临床检验手册

第1页总共28页检验标本的采集、运输、验收和处理标本采集前患者准备患者准备除了特殊检验有专门规定外，一般要求病人处于安静状态，生活饮食处于日常状态，目前一公认大运动量、情绪波动、过度空腹、饮食、吸烟、药物及姿势体位等可影响某些检查结果，现分述如下：1、患者告知医生、护士、检验人员根据检验项目的要求，详细告诉病人检验的目的、注意事项、正确的标本采集方法，让病人了解饮食状况，生理状况，病理变化以及治疗措施等对检验结果的影响，赢得病人的理解和配合，保证检验标本的合格，提高阳性率。2、患者状态一般需要在安静状态下采集标本，因运动后能量消耗，体液丢失，呼吸剧烈，对许多检验结果均有影响。运动的影响可分为暂时性和持续性两类。暂时性影响如使血浆脂肪酸水平下降：丙氨酸、乳酸水平增高；由于呼吸急促，可使PCO2下降，而Ph值升高，持续性影响，如剧烈运动后CK、LDH、ALT、AST等的测定值升高，但恢复较慢，如ALT在停止运动1h后测定，其值乃可偏高30%～50%，据称一场60min的手球训练赛后11h，肌酸激酶活性比比赛前乃增加达125%；运动对RBC、WBC、Hb测定影响明显，可造成假性升高。运动对检验结果的影响程度与个体平时提云锻炼情况及健康状况相关。长期坚持体育锻炼可提高性激素水平。为减少运动对检验结果的影响，一般主张在清晨抽血，住院患者应在起床前抽血，自行到门诊的病人应至少休息15分钟后采血。3、情绪首先患者对采集标本时的恐惧、紧张往往会造成标本采集的失败，尤其在骨髓、脑脊液、胸腹水穿刺时，而静脉采血时偶尔也可能会发生这样的情况。紧张、情绪激动可影响神经—内分泌功能，致使血清非酯化脂肪酸、乳酸、血糖等升高。4、饮食多数实验要求在采血前禁食8～12h，因为饮食中的不同成分可直接影响实验结果。①餐后血液中ALT、GLU、Urea、Na等均可升高。但空腹时间过长，甚至超过24h可出现血糖、蛋白质降低，血中胆红素、TG、游离甘油及脂肪酸增高，而胆固醇则无明显改变。故空腹并非越长越好，近年第2页总共28页国外有报道主张胆固醇单项检验，无需空腹抽血。②高脂饮食后2～4h采血，多数人ALP含量会增高，这主要来自肠源性同工酶，且与血型密切相关。O型或B型兼为Le+分泌型者增高更为明显。③高蛋白质饮食使血浆尿素、血氨水平增高，但对肌酐水平无影响。④高比例不饱和脂肪酸食物，可降低胆固醇含量。⑤香蕉、菠萝、番茄可使尿液5-羟色胺成倍增高。⑥咖啡可使血浆游离脂肪酸、AMY、ALT、AST、ALP增加，并使肾上腺和脑组织释放茶酚胺。⑦食物如有动物血液，可引起粪便假阳性。⑧饮酒后使血浆乳酸、尿酸盐、乙醛、乙酸等增加，长期饮酒者高密度脂蛋白胆固醇偏高、平均血细胞体积、谷氨酰转肽酶亦较不饮酒的病人高，甚至可以将者三项作为嗜酒者的筛选检查。⑨吸烟，烟瘾大者血液一氧化碳血红蛋白含量可高达8%，而不吸烟者含量则在1%以下。此外，儿茶酚胺、血清可的松亦较不吸烟者高。血液学方面变化：白细胞数增加，嗜酸性粒细胞减少，中性粒细胞及单核细胞增多、血红蛋白偏高，平均红细胞体积偏高，并且吸烟组血浆硫氰酸盐浓度明显高于非吸烟组。5、药物药物对检验结果的影响极为复杂，因为药物种类繁多，每种药物对每项检验结果影响的研究还不不能完全做到，中药方面更是知之甚少。众所周知，抗结核药、抗生素、抗白血病制剂，磺胺类药物等，对肝功能有大小不一的影响，甚至少量常用药物也可引起严重的药物反应，故在采样检查前，以暂停各种药物为宜，如某种药物不可停用，则应了解对检验结果产生的影响。6、月经和妊娠在月经周期的3个不同时期，与生殖有关的多种激素将产生不同的变化。纤维蛋白原在月经前期可以增高，血浆蛋白在排卵时减低；胆固醇在月经前期最高，排卵时最低。妊娠期由于胎儿生长发育的需要，母体各系统发生么了适应性的生理变化，雌激素、孕激素伴随HCG的升高，随后胎盘产生激素，最高的激素又可使血浆运输蛋白增加，如甲状腺素、铜蓝蛋白等；随着血浆容量的增加，又可稀释血浆蛋白；怀孕早期，肾小球滤过率升高可以导致尿素、肌酐下降。