免疫答案_20141122175645

1选择：ELISA竞争法(酶：辣根过氧化物酶，碱性磷酸酶、β-半乳糖苷酶)对流免疫电泳抗原修复方法时间荧光免疫测定荧光物质：(镧系稀土元素)免疫器官主要组成部分是淋巴组织。中枢免疫器官包括胸腺和骨髓。外周免疫器官包括淋巴结、脾和粘膜相关淋巴组织肥达反应利用伤寒和副伤寒沙门菌菌液为抗原，检测病人血清中有无相应抗体的一种凝集试验。T细胞表面标志包括TCR-CD3复合物、CD4和CD8分子、协同刺激分子受体、丝裂原受体及细胞因子的受体等补体总活性测定方法是以红细胞的溶解为指示，以50%溶血为判断终点，称为CH50CH50增高见于：急性炎症、组织损伤、恶性肿瘤等CH50降低见于：系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎和强直性脊柱炎、急性肾小球肾炎等Ⅱ型超敏反应输血反应、新生儿溶血症、自身免疫性溶血性贫血、甲状腺功能亢进、重症肌无力、药物过敏性血细胞减少症、肺出血肾炎综合征（Goodpasture综合征）原发性T细胞免疫缺陷病是由于T细胞的遗传性缺陷，最常见的DiGeorge综合征（先天胸腺发育不良）。可作为SLE特异性标志的自身抗体是：抗Sm抗体抗dsDNAPercoll分离液法纯化淋巴和单核（连续密度梯度离心）Ficoll分离液法主要用于分离外周血中的单个核细胞，是一种单次差速密度梯度离心的分离法。Ficoll液单次密度梯度离心后外周血细胞分布由上至下依次为：血小板和血浆、单个核细胞、粒细胞、红细胞填空：沉淀反应中抗体过量的现象称为前带三条补体激活途径：经典旁路MBL（甘露聚糖结合凝集素途径）流式基本结构：液流系统光学系统数据处理系统免疫学三大经典技术：放免酶免发光免疫技术HIV的外膜成分（gp120）和（gp41）与其入侵宿主细胞有关。名解：交叉反应：抗体与具有相同或相似表位的抗原之间出现的反应。免疫球蛋白：具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白。抗球蛋白试验，又称Coombs试验，是检测抗红细胞不完全抗体的一种方法。冷球蛋白：血清中的一种病理性蛋白质.在低温（0-4℃）下发生沉淀，加温（37℃）后又复溶的免疫球蛋白.在低温时产生冷沉淀的机制尚不十分明确.多数冷球蛋白为免疫复合物，其抗原可以是外源性的，也可以是内源性的巨球蛋白血症是以分泌IgM的浆细胞恶性增殖为病理基础的疾病。好发于老年男性。主要表现骨髓外浸润，以淋巴结、肝和脾肿大等为主要体征并伴有血粘滞过高固相膜免疫分析技术：微孔膜作为固相载体，酶标记或各种有色粒子标记，通过抗原抗体反应检测抗原或抗体的快速检验方法，胶体金免疫技术、斑点酶免疫吸附试验、免疫印记实验。单克隆抗体：是由单一克隆抗体B细胞杂交瘤细胞产生的只识别一种抗原表位的具有高度特异性的抗体。（最有效：亲和层析法）2多克隆抗体：由多个B淋巴细胞克隆所产生的，受到多种抗原决定簇刺激并可与多种抗原表位结合的抗体。本周氏蛋白又称本-周蛋白，是免疫球蛋白的轻链单体或二聚体，属于不完全抗体球蛋白。常出现于骨髓瘤患者尿中，有诊断意义。问答：1.免疫应答基本过程？免疫应答是一个复杂连续的=过程，分为识别阶段，活化阶段和效应阶段。（1）识别阶段是巨噬细胞等抗原提呈细胞对外来抗原或自身变性抗原进行识别，摄取，降解和提呈抗原信息给T辅助细胞及相关淋巴细胞的阶段。（2）效应阶段是TB淋巴细胞在接受抗原信号后，在一系列免疫分子的参与下，发生活化增值分化的阶段。B细胞接受抗原刺激后活化，增殖，分化为浆细胞，T细胞在接受抗原刺激和协同刺激双信号后活化，增值，分化为效应细胞。（3）效应阶段包括浆细胞分泌特异性抗体，执行体液免疫功能；T细胞中的Th细胞分泌细胞因子等效应分子，T杀伤细胞执行细胞毒效应功能。另有少量T细胞和B细胞在增值分化后，不直接执行效应功能，而作为记忆细胞。当其再次遇到相同的抗原时，迅速活化增值分化为效应细胞，执行高效而持久的特异性免疫效应功能。3.ELISA基本原理？ELISA的基本原理是：①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性。②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或酶标抗体，这种酶标抗原或酶标抗体既保留其免疫活性，又保留酶的活性。在测定时，令受检标本（测定其中的抗原或抗体）和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的杭原抗体复合物与其他物质分开，最后结合在固相载体上的酶量与标木中受检物质的量成一定的比例。加人酶反应的底物后，底物被酶催化形成有色产物，产物的量与标木中受检物质的量直接相关，故可根据颜色反应的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，故可极大地放大反应效果，从而使测定方法达到很高的敏感度。