《微生物检验基础知识》-PPT

课程内容第一单元微生物学基础知识第三单元培养基及器皿准备第二单元消毒、灭菌方式第四单元微生物检验基本方法1第一单元微生物学基础知识微生物在生物界地位一微生物定义及特点二微生物分类三影响微生物生长繁殖的因素四2工厂需要控制的微生物五生物分类系统病毒界原核生物界真菌界(真核)真核原生界动物界植物界病毒细菌酵母菌霉菌藻类原生动物微生物微生物并非生物分类学上的名词，所有个体微小的低等生物通称微生物在生物界地位3地位最低微生物小简低微生物定义及特点个体结构进化4微生物定义及特点微生物分布广、种类多代谢强、繁殖快体积小、面积大适应强、易变异51974年第8版：2000种1994年第9版4500种分类单位：界、门、纲、目、科、属、种伯杰氏细菌鉴定手册微生物分类6微生物非细胞形态细胞形态病毒原核生物真核生物细菌、支原体、衣原体蓝细菌藻类原生动物微生物分类霉菌、酵母菌7细菌1、细菌特点2、细菌分类3、细菌形态4、细菌结构-染色5、菌落形态9、细菌繁殖6、影响菌落因素8、细菌芽孢7、细菌结构10、细菌生长周期原核生物：呈单细胞无核膜二分裂方式繁殖9细菌特点细菌呼吸类型分代谢类型分细胞结构（染色）分形态分球状、杆状、螺旋状自养型、异养型需氧、厌氧、兼性厌氧G+、G-革兰氏染色是鉴别细菌种类的重要方法细菌分类1011球状弧形或螺旋形杆状细菌形态11G+G-细菌结构（染色）12单个细菌显微镜观察细菌菌落单个细胞繁殖肉眼可见细菌与菌落13a.大小：b.形态：c.隆起度：d.菌落边缘：e.表面性状：f.表面光泽：g.颜色透明度：细菌的菌落形态14同种菌落－－特征相似生长环境邻近菌落细胞空间位置不同影响菌落特征的因素：影响菌落形态因素15基本结构：细胞壁、细胞膜、细胞质、核质特殊结构：荚膜、鞭毛、菌毛、芽孢细菌结构16芽孢原因条件恶劣营养损失过程17一个细菌一个芽孢一个芽孢一个营养体芽孢特点：壁厚密，折光强，不易着色，耐热，耐杀菌剂，不易杀灭，在高酸中不易萌发芽孢18小测试灭菌是否彻底判定标准？化验室灭菌条件？芽孢是否被杀灭湿热121℃、20-30分干热160℃、2小时192012481632?202122232425…Nt=N0x2nn=繁殖代数t=培养时间N0=细菌起始数Nt=细菌生长t时间后数量细菌繁殖１个细菌２０分钟繁殖１代，１小时后有几个？20微生物数量时间衰亡期稳定期对数生长期延缓期细菌生长周期细菌能否无限繁殖下去？212、霉菌菌体结构3、霉菌生长繁殖4、霉菌菌落形态霉菌1、霉菌个体形态霉菌霉菌个体形态、结构丝状真菌，一般多细胞，由营养体与繁殖体构成结构：个体形态：23细胞质24无性繁殖（为主）有性繁殖厚垣孢子分生孢子胞囊孢子接合孢子子囊孢子担孢子TM-00027:36霉菌繁殖24霉菌菌落菌落形态：大，疏松，绒毛状，絮状，蜘蛛网状，初期无色，后期产生孢子有颜色252、酵母菌菌体结构3、酵母菌生长繁殖4、酵母菌菌落形态酵母菌1、酵母菌个体形态酵母菌个体形态：多数单细胞，卵圆、球形、椭圆形酵母菌个体形态、结构27有性繁殖：产生子囊和子囊孢子无性繁殖（为主）酵母菌繁殖生长周期同细菌芽殖（普遍）裂殖28酵母菌菌落菌落：大而厚，湿润、粘稠、易被挑起，多呈乳白色，少数为红色（如红酵母）29小结定义特点分类细菌微生物形态结构繁殖30因素营养温度pH渗透压其他水份影响微生物生长繁殖的因素31营养元素碳源生长因子氮源无机盐营养3200.60.70.80.91.0aw:不腐败霉菌和酵母球菌G-G+干燥食品火腿等熟奶酪酱牛奶、饮料浓缩奶蕃茄酱甜炼乳蕃茄酱水份•aw＜0.9，大部分细菌受到抑制•霉菌、酵母菌的孢子和芽孢菌强•G+＞G-c＞b3334aw用来衡量有多少水分可以用来生长aw=pp0p=实际水蒸气压p0=纯水蒸气压0aw1水份34种类最低℃最佳℃最高℃嗜热菌40—4555—7560—90嗜温菌5—1530—4535—47低温菌-5—525—3030—35嗜冷菌-5—512—1515—20对温度适应能力分温度3536酸度(pH值)4.6pH02