7、年龄由于人在不同年龄段的代谢不同，故许多检验项目的参考值第3页总共28页根据不同年龄有不同的标准：①血清中某些酶的活性随年龄变化而变化。最明显的一个例子是ALP（碱性磷酸酶），新生儿血清中ALP略高成年人，1～5岁增至成年的2～3倍，然后逐渐下降，到10～15岁，ACP（酸性磷酸酶）也有类似的情况。CK（肌酸激酶）在出生后24h内可达成年的3倍，1～12岁内保持稳定的水平，青春期再升高，以后逐渐降低，直至20岁后趋向恒定。而LD（乳酸脱氢酶）在出生时也为成人的2倍，以后逐渐下降，至14岁和成人值一致。有些酶如CK（肌酸激酶）、ALP（碱性磷酸酶）等老年人都有轻度升高。新生儿胆碱酯酶活性约为健康人的50%,以后随年龄的增长而升高。②不同年龄血液中氧分压（PO2）、二氧化碳分压（PCO2）、酸碱度（PH）也有显著不同。氧分压出生前较低，成人升高到5.05～14.4kpa；二氧化碳分压婴儿比成人低；PH值新生儿为7.09～7.50，其后为7.35～7.45.③不同年龄的人群其激素分泌水平不同，如甲状腺激素、垂体激素、甾体激素等，这对于青春期、老年期和绝经期的妇女尤其重要，会直接影响疾病的诊断和治疗。④6个月～2岁婴儿、老年人的红细胞计数通常低于正常参考值下限，新生儿的血沉因红细胞数量较高而纤维蛋白原含量低而较慢（≦2mm/h）；12岁以下的儿童因红细胞数量生理性低下使血沉较成人稍快。成年后，随着年龄增长（50岁后），纤维蛋白原含量逐渐升高，血沉开始高于青壮年时期。男性平均5年递增0.85mm/h，女性增加的幅度更大（每5年递增2.8mm/h）。⑤白细胞新生儿较高（上限可达15X109/L），个别可高达30X109/L，在6～9天后又逐渐下降至与淋巴细胞大致相等，以后淋巴细胞有逐渐升高，至2～3岁后游逐渐降低，而中性粒细胞逐渐升高，至4～5岁二者又基本相等，后逐渐增高至成人水平。5、体位体位对血液循环有一定的影响，由于血液和组织间液的平衡可因体位不同而改变，因此细胞成分和大分子物质也会发生明显改变，例如由卧位改为立位，血浆ALP、TP、酶、Ca、胆红素、Tch及TG等浓度增高；Hb、HCT、RBC等亦可增加。鉴于体位因素的存在，因考虑门诊和住院病人之间的结果可能存在差异，故采集标本时要注意保持正确的体位及保持体位的一致性，不要让住院病人自行到检验科来采血做血常规，或复查红、白细胞计数等，以免因体位不同引入的误差。第4页总共28页6、时间患者准备还应考虑病人的生物钟规律，尤其是激素水平分析，如女性生殖激素与月经周期密切相关：胆固醇在月经前期最高，排卵时最低；纤维蛋白原在经前期最高，血浆蛋白在排卵时减少。生长激素于入睡后会出现短时高峰。胆固醇、血清铁以清晨最高；血浆蛋白在夜间降低；血Ca往往在中午出现最低值。故采血时间应在相同时间进行。各种检验标本的采集方法1、血液标本采集真空采集管的种类很多，根据抗凝剂不同，用于不同的检测项目。①红细胞分析（包括血细胞五分类计数、细胞分类、Eos计数、Ret计数、疟原虫等）：EDTA盐抗凝真空采血管（紫色盖），采血1管至该度充分混匀：一般指采血后立即将血液和抗凝剂轻轻颠倒混匀，避免用力震荡!）②糖化血红蛋白、血氨：EDTA盐抗凝真空采血管（紫色盖）采血1管至该度充分混匀。③血栓与止血项目（包括凝血四项、凝血因子、D-二具体、纤维蛋白原、FDP、3P试验等）：枸橼酸那抗凝真空管（浅蓝色盖），采血1管至该度充分混匀（注意：务必采血至该度！若是凝血、溶血、血量少或血量多的标本，需要重新采血，否则检测结果不准确）。④三溶试验：采血3管，一管用枸橼酸那抗凝真空管（浅蓝色盖）采血至该度充分混匀；一管用无菌管加2ml生理盐水加几滴未抗凝的全血；一管用无干燥剂的干燥管（红色盖）采集静脉血2-3ml。⑤血沉：用专用血沉管（黑色盖）采血至该度充分混匀。