4.T/B细胞检测方法及原理？根据T细胞的免疫效应功能和表面CD分子表达至少可以分为：CD3+CD4+CD8-辅助性T细胞、CD3+CD4-CD8+细胞毒性T细胞和CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞；SmIg、Fc受体、补体受体、EB病毒受体，小鼠红细胞受体是B细胞的重要表面标志，SmIg为B细胞所特有，是鉴定B细胞可靠的指标，以CD5和CD19为标志可将B细胞分为B1和B2两个亚群；目前多以CD3-、CD16+、CD56+作为NK细胞的典型标志。具体免疫细胞功能检测内容包括：①淋巴细胞功能检测，包括T细胞增殖试验、T细胞分泌功能测定、T细胞介导的细胞毒试验以及体内试验；B细胞增殖试验、溶血空斑试验、酶联免疫斑点法以及体内试验；NK细胞活性检测方法：酶释放法、放射性核素释放法、化学发光法、流式细胞术法等。②吞噬细胞功能检测，方法有趋化功能检测、吞噬和杀菌功能测定等。5.自身免疫系统疾病的共同特征？1.多数病因不明2.患者以女性居多，并随年龄增加发病率有所增加33.有遗传倾向4.患者血清中有多种自身抗体或自身反应性致敏淋巴细胞存在5.疾病有重叠现象，即一个病人可同时患一种以上自身免疫病6.病程一般较长，多迁延为慢性7.病损局部可发现淋巴细胞、浆细胞、中性粒细胞等浸润8.免疫抑制剂治疗可取得一定疗效6.杂交瘤技术原理？杂交瘤抗体技术的基本原理是通过融合两种细胞而同时保持两者的主要特征。这两种细胞分别是经抗原免疫的小鼠细胞作小鼠骨髓瘤细胞。脾淋巴细胞的主要特征是它的抗体分泌功能和能够在选择培养基中生长（次黄嘌呤，氨基蝶呤和胸腺嘧啶核苷选择性培养基），小鼠骨髓瘤细胞则可在培养条件下无限分裂、增殖，即所谓永生性。在选择培养基的作用下，只有B细胞与骨髓瘤细胞融合的杂交才具有持续增殖的能力，形成同时具备抗体分泌功能和保持细胞永生性两种特征的细胞克隆。（一）细胞的选择与融合（二）选择培养基的应用（三）有限稀释与抗原特异性选择7.举例两种免疫缺陷病及临床诊断、肿瘤免放概念。Digeorge综合症(先天性胸腺发育不良)T细胞缺陷性疾病占先天性免疫缺陷病的5%～10%。主要因先天性胸腺发育不全致使T细胞数目减少，也可因某些酶或膜糖蛋白等分子缺乏而导致T细胞功能障碍。(2)非特特异性免疫缺陷1吞噬细胞缺陷病吞噬细胞包括组织中的吞噬细胞、单核细胞和血液中的中性粒细胞。先天性的吞噬细胞缺陷病主要指吞噬细胞的功能障碍引起的疾病，其相对发病率为1%～2%，最多见的为慢性肉芽肿病。肿瘤免疫（tumorImmunology）是研究肿瘤的抗原性、机体的免疫功能与肿瘤发生、发展的相互关系，机体对肿瘤的免疫应答及其抗肿瘤免疫的机制、肿瘤的免疫诊断和免疫防治的科学。2.免疫放射和放射免疫分析区别？RIAIRMA标记物抗原抗体抗体用量限量过量原理竞争性结合非竞争性结合反应体系Ag*、Ag、Ab固相Ab、Ab*、Ag反应动力学慢快灵敏度相对低高检测范围窄宽1-2数量级特异性差（PcAb）优（McAb）标准曲线结合率和测量值成反比结合率和测量值成正比应用范围常用于小分子半抗原常用于大分子蛋白质或多肽4机体的抗肿瘤免役效应机制和肿瘤的免疫逃逸机制对肿瘤细胞的杀伤作用，这种具有促进肿瘤生长作用的抗体被称为增强抗体2．肿瘤的免疫逃逸机制：一、与肿瘤细胞有关的因素：⒈肿瘤细胞的抗原缺失和抗原调变；⒉肿瘤细胞的“漏逸”，机体无法有效清除大量生长的肿瘤细胞；⒊肿瘤细胞MHC-Ⅰ类分子表达低下，无法提呈瘤细胞内抗原，激活CTL细胞；⒋肿瘤细胞分泌TGF-β、IL-10等抑制因子抑制免疫应答的产生；⒌肿瘤细胞缺乏B-7等协同刺激分子无法提供第二活化信号。二、与宿主免疫系统有关的因素：宿主处于免疫功能低下的状态或免疫耐受；宿主抗原提呈细胞功能低下或缺陷；宿主体内存在一定量的“增强抗体”或免疫抑制因子。这些都有助于肿瘤逃避宿主免疫系统的攻击简述机体抗肿瘤的免疫学效应机制。答：机体抗肿瘤免疫学效应机制包括非肿瘤特异性免疫和肿瘤特异性免疫。肿瘤特异性免疫又包括抗肿瘤的细胞免疫和抗肿瘤的体液免疫。细胞免疫在抗肿瘤效应中发挥最主要的作用，参与抗肿瘤免疫的细胞包括T细胞、NK细胞、巨噬细胞和树突状细胞等；体液免疫主要包括补体的溶细胞效应、ADCC、抗体的免疫调理作用、抗体封闭肿瘤细胞表面某些受体、抗体干扰肿瘤细胞黏附作用等。自身免疫性疾病的致病因素自身抗原的出现：包括隐蔽抗原的释放，自身抗原发生改变，分子模拟和决定基扩展。免疫调节异常：包括多克隆刺激剂的旁路活化，辅助刺激因子表达异常及Th1和Th2细胞功能失衡。Fas/FasL表达异常遗传因素克隆化方法包括有限稀释法、显微操作法、荧光激活细胞分选仪和软琼脂平板法。ELISA检测抗原方法：双抗体夹心法、双位点一步法、竞争法。抗体：间接法、双抗原夹心法，竞争法捕获法细胞因子作用方式：旁分泌、自分泌、内分泌。共同特性：多效、重叠、拮抗、协同