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选修一生物技术实践第1讲无菌操作技术实践(时间:45分钟)1.(经典题)平板划线法和稀释涂布平板法是纯化微生物的两种常用方法,下列描述正确的是()。A.都要将菌液进行一系列的梯度稀释B.平板划线法是将不同稀释度的菌液通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作C.稀释涂布平板法是将不同稀释度的菌液倒入液体培养基进行培养D.都会在培养基表面形成单个的菌落解析平板划线法不需要进行梯度稀释,稀释涂布平板法是将不同稀释度的菌液滴加到固体培养基的表面。平板划线法和稀释涂布平板法都能在培养基表面形成单个菌落。答案D2.(2012·合肥四校质检)下列有关培养基和菌种鉴定的叙述不正确的是()。A.植物组织培养常用的是固体培养基B.可利用固体培养基上菌落的特征来判断和鉴别细菌的类型C.利用刚果红培养基上是否形成透明圈来筛选纤维素分解菌D.在无氮培养基中加入酚红指示剂鉴定尿素分解菌解析在只含有尿素作为氮源的培养基中加入酚红指示剂鉴定尿素分解菌。答案D3.下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述,其中错误的是()。A.用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基,经高温、高压灭菌后倒平板B.取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1mL,分别涂布于各组平板上C.将实验组和对照组平板倒置,37℃恒温培养24~48hD.确定对照组无菌后,选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数解析在细菌计数时,为保证实验结果的准确性,一般选择菌落数在30~300的平板进行计数,求出平均数,再根据对应的稀释度计算出样品中的细菌数。答案D4.通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物。在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长;在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌;在培养基中加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌。利用上述方法能从混杂的微生物群体中分离出(多选)()。A.固氮细菌B.霉菌C.大肠杆菌D.放线菌解析缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长,而固氮细菌能生长;在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌,霉菌能生长;在培养基中加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌,放线菌能生长。答案ABD5.(2013·枣庄模考)如表所示为分离分解尿素的细菌所用的培养基配方:KH2PO41.4gNa2HPO42.1gMgSO4·7H2O0.2g葡萄糖10.0g尿素1.0g琼脂15.0g自来水定容至1000mL请根据以上配方,回答下列问题。(1)该培养基含有微生物所需要的类营养物质。其中最主要的碳源是葡萄糖,氮源是尿素。(2)该培养基按物理性质划分是培养基;按培养基的作用划分是选择培养基,该培养基具有选择作用的原因是_____________________________。(3)在该培养基中,可通过检测pH的变化来判断尿素是否被分解,依据的原理是_________________________________________________________。(4)若用该培养基来鉴定某种细菌是否能够分解尿素,可在培养基中加入指示剂,尿素被分解后指示剂变色。(5)某同学尝试使用罐头瓶在常温下制作果酒,开始时向消过毒的罐头瓶中加入了新鲜的葡萄汁和酵母菌,添加酵母菌的原因是,添加葡萄汁的目的是为酵母菌的生长发育提供________________________________。答案(1)4(2)固体该培养基中唯一的氮源是尿素,只有能分解尿素的微生物才能在该培养基上生长和繁殖(3)在细菌分解尿素的过程中,细菌合成的脲酶将尿素分解成氨,氨会使培养基的pH升高(4)酚红红(5)酵母菌能分解葡萄糖形成酒精(或酵母菌进行无氧呼吸产生酒精)所需的各种营养物质(或碳源、氮源、水、无机盐和生长因子)6.(2013·湖北三校联考)在日常生活中,一提到细菌、真菌及病毒这些微生物,人们往往首先想到它们的害处,其实,很多微生物对人类是有益的,它们与我们人类的关系非常密切,而且人类已经应用微生物造福于我们的生活。请回答下列问题。(1)从自然界获得纯种酿酒酵母菌的基本程序:配制培养基→接种→培养→观察记录→纯化培养。①采用平板划线法接种,开始接种时要灼烧接种环,目的是。②若葡萄汁中含有醋酸菌,在葡萄酒发酵旺盛时,醋酸菌能否将酒精转变成醋酸?,原因是______________________________________________________________________________。(2)在腐乳的制作过程中,有多种微生物参与了豆腐的发酵,其中起主要作用的是。产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的,可将脂肪水解为甘油和脂肪酸。(3)利用纤维素解决能源问题的关键是高性能纤维素酶的获取。科学家利用培养基从土壤中选择出能分解纤维素的细菌,经过大量培养后可以从中提取纤维素酶。土壤中富含各种微生物,将土壤浸出液接种到特定培养基上,可得到能分解纤维素的细菌,实验室中获取纯净菌的常用方法有和。虽然各种培养基的具体配方不同,但一般都含有水、_____________________________________________。解析(1)采用平板划线法接种,开始接种时要灼烧接种环,目的是灭菌;若葡萄汁中含有醋酸菌,在葡萄酒发酵旺盛时,醋酸菌不能将酒精转变成醋酸,原因是醋酸菌是好氧菌,葡萄酒发酵阶段的无氧条件抑制了醋酸菌的生长。(2)在腐乳的制作过程中,有多种微生物参与了豆腐的发酵,其中起主要作用的是毛霉。产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸。脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸。答案(1)①灭菌②不能醋酸菌是好氧菌,葡萄酒发酵阶段的无氧条件抑制了醋酸菌的生长(2)毛霉肽和氨基酸脂肪酶(3)平板划线法稀释涂布平板法无机盐、碳源、氮源
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