467914原料奶、纯牛奶细菌霉菌酵母TM-00027:54PH4.6高酸产品PH＞4.6低酸产品酸性乳饮料36厌氧菌好氧菌兼性厌氧菌微氧菌气体37渗透压等渗压高渗压代谢活动正常进行代谢活动呈抑制状态甚至死亡低渗压细胞吸水过分膨大破裂38原奶微生物39控制产品无微生物细菌总数：耐热芽孢嗜冷菌实际需要控制的微生物细菌总数主要：G+球菌（微球菌、链球菌）危害：加快产酸；蛋白不稳定；货架缩短来源：牛体、挤奶用具、盛乳容器耐热芽孢•主要：G+杆菌（蜡状、枯草、梭状、棒状）•危害：质量缺陷；有致病性；食物中毒•来源：土壤、水、尘埃、饲料嗜冷菌42主要：G-杆菌（假单胞菌占50%）危害：释放蛋白酶、脂肪酶；产生苦味；变质来源：挤奶、储奶设备；运输、加工、储藏污染；巴氏杀菌后污染控制措施奶站车间卫生好，清洗消毒要做到巴氏杀菌不能少，超高温处要有效净化处理很主要，过滤能够除芽孢巴氏消毒：杀灭90％细菌、全部病原菌高压蒸汽灭菌：杀灭全部微生物管路严密无死角，产品质量绝对高微生物学基本知识微生物定义微生物特点微生物分类联系实际影响因素44消毒、灭菌概念一热力灭菌二化学消毒三第二单元消毒、灭菌方式45消毒、灭菌概念概念杀死所有微生物包括芽孢和繁殖体杀死病原微生物阻止或抑制微生物生长繁殖无活的微生物灭菌消毒防腐无菌46灭菌和消毒前提条件：清洗干净!起始微生物携带量消毒后清洗后灭菌后消毒、灭菌——清洗47灭菌（消毒）类型温度与时间杀菌范围灭菌物品干热灭菌火焰灭菌火焰灼烧全部微生物耐热物品、接种环、试管口等热空气灭菌160℃2h玻璃器皿、金属用具、等耐热物品湿热灭菌高压蒸汽灭菌法121℃15-30min培养基、生理盐水、玻璃器皿等115℃15-20min热力灭菌48微生物蛋白变性代谢故障死亡高温热力灭菌原理49湿热灭菌优点水蒸汽穿透力强蒸汽凝结成水，放出潜热，提高物体温度湿热灭菌比干热效果好菌体蛋白质吸收水分易凝固50类别名称常用浓度应用范围作用机理醇类乙醇70-75％皮肤、体温计、器械消毒脱水、蛋白质变性表面活性剂新洁尔灭0.05-1％皮肤、器械消毒破坏细胞膜、改变通透性酸类乳酸0.33-1mol/L空气消毒/氧化剂过氧乙酸0.2-0.5%（需严格控制浓度）塑料、玻璃、纺织原料及人造纤维制品；也适用于食品表面消毒（水果、蔬菜、蛋类）和环境地面消毒与蛋白质活性基团反应，酶失活氯制剂漂白粉（次氯酸钙）0.5-1.2%饮用水、厂房和用具，澄清溶液可用水果和蔬菜消毒杀死细菌芽孢卤素氯气0.2-1ppm饮用水消毒同上酚类来苏尔1-2％手、皮肤消毒同上3-5％器械、地面消毒化学消毒51病原微生物蛋白酶类细胞破裂溶解变性沉淀系统破坏破坏细胞膜杀死对非病原微生物不能全部杀死消毒防腐剂作用原理52紫外线消毒原理菌体吸收紫外线损坏核酸中DNA致死空气紫外线照射产生臭氧杀死菌体53消毒、灭菌方式概念种类选用54玻璃器皿清洗、包扎培养基分类及制备一二第三单元培养基及器皿准备55新器皿未污染已污染有油圬用过的载玻片玻璃器皿清洗、包扎清洗包扎56培养基化学成分用途物理状态半固体液体固体增殖鉴别选择半合成合成天然基础加富厌氧特殊培养基分类及制备57容器选择状态观察pH验证灭菌存放注意事项培养基制备58玻璃器皿清洗培养基分类及制备培养基及器皿准备59接种、培养一生化反应实验四血清学实验五动物实验六第四单元微生物检验基本方法制片、染色、观察二增菌实验三60一个亲代细胞一个菌落检样培养基接种和培养接种纯培养分离培养纯培养过程61获得单个菌落倾注涂布划线1.斜线法2.曲线法3.方格法4.放射法5.四格法62染色、制片、镜检染色方法单染法复染法苯胺黑美兰染色革兰氏染色63染色原理革兰氏染色色差增大，轮廓清晰，便于识别菌体细胞壁结构不同固定结构，能够着色，不被水冲掉染色目的固定目的64革兰氏染色结晶紫初染酒精脱色番红复染碘液媒染碘液65镜检结果G+G-66显微镜•使用二甲苯•提高分辨率•目镜×物镜（放大倍数）•机械部分和光学部分构成放大倍数用后处理滴油的目的67微生物检验基本方法接种、培养制片、染色、观察68