分子生物学复习试题

1．下列不是真核生物的染色体组蛋白所具有的特征（）A．进化上的极端保守性。B．有组织特异性。C．肽链上氨基酸分布有不对称性。D．共有5种组蛋白2．下列DNA复制所需的条件不正确的是（）A．需DNA模板B．需DNA聚合酶C．需RNA引物D．不需要解旋酶3．下列是原核生物mRNA的特征（）A．5′端有帽子结构，B．以单顺反子形式存在C．5端具有SD序列D．3′端有较短的poly(A)结构4．原核生物的启动子-10区是一个保守序列区，该序列又被称为pribnow框，此保守序列的共有序列为：（）A．TATAATB．GCGCCGC．GTGTTGD．ATATTA5．启动子是DNA链上一段能被RNA聚合酶识别并结合形成转录起始复合物的区域，包括一些调解蛋白因子的结合序列，对于真核生物启动子，位于转录起点下游启动子是（）A．RNA聚合酶Ⅰ的启动子B．RNA聚合酶Ⅱ的启动子C．RNA聚合酶III的启动子D．以上均不正确6．羧基末端结构域(CTD)是具有7个氨基酸(Tyr-Ser-Pro-Thr-Ser-Pro-Ser)的重复序列，CTD磷酸化对调控基因转录有重要作用，该结构域存在于（）A．RNA聚合酶ⅠB．RNA聚合酶ⅡC．RNA聚合酶IIID．以上均不正确7．下列不是遗传密码表中的终止密码子是：（）A．UAAB．UAGC．UGAD．UGG8．关于核糖体的移位，叙述正确的是（）A．空载tRNA的脱落发生在“A”位上B．核糖体沿mRNA的3’→5’方向相对移动C．核糖体沿mRNA的5’→3’方向相对移动D．核糖体在mRNA上一次移动的距离相当于二个核苷酸的长度9．原核生物Shine-Dalgarno序列(SD-序列)是指（）A．在mRNA分子的起始码上游8-13个核苷酸处的顺序B．在DNA分子上转录起始点前8-13个核苷酸处的顺序C．16srRNA3'端富含嘧啶的互补顺序D．启动基因的顺序特征10．摇摆性是指反密码子与密码子中那对碱基的互补配对（）A．第一个反密码子与第三个密码子B．第三个反密码子与第一个密码子C．第一个反密码子与第二个密码子D．第三个反密码子与第二个密码子11．下列不是RNA聚合酶的核心酶由的亚基是（）A．αB．σC．βD．β’12．下列哪种突变最可能是致命的（）A．腺嘌呤取代胞嘧啶B．胞嘧啶取代尿嘧啶C．缺失三个核苷酸D．插入二个核苷酸13．紫外线照射对DNA分子的损伤主要是（）A．碱基替换B．磷酸酯键断裂C．碱基丢失D．形成共价连接的嘧啶二聚体14．能编码多肽链的最小DNA单位是（）A．顺反子B．操纵子C．启动子D．复制子15．指导合成蛋白质的结构基因大多数是（）A．单考贝顺序B．中度重复顺序C．高度重复顺序D．回文顺序1．分子生物学的研究内容主要包含____.核酸的分子生物学______、____蛋白质的分子生物学_____和____细胞信号转导的分子生物学____三部分。2．在DNA中一段特殊的碱基序列，对基因的表达起到调控作用的基因元件被称为___顺式作用元件______;而与该元件相结合的蛋白被称为____调控蛋白____。3．在蛋白质合成过程中N端有15-36个氨基酸残基引导蛋白质的跨膜的肽段被称为____信号肽_____。4．真核生物RNA聚合酶共三种_______、_______、_______，它们分别催化___r____、__hn_____和__t_____的生物合成。5．某DNA双螺旋中，单链5’…ATCGCTCGA…3’为有意义链，若转录mRNA，其中碱其排列顺序为5’…_AUCGCUCGA______…3’因为已知序列为有义链，而有义链的序列与转录所得mRNA一致（即所给序列的互补链才是转录的模板），所以转录RNA为：5’…AUCGCUCGA…3’6．原核细胞的起始氨基酸是___甲酰甲硫氨酸____，起始氨酰-tRNA是_____甲酰甲硫氨酰-tRNA_______7．延长因子T由Tu和Ts两个亚基组成，Tu为对热___不稳定________蛋白质，Ts为对热_____稳定___蛋白质。8．质粒的复制类型有两种：受到宿主细胞蛋白质合成的严格控制的称为____严紧型质粒____，不受宿主细胞蛋白质合成的严格控制称为___松弛型质粒_____。9．质粒DNA具有三种不同的构型分别是：SC构型、oc构型、L构型。在电泳中最前面的是____SC构型____.。1．内含子与外显子内含子:隔断基因的线性表达而在剪接过程中被除去的核酸序列外显子:在断裂基因及其初级转录产物上出现，并表达为成熟RNA的核酸序列2．不对称转录不对称转录:在RNA生物合成中,DNA只有一条链的一段作为模板指导RNA的合成称为不对称转录3．正调控与负调控正调控是通过激活蛋白与启动子上游序列结合，以促进RNA聚合酶与启动子结合，提高转录的效率。