分解纤维素的微生物的分离

1分解纤维素的微生物的分离【导学诱思】1．纤维素是类物质，是自然界中纤维素含量最高的天然产物，此外，木材、作物秸秆等也富含纤维素。2．纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即、和，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成。正是在这三种酶的协同作用下，纤维素最终被水解成葡萄糖，为微生物的生长提供营养，同样，也可以为人类所利用。3．在做纤维素酶分解纤维素的实验过程中，如果没有摇床，可以采用何种方法代替？4．筛选纤维素分解菌可以用法，这种方法能够通过直接对微生物进行筛选。在土壤中取样的方法有：①；②。5．刚果红是一种，它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。6．分离分解纤维素的微生物的实验流程图如下：→→梯度稀释→→。【课后练习】1．下面是弗来明对青霉素的早期研究过程：发现问题：在培养细菌的器具中发现一种青霉菌，在这种青霉菌的周围有没有其它细菌生存?为什么会产生这种现象?提出假设：设计实验：在液体中培养青霉菌后，考察这种液体对细菌增殖的影响。实验结果：培养液使细菌的增殖停止。结论：下面几项最适合作为该实验假设的是A．青霉菌与细菌之间是共生关系B．青霉菌污染了细菌生存的环境C．青霉菌产生了对人体有益的物质D．青霉菌能产生抑制细菌增殖的物质2．培养流感病毒时，应选用A．固体培养基B．含有多种无机盐的培养液C．活的鸡胚D．无菌的牛肉汤4．可以使微生物细胞内蛋白质、核酸发生不可逆破坏的环境因素是A．高温B.营养成分的变化C.氧含量D.温度、pH、氧的共同作用5．微生物（除病毒外）需要从外界吸收营养物质并通过代谢来维持正常的生长和繁殖。下列有关微生物营养的说法正确的是2A．乳酸菌与硝化细菌所利用的碳源物质是相同的B．微生物生长中不可缺少的一些微量的无机物称为生长因子C．培养基中的营养物质浓度越高对微生物的增殖越有利D．生长因子一般是酶或核酸的组成成分，微生物本身合成这些生长因子的能力往往不足7．菌落形成的根本原因是A．细菌有鞭毛B．细菌能运动C．培养基有琼脂D．子细胞成为群体8．在接种操作的过程中，不正确的是A．要将接种环灼烧灭菌B．取下棉塞后要将试管口灼烧灭菌C．将接种环伸入试管内，先接触长菌多的部位D．接种后还要将管口灭菌加塞9．高压蒸气灭菌的原理是A．高压使细菌DNA变性B．高压使细菌蛋白质凝固变性C．高温烫死细菌D．高温使细菌DNA变性10．某种细菌每30分钟分裂一次，开始接种时为3个细胞，在对数生长期培养5个小时后，问此时有多少细胞？A．15B．48C．1024D．307211．（10分）某同学在做微生物实验时，不小心把圆褐固氮菌和酵菌混在一起。该同学设计下面的实验，分离得纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌。(1)实验原理：圆褐固氮菌是自生固氮菌，能在无氮培养条件下生长繁殖而酵母菌则不能；青霉素不影响酵母菌的生长繁殖，而会抑制圆褐固氮菌的生长繁殖。(2)材料用具：（略）(3)主要步骤：①制备两种培养基，一种是培养基，另一种是培养基，将两种培养基各自分成两份，依次标上A、a和B、b。②分别向A、B培养基中接种混合菌，适宜条件培养了3—4天。③分别从A、B培养基的菌落中挑取生长良好的菌并分别接种到a、b培养基中，适宜条件下培养3—4天。(4)请同答：①将题中的空处填充完整：培养基和培养基。②本实验中，根据上述原理配制的培养基的类型属于培养基。③根据所需目的配制上述培养基时除营养要协调外还应注意。④实验步骤中第③步的目的是。⑤圆褐固氮菌与酵母菌在结构上的主要差异为。⑥青霉素抑制圆褐固氮菌的生长繁殖，其作用机理是破坏或抑制其细胞壁的形成。请据此推测不影响酵母菌等真菌生长繁殖的原因是。312．(7分)为了研究细菌对青霉素抗药性形成的机理，有人设计了如下实验方案：步骤1取培养皿A若干(A1、A2、A3……)，加人普通细菌培养基；取培养皿B若干(B1、B2、B3……)，加入含青霉素的细菌培养基。步骤2将适量细菌培养液涂抹在培养皿A1的培养基表面，放在适宜的条件下培养一段时间，培养基的表面会出现一些细菌菌落。步骤3用灭菌后的丝绒包上棉花制成的一枚“印章”，在A1上轻轻盖一下，再在B1上轻轻盖一下，这样A1中的细胞就按一定的位置准确的“复制”到了B1之中。将B1培养一段时间后，B1中一定部位出现了少量菌落。步骤4根据B1中菌落出现的方位，将A1中对应位置的菌落取出，均匀涂抹在A2表面，培养一段时间后，培养基表面又会出现许多菌落。反复重复步骤3、4，在B2、B3……中保留下来的菌落越来越多。直到最后，所有“复制”到B中的菌落全都保留下来，都具有对青霉素的抗药性。(1)普通培养基中的营养要素物质有。根据培养基的用途，加人青霉素的培养基属于。实验过程中为了缩短时间，最好在细菌生长的哪一个时期接种?(2)细菌抗药性的产生是细胞出现的结果。根据现代进化理论，青霉素在细菌抗药性形成过程中起的作用。实验中所用的细菌的代谢类型属于。(3)如果B1中没有菌落保留下来，实验就无法进行下去。若要使实验进行下去，可以采用的方法有。13．（9分）根据实验原理和材料用具，设计实验确定细菌质粒的抗菌素基因所抗的抗菌素的类别。实验原理：作为运载体的质粒，需有标记基因，这一标记基因是抗菌素抗性基因。有抗性基因的质粒可用做运载体。材料用具：青霉素、四环素各10万单位溶液、菌种试管、灭菌的含细菌培养基的培养皿、酒精灯、接种环、一次性注射器、无菌水、恒温箱方法步骤：第一步第二步第三步预期：4《分解纤维素的微生物的分离》参考答案1—4DCAD5—8DCBD9．(4)①无氮含青霉素的②选择③pH要适宜④分离得到纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌⑤圆褐固氮菌无成形的细胞核⑥圆褐固氮菌为原核生物，其细胞壁主要为糖类和蛋白质，而酵母菌则不同10．(1)碳源、氮源、生长因子、无机盐和水选择培养基对数期(2)基因突变选择异养需氧型(3)用适量紫外线照射一段时间(其它引起基因突变的方法也行)11．第一步：取3个含培养基的培养皿，分别编为1、2、3号，用三只注射器分别向3个培养基中注入1毫升无菌水、青霉素液、四环素液，并使之均匀分布在整个培养基表面。第二步：将接种环在酒精灯上灼烧，并在酒精灯旁取菌种接种于3个培养基第三步：将接种后的培养基放在37℃的恒温箱中培养24小时。预期：1号培养皿中的细菌正常生长。2、3号培养皿的细菌能正常生长的说明有抗性基因：若仅在2号存活的说明有青霉素抗性基因；若仅在3号存活的说明有四环素抗性基因；若在2、3号中都能存活的，说明该质粒上有两种抗性基因。