基因组序列大致相同，说明病毒未发生大的变异。本病毒对绵羊、鸡、鹅和人O型红细胞有凝集作用。本病毒不能适应细胞培养或鸡胚培养。曾试用乳兔肝、肺、睾丸、肾等原代细胞和肾传代细胞，IBRS一2、PK一15、MAl04、Vero、Hela等传代细胞系及兔肺二倍体细胞株进行增殖，但均未获得适应，不能稳定传代。但可以在乳鼠体内生长繁殖，引起规律性发病和死亡．因此可以利用乳鼠进行种毒保存。病毒在病兔肝组织中滴度最高，其次是脾、肾、肺等组织。本病毒对乙醚、氯仿等有抵抗力，能耐pH3和50℃40min处理；感染家兔的血液在4℃经9个月，感染的脏器在20℃经3个月仍保持活性，含毒的肝脏一20℃经560d或室外污染环境经135d仍保持有致病性。对紫外线、日光、热敏感。常用消毒剂需作用足够的时间，如1％氢氧化钠需4h．1％～2％的甲醛、l％漂白粉需3h，2％农乐需1h才能杀灭病毒。【流行病学】本病仅发生于兔，长毛兔尤为敏感，年龄上差异很大．主要发生于3月龄以上的青年兔或成年兔．2月龄以下仔兔，尤其吮乳兔多具有抵抗力，极少发病或不发病。病兔与带毒兔为传染源，其分泌物、排泄物均可带毒，可通过直接接触或间接接触方式传播。皮下注射、肌肉注射、静脉注射、滴鼻和口服等途径人工感染均可引起发病，一般认为该病主要经消化道、呼吸道、皮肤等途径感染；蚊、蝇也可起到机械性传播的作用，但尚无由昆虫、啮齿动物或经胎盘垂直传播的证据。在人工接种牛和猪方面．未检出抗体；在牛、羊、豚鼠、犬、猫、鸭、鸽、