负调控是阻遏蛋白与操纵基因结合使RNA聚合酶不能与启动子结合，因而抑制转录4．RNA干扰是指在进化过程中高度保守的、由双链RNA诱发的、同源mRNA高效特异性降解的现象5．翻译转运同步机制6.引物1．pUC19质粒载体是基因工程中常常用到的一个载体，该载体在构建时采用α-互补的方法，这样可以通过蓝白筛选即可判断目的基因是否进入宿主体内，请简要说明α-互补与蓝白筛选？LacZ′基因编码的α肽链与失去了正常氨基端的β半乳糖苷酶突变体互补，这种现象称为α互补。由α互补而形成的有功能活性的β半乳糖苷酶，可以用X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)显色出来，它能将无色的化合物X-gal切割成半乳糖和深蓝色的底物5-溴-4-靛蓝。因此，任何携带着lacZ′基因的质粒载体转化了染色体基因组存在着此种β半乳糖苷酶突变的大肠杆菌细胞后，便会产生出有功能活性的β半乳糖苷酶，在IPTG(异丙基硫代β-D-半乳糖苷)诱导后，在含有X-gal的培养基平板上形成蓝色菌落。而当有外源DNA片段插入到位于lacZ′中的多克隆位点后，就会破坏α肽链的阅读框，从而不能合成与受体菌内突变的β半乳糖苷酶相互补的活性α肽，而导致不能形成有功能活性的β半乳糖苷酶，因此含有重组质粒载体的克隆往往是白色菌落。2．蛋白质是体现出生物的性状，简要说明原核细胞的蛋白质合成过程？3．原核生物对噬菌体侵染具有免疫性，是因为该宿主具有限制和修饰的能力，情解释限制和修饰现象？修饰(modification)：指寄主本身的DNA，由于在合成后通过甲基化酶的作用得以甲基化，使DNA得以修饰，从而免遭自身限制性酶的破坏。修饰作用：宿主细胞通过甲基化作用达到识别自身遗传物质和外来遗传物质的目的。限制(restriction)：指一定类型的细菌可以通过限制酶的作用，破坏入侵的噬菌体DNA，导致噬菌体的寄主幅度受到限制。限制作用:实际就是限制性内切酶降解外源DNA，维护宿主遗传稳定的保护机制。1．操纵子可视为原核生物的转录单位，它可以逐个地从原核生物基因组中分离出来，对其结构功能加以研究。目前分子生物学家对乳糖操纵子和色氨酸操纵子进行升入的研究，并阐明了其作用机制:a:试解释大肠杆菌的二次生长现象与乳糖操纵子之间的关系；将两种代谢底物投与微生物进行培养时，如果有一种底物的代谢所需酶系统必须经过诱导才能形成，则该种微生物的生长过程分为两个阶段，这种现象称二次生长现象调节乳糖催化酶产生的操纵子就称为乳糖操纵子。其调控机制简述如下：抑制作用：调节基因转录出mRNA，合成阻遏蛋白，因缺少乳糖，阻遏蛋白因其构象能够识别操纵基因并结合到操纵基因上，因此RNA聚合酶就不能与启动基因结合，结构基因也被抑制，结果结构基因不能转录出mRNA，不能翻译酶蛋白。诱导作用：乳糖的存在情况下，乳糖代谢产生别乳糖（alloLactose），别乳糖能和调节基因产生的阻遏蛋白结合，使阻遏蛋白改变构象，不能在和操纵基因结合，失去阻遏作用，结果RNA聚合酶便与启动基因结合，并使结构基因活化，转录出mRNA，翻译出酶蛋白。负反馈：细胞质中有了β—半乳糖苷酶后，便催化分解乳糖为半乳糖和葡萄糖。乳糖被分解后，又造成了阻遏蛋白与操纵基因结合，使结构基因关闭。b:试分析色氨酸操纵子的阻遏系统和弱化系统阻遏系统：是色氨酸生物合成途径的第一调控，主管转录是否启动。当色氨酸过量时，它与阻遏蛋白形成复合物，并结合到操纵基因上阻止结构基因转录，即以终产物组织基因转录。弱化系统：第二水平控制，它决定着已经启动的转录是否能继续进行下去。当mRNA合成起始以后，除非培养基中完全没有色氨酸，否则转录总是在前导区内终止。转录终止发生的区域称为弱化子或衰减子。前导区可分为四个区域，这四个区域的片段以两种不同的方式进行碱基配对，由核糖体经过前导区继续翻译的功能控制着这两种结构的转换，它决定mRNA是否形成终止所需的结构，从而产生弱化效应2．PCR又称为无细胞分子克隆法或特异性DNA序列体外引物定向酶促扩增法，是基因扩增技术的重大革新，可将极微量的靶DNA特异地扩增上百万倍，因而在分子生物学中有着广泛的用途。PCR技术可用来分离特异性的基因，请解释差异显示逆转录聚合酶链式反DDRT-PCR传统mRNA差异显示技术（DDRT-PCR）是根据绝大多数真核细胞mRNA3'端具有的多聚腺苷酸尾（polyA）结构，因此可用含oligo（dT）的寡聚核苷酸为引物将不同的mRNA反转录成cDNA。将差别表达条带中的DNA回收，扩增至所需含量，进行Southernblot或Northernblot或直接测序，从而对差异条带鉴定分析，以便最终获得差异表达的目的基因