《生物化学实验》教学大纲（06版）

1《生物化学实验》教学大纲（06版）一、课程基本信息1.课程中文名称：生物化学实验2.课程类别：必修3.适用专业：生物科学/园林4.课程地位：专业基础课5.总学时：36学时6.总学分：7.先修课程：《无机及分析化学》和《有机化学》二、课程目标《生物化学实验》是生物学科本科生的一门专业基础课。在当今有了惊人发展的生物学科中，生物化学是最活跃的分支学科之一。促使生物化学迅速发展的重要因素之一是新技术的开发。随着生物化学的实验方法日趋专门化和复杂化，牵涉到生物化学实验工作的领域也越来越多。生物化学实验已经成为生物技术领域内最基本的实验操作技能。通过本课程的学习使学生了解“生物大分子的分离和纯化方法，糖、蛋白质、核酸及主要次生代谢产物的定性、定量和有关生物化学性质的分析技术，酶活性测定、动力学分析等”知识和技能，为专业课的学习和专业技能的培训奠定良好的基础，并通过严格的实验要求和管理，诱导和培养学生将所学的知识和技能用于今后的社会实践及创新的思维方法和动手能力，培养严谨的、实事求是作风和与人合作精神，使他们成为团结合作，务实、创新的专门人才。三、课程内容序号实验项目名称学时实验性质实验类型主要设备配置1血糖的斐林法测定3必开设计分光光度计22种子粗脂肪的提取3选开设计索氏提取器3氨基酸分离——双向层析法3必开验证层析缸4样品中总氮量的测定——微量凯氏定氮法3必开设计凯氏定氮蒸馏器5蛋白质的性质——蛋白质及氨基酸的呈色反应3选开验证试管6蛋白质的性质——蛋白质的沉淀反应3选开验证试管7血清蛋白质醋酸纤维薄膜电泳3必开验证醋酸纤维薄膜、层析缸8酶的特性3必开验证水浴、试管9植物组织中过氧化氢酶活力测定3选开设计酸式滴定管10底物浓度对酶促反应速度的影响——米氏常数的测定3必开验证碱式滴定管11酶的提取、分离、纯化及其活力测定3选开综合分光光度计12核酸浓度测定----紫外线（UV）吸收法3必开设计紫外分光光度计13核酸的增色效应3选开设计水浴、紫外分光光度计14氨基移换反应——血液中转氨酶活力的测定3必开设计分光光度计15维生素C含量的测定3必开设计紫外分光光度计16实验设计及操作考试3必开综合实验性质：必开/选开；实验类型：验证、设计、综合、研究。四、教学方法进入本课程的学生必需严格遵守实验室规则和纪律，认真对待每一次实验，3做好实验课前的预习，完成预习报告；仔细推敲、认真操作、细心观察，真实记录实验结果并完成实验报告。鼓励学生对已有实验提出质疑，按照自己的思路设计实验或参与实验教改，以活跃气氛，启迪思维。将利用黑板和多媒体教学手段讲解实验的基本原理、方法及有关仪器的使用方法。五、课程考核（黑体小四号）考查六、教材与参考书（黑体小四号）1、教材：王秀奇、秦淑媛等编《基础生物化学实验》高等教育出版社，2003.62、主要参考书：（1）戴玉锦主编《生物化学》（实验部分）高等教育出版社，1992.10（2）赵永芳主编《生物化学技术原理及应用》科学出版社，2002.7七、其它序号实验项目、实验目的、实验要求和实验内容1实验项目血糖的斐林法测定实验目的掌握Folin-Wu法测定血糖含量的原理和方法。