⑥血气分析：血气分析专业注射器采动脉血1-2ml充分混匀并时送检（注意：标本必须密封隔离空气，送检单上需注明体温、血红蛋白值、是否输氧、输氧浓度等。）⑦找红斑狼疮细胞、血渗透压测定：无抗凝剂干燥无菌管（红色盖）采血2～3ml。⑧生化项目（如肝功、肾功、电解质、血糖、心肌酶、免疫球蛋白、补第5页总共28页体、抗O、类风湿等）：促凝管（黄色盖）采静脉血2～3ml。⑨血清蛋白电泳：无抗凝剂的干燥管（红色盖）采静脉血2ml。⑩血氨检测：EDTA抗凝管(淡紫色盖)采血约2ml。⑪免疫项目（HBV、EBV、CEA、AFP等）：促凝管（黄色盖）采静脉血2～3ml。⑫细菌培养：成人用绿盖血培养瓶采血5～10ml，儿童用黄盖血培养瓶采血5ml。⑬骨髓细胞学检查：送检单上务必写明相关临床资料，并附上血常规检查结果。需要骨髓片6张，如为初诊患者应另附两张外周血片。用铅笔于玻璃片头部磨砂处进行注明患者姓名及标本类型。2、尿液标本采集尿液标本种类的选择及收集取决于临床医生的送检目的、病人的情况和检查要求。①晨尿：晨尿指清晨起床后第一次尿标本，较浓缩和酸化，有形成分（如血细胞、上皮细胞、管型）相对集中便于观察，条件恒定，便于对比。晨尿为住院病人留尿的主要方法，常用于尿常规检验。收集方法：清晨起床后收集第一次尿于我院提供的洁净玻璃试管中（最少12ml）。②二次晨尿：是指收集首次晨尿后2～4h内的尿液标本，可提高细菌培养和有形成分计数的灵敏度。方法：要求患者在前晚起尿收集标本止，只饮水200ml。于收集首次晨尿后2～4h内收集于我院提供的洁净玻璃试管中（最少12ml）。③随机尿：随机尿既随意一次尿，留取方便，但受饮食、运动、药物影响较甚，易出现假阳性和假阴性结果。如饮食性蛋白尿，饮食性糖尿，维生素C干扰潜血结果等。随机尿多为门诊急诊就诊病人的留尿方法。方法：随意一次尿收集于我院提供的洁净玻璃试管中（最少12ml）。④餐后尿：餐后尿（进餐后2h收集的患者尿液）适于尿糖、尿蛋白和尿胆原的检查，此时的尿标本可增加实验敏感性，检出较轻微的病变。第6页总共28页主要用于了解葡萄糖代谢情况，用以筛查隐性糖尿病或轻症糖尿病。方法：进餐后2h尿液收集于我院提供的洁净玻璃试管中（最少12ml）。⑤计时尿：计时尿应于计时开始时排空尿液，然后于规定时间内至截止时间留尿，12h尿（前晚8时排空膀胱后至次日8时的所以尿液），24h尿（第一次晨8时膀胱排空后留取次日晨8时所有尿液），因时间较长，细菌易繁殖，根据不同的检验目的，选择不同的防腐剂防腐。例如加40%甲醛0.5ml/100ml尿液中，适用于细胞管型等有形成分检查；加硼酸1g/100ml尿适用于尿蛋白、尿酸测定；激素检验常以盐酸10ml作为24h尿的防腐剂，按规定时间留取尿液，记录尿液总量并标明在检验申请单上，将全部尿液充分混匀，可取至少12ml与我院提供的清洁玻璃试管中送检或全部送检。3、粪便标本的采集对消化系统疾病有重要参考价值。采集粪便标本的方法因检查目的不同而有差别。①一般检验采集时要求用洁净的竹签选取含有粘液、脓血等异常病变成分的粪便，对外观无异常的粪便需从表面、深处及粪便多处取材，留取新鲜指头大小（约5mg）即可，放入专门粪便盒中送检。不采集尿壶或便盆中的粪便标本，若标本中混入尿液柔弱的原虫致死。粪便标本中页不可混入植物、泥土、污水等，因腐生性原虫、植物种子易混淆实验结果。粪便标本不应污染容器外表，且不宜太满，一平勺为宜。②找寄生虫虫卵及作虫卵计数应收集24h粪便全部送检。③查痢疾阿米巴滋养体应于排便后立即送检，从脓血及稀软处取材，冬季需保温送检。④查日本血吸虫虫卵时应取粘液。脓血部分，孵化毛蚴时至少留取30g粪便，且需尽快送检。⑤检查蛲虫卵需用透明薄膜拭子于晚12时或清晨排便前自肛门周围拭取并立即镜检。⑥隐血试验（化学法），试验前3日禁食肉类及含动物血食物并禁服第7页总共28页铁剂，维生素C等。标本收集及时送检，以免长时间放置而使隐血反应的敏感度降低。⑦用于细菌检验的标本采集过程应全部操作收集。4、脑脊液、浆膜腔液、关节液标本采集均由