低聚壳聚糖对断奶仔猪生产性能血清指标及粪便微生物的影响

-1-低聚壳聚糖对断奶仔猪生产性能、血清指标及粪便微生物的影响——试验研究报告1试验材料与方法1.1试验设计试验采用随机区组设计，选择同一品种、体重相近的断奶仔猪（约10kg）50头，随机分为5组，每组2个重复，每个重复约5头仔猪。各组的日粮处理为：第1组为对照组（基础日粮）；第2-4组为低聚壳聚糖试验组，在基础日粮上分别添加25mg/kg、50mg/kg和100mg/kg低聚壳聚糖；第5组为合生素组，在基础日粮中添加500mg/kg合生素。试验为期28天。试验料采用玉米–豆粕型基础日粮，在25%浓缩料的基础上按猪场配方配制，料型为粉料；浓缩料由普乐维美提供，含有的抗生素为喹乙醇。1.2饲养管理试验前对猪舍进行全面的清洗、消毒，采用水泥地板平养。各组均固定饲喂次数，每日定时饲喂饲料，不限制采食量，自由饮水，并进行常规免疫，其他日常管理按常规进行。试验期间由专人饲养管理试验猪群。每天记录每栏的采食量，观察腹泻头数，记录猪只体况、疾病发生情况及治疗措施等。1.3样品采集在试验结束时，每组抽取试验仔猪4头，前腔静脉采集血样约4-5ml，使用离心机分离血清（3500rpm，10min），分装入冻存管中于-20℃保存待用；每组取4头健康仔猪的新鲜粪样少许（直接在肛门采集），用灭菌离心管封装，置于冰盒，送实验室进行微生物计数。1.4测定指标1.4.1生产性能试验猪分别于试验开始和试验结束时空腹称重，统计各重复耗料量。计算猪的平均初重、平均末重、平均日增重、平均采食量、料重比等生产性能指标。1.4.2血清指标（生化指标、抗氧化指标、免疫球蛋白及相关激素）测定血清甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、谷丙转氨酶(GOT)、碱性磷酸酶(ALP)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、尿素氮(BUN)等生化指标。测定血清过氧化氢酶（CAT）、丙二醛（MDA）含量及总抗氧化能力（T-AOC）等抗氧化指标。测定血清免疫球蛋白IgG及四碘甲状腺原氨酸（甲状腺素，T4）、三碘甲状腺原氨酸（T3）和生长激素（GH）含量。1.4.3粪便微生物指标-2-无菌采集少许新鲜粪便（轻微刺激仔猪肛门，使其排泄新鲜粪便）置于灭菌离心管，低温运输带回实验室后，取0.3g左右置于5mL的灭菌离心管中，加入灭菌生理盐水2mL，用漩涡混匀仪将稀释液混匀，吸取上清液100μL于盛有900μL无菌生理盐水的离心管中依次进行10倍稀释，食糜中大肠杆菌、乳酸杆菌数量级不同，按具体情况进行稀释。大肠杆菌37℃有氧培养24h后进行菌落计数；乳酸杆菌37℃厌氧培养48h后进行菌落计数，以每克肠道内容物中细菌个数的对数（lgCFU）/g表示。计算公式为lgCFU=X×10a×10×（2/m+1)/m。X为平板菌落数，a为平板稀释倍数，M为取样质量。大肠杆菌平板使用麦康凯琼脂培养基，其配制方法为：麦康凯琼脂58.5g，加蒸馏水1000mL，115℃15min高压灭菌。乳酸杆菌平板使用MRS琼脂培养基，其配制方法为：蛋白胨10g，酵母提取物5g，牛肉浸膏8g，葡萄糖20g，KHPO42g,MgSO4.7H2O0.5g，MnSO4.4H2O0.2g，柠檬酸二胺2g，乙酸钠5g，吐温801ml，琼脂20g，水1000ml，调pH值至5.5-6.2，121℃高压灭菌15min。1.5试验数据处理试验数据用Excel2003初步处理后，采用SPSS16.0软件进行统计，用单因素方差分析（One-wayANOVA，Duncan）进行差异显著性检验和多重比较，结果以“平均数±标准误”表示（生产性能除外）。2结果与分析2.1低聚壳聚糖对断奶仔猪生产性能的影响由表1可知，与对照组相比，各试验组仔猪的平均末重和平均日增重均有不同提高，添加50mg/kg低聚壳聚糖使料重比下降了14.21%。表1低聚壳聚糖对断奶仔猪生产性能的影响试验分组平均初重kg平均末重kg平均日增重g平均采食量g料重比对照组10.0821.36402.86738.571.8325mg/kg组9.5221.78437.86823.571.8850mg/kg组10.6424.90509.29798.571.57100mg/kg组9.3421.88447.86825.711.84合生素组10.0423.24471.43805.001.71附：本试验中部分断奶仔猪由于患有流行性腹泻，导致每个组均有一个重复数的猪死亡，该试验数据是基于其中一个重复直接计算得来的（即单重复）。2.2低聚壳聚糖对断奶仔猪血清生化指标的影响低聚壳聚糖对断奶仔猪血清指标的影响见表2，与对照组相比，25mg/kg、50mg/kg、100mg/kg低聚壳聚糖组和合生素组的总蛋白(TP)、胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）均没有显著变化（P0.05）；合生素组的白蛋白（ALB）含量极显著下降（P0.01），球蛋白（GLB）含量显著升高（P0.05）。与25mg/kg低聚壳聚糖组相比，50mg/kg、100mg/kg低聚壳聚糖组和合生素组的尿素氮（BUN）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）-3-含量极显著降低（P0.01）。与对照组相比，100mg/kg低聚壳聚糖组的谷草转氨酶活性（GOT）显著升高（P0.05），而100mg/kg低聚壳聚糖组和合生素组的碱性磷酸酶活性（ALP）极显著降低（P0.01）。