实验要求测定血糖含量实验内容无蛋白血滤液的制备；血糖的测定2实验项目种子粗脂肪的提取实验目的了解鉴别种子品质的指标及方法实验要求掌握测定脂肪的含量的方法实验内容用索氏提取瓶提取种子中的脂肪；计算含量3实验项目氨基酸分离——双向层析法实验目的掌握分配层析分离技术的原理。实验要求用双向层析法分析混合氨基酸样品的成分。4实验内容以滤纸及其结合水作为固定相，以有机溶剂作为流动相，分离混合氨基酸样品，并鉴定其成分。4实验项目样品中总氮量的测定实验目的掌握凯氏定氮仪的使用方法及凯氏定氮法测定样品总氮量的原理。实验要求以鱼粉为样品，用凯氏定氮法测定总氮量。实验内容用鱼粉作实验样品，浓H2SO4消化鱼粉，将有机氮转化成无机氮；用凯氏定氮仪测出该样品中的总氮量。5实验项目蛋白质的性质——蛋白质及氨基酸的呈色反应实验目的了解蛋白质和某些氨基酸的呈色反应原理实验要求掌握几种鉴定蛋白质和氨基酸的方法。实验内容双缩脲反应；茚三酮反应；黄色反应；考马斯亮蓝反应6实验项目蛋白质的性质——蛋白质的沉淀反应实验目的了解蛋白质变性与沉淀的关系实验要求掌握沉淀蛋白质的几种方法实验内容蛋白质的盐析；重金属离子沉淀蛋白质；某些有机酸沉淀蛋白质；有机溶剂沉淀蛋白质；乙醇引起的变性与沉淀7实验项目血清蛋白质醋酸纤维薄膜电泳实验目的学习醋酸纤维薄膜电泳的操作技术，了解电泳技术的基本原理实验要求掌握测定人血清中各种蛋白质的相对含量的方法。实验内容仪器与薄膜的准备；电泳；定量8实验项目酶的特性实验目的了解酶的特性实验要求了解影响酶活力的因素实验内容酶的专一性；温度对酶活力的影响；PH对酶活力的影响；酶的活化及抑制9实验项目植物组织中过氧化氢酶活力测定5实验目的了解过氧化氢酶在生物体中的作用原理实验要求掌握酶活力测定的方法实验内容过氧化氢酶活力测定10实验项目底物浓度对酶促反应速度的影响——米氏常数的测定实验目的了解底物浓度对酶促反应的影响。实验要求掌握测定米氏常数Km的原理和方法。实验内容酪蛋白在不同情况下反应速度11实验项目酶的提取、分离、纯化及其活力测定实验目的了解酶的制备过程以及如何保证酶活力实验要求掌握酶制备每一步所需基本实验技术，了解其原理。实验内容酶的提取；硫酸铵分级沉淀；蛋白质含量的测定；酶活性的测定12实验项目核酸浓度测定----紫外线（UV）吸收法实验目的了解紫外线（UV）测定核酸浓度的原理；进一步熟悉紫外分光光度计的使用方法。实验要求以RNA或DNA干粉为材料，测定核酸浓度实验内容检测样品在260nm波长处的A值。13实验项目核酸的增色效应实验目的验证核酸的紫外吸收特性及增色效应实验要求测出天然核酸及变性核酸的吸光值实验内容使DNA变性，分别测天然DNA和变性DNA的吸光值14实验项目氨基移换反应——血液中转氨酶活力的测定实验目的验证氨基转移反应——谷丙转氨酶作用原理实验要求掌握酶活力测定的方法。实验内容标准曲线的绘制；酶活力的测定；计算酶活力15实验项目维生素C的定量测定6实验目的掌握样品中VC的测定原理及方法。实验要求用分光光度法测定样品中VC的含量。实验内容以桔皮作实验样品或以柑桔作实验样品，直接榨汁，离心后的清液，过滤后作样品液。用分光光度法测定样品液中VC的含量。16实验项目实验设计及操作考试实验目的作为学生本实验课成绩评定的依据。实验要求数据准确度高，平行组数据之间相对平均偏差在1%以内。实验内容完成指定实验样品指定实验项目的测定。2006年2月8日