表2低聚壳聚糖对断奶仔猪血清生化指标的影响指标对照组25mg/kg组50mg/kg组100mg/kg组合生素组TP（g/L）63.63±2.6159.73±2.3562.60±1.8561.25±1.6864.28±2.69ALB（g/L）35.75±0.67Aa32.35±1.92ABa33.40±0.71ABa33.00±1.65ABa28.38±0.29BbGLB（g/L）27.88±2.48b27.38±2.62b29.20±1.33ab28.25±2.00b35.90±2.46aBUN(mmol/L)6.23±0.39ABab8.18±0.52Aa4.43±0.99Bb4.28±0.44Bb4.48±0.98BbTG(nmol/L)1.65±0.19ABab2.24±0.50Aa0.94±0.16Bb0.87±0.11Bb0.91±0.13BbTC(nmol/L)2.05±0.121.95±0.161.96±0.132.19±0.242.02±0.19HDL-C(mmol/L)1.28±0.06ABab1.45±0.09Aa1.05±0.10Bb1.13±0.05Bb1.05±0.05BbLDL-C(mmol/L)0.83±0.031.03±0.100.98±0.151.03±0.090.80±0.04GOT(U/L)52.25±4.57b50.00±4.10b52.25±6.74b74.25±8.20a59.25±1.55abALP(U/L)260.28±17.93Aa255.58±10.48Aa268.72±11.26Aa92.65±9.71Bb97.70±4.57Bb注：同行肩标不同小写字母表示差异显著（P0.05），不同大写字母表示差异极显著（P0.01），下同2.3低聚壳聚糖对断奶仔猪血清抗氧化指标的影响由表3可知，与对照组相比，添加25mg/kg、50mg/kg、100mg/kg低聚壳聚糖及合生素，使血清过氧化氢酶活性（CAT）分别提高了10.19%（P0.05）、106.86%（P0.05）、84.20%（P0.05）和103.32%（P0.05），添加合生素显著提高了总抗氧化能力（T-AOC）（P0.05），其他各组的总抗氧化能力（T-AOC）均相似（P0.05）；各试验组仔猪血清丙二醛含量（MDA）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）无显著差异（P0.05）。表3低聚壳聚糖对断奶仔猪血清抗氧化指标的影响分组CAT(U/ml)T-AOC(U/ml)MDA（nmol/ml)GSH-PX(活性单位)对照组4.81±0.32b6.79±0.10ABCbc3.02±0.08808.57±81.5025mg/kg组5.30±1.25b6.38±0.34BCc3.15±0.13914.29±232.1250mg/kg组9.95±1.48a7.09±0.13ABab4.44±0.65741.43±52.91100mg/kg组8.86±1.65ab6.23±0.15BCc4.24±0.59915.71±146.93合生素组9.78±1.76a7.47±0.17Aa3.75±0.46775.71±78.952.4低聚壳聚糖对断奶仔猪血清免疫球蛋白和激素水平的影响由表4可知，与对照组相比，添加25mg/kg、50mg/kg、100mg/kg低聚壳聚糖及合生-4-素对断奶仔猪血清免疫球蛋白IgG含量影响不大（P0.05）；添加25mg/kg低聚壳聚糖使血清生长激素（GH）、T3、T4含量分别提高102.00%（P0.05）、69.67%（P0.05）、27.46%（P0.05）；添加50mg/kg低聚壳聚糖使血清生长激素（GH）、T3、T4含量分别提高43.00%、53.55%、18.01%，但差异均不显著（P0.05）；添加100mg/kg低聚壳聚糖使血清T3、T4含量也略有提高（P0.05）。表4低聚壳聚糖对断奶仔猪血清免疫球蛋白和激素水平的影响分组IgG(цg/ml)GH(цg/ml)T3(цg/ml)T4(цg/ml)对照组8.47±0.511.00±0.08b1.55±0.32b49.09±4.93b25mg/kg组5.72±1.092.02±0.66a2.63±0.37a65.57±6.73ab50mg/kg组8.31±2.041.43±0.37ab2.38±0.31ab57.93±7.30ab100mg/kg组7.59±0.530.90±0.01b2.17±0.33ab61.31±2.54ab合生素组6.77±0.721.01±0.13b1.43±0.08b66.25±1.19a2.5低聚壳聚糖对断奶仔猪粪便微生物的影响由表5可知，与对照组相比，添加25mg/kg、50mg/kg、100mg/kg低聚壳聚糖及合生素对断奶仔猪肠道乳酸杆菌和大肠杆菌数量均无显著影响（P0.05）。表5低聚壳聚糖对断奶肠道微生物的影响分组乳酸杆菌大肠杆菌对照组8.86±0.126.80±0.1425mg/kg组8.64±0.196.96±0.2250mg/kg组8.82±0.146.32±0.15100mg/kg组8.42±0.116.70±0.24合生素组8.43±0.126.68±0.273小结添加低聚壳聚糖和合生素可不同程度的影响断奶仔猪生产性能和血清生化、抗氧化、免疫球蛋白和激素等指标；综合成本、促生长效果和其它指标考虑，建议断奶仔猪饲料中添加50mg/kg低聚壳聚糖。