一测多评在中药制剂质量评价中的研究

————————[第一作者]陈繁华,主管中药师,从事药品质量标准研究工作；Tel:[phone],E-mail:[e-mail][通讯作者]邬伟魁,硕士,从事药品质量研究工作；Tel：[phone],E-mail:[e-mail]一测多评在中药制剂质量评价中的研究陈繁华1,邬伟魁1,严倩茹2,宋伟3（1.梅州市食品药品监督检验所,广东梅州514071；2.成都中医药大学药学院,成都611137；3.湖北科技学院药学院,湖北咸宁437100）摘要：近年来我国中药质量评价新技术、新方法研究日益增多。该文总结了一测多评在中药制剂质量评价中的研究进展,对一测多评已应用的品种、测定的成分、内参物、样品数进行统计分析,指出了目前发表的研究论文在方法学等方面存在的不足,提出了一些改进建议；以期进一步规范一测多评的方法学考察、方法学验证等内容,提高一测多评在中药制剂质量评价中应用研究的质量。关键词：一测多评；中药；制剂；质量评价Studyonmulti-componentdeterminationofPreparationofTCMbyQAMSChenFan-hua1,WuWei-kui1,YanQian-ru2,SongWei3（1.MeizhouInstituteforFoodandDrugControl,Meizhou504071,China;2.ChengduUniversityofTraditionalChineseMedicine,Chengdu611137,China;3.HubeiInstituteofTechnologyCollegeofPharmacy,Xianning437100,China）Abstract：Basedonthepreviousliteratures,theoverviewontherecentadvanceofdeterminationofPreparationofTCMbyquantitativeanalysisofmulti-componentsbysingle-marker(QAMS)wassummarized.ThekeyquestionsofQAMSwerealsohighlighted.ItcouldbeconsideredasafeasiblemethodforthequalitycontrolofTraditionalChineseMedicines.Keywords：Quantitativeanalysisofmulti-componentsbysingle-marker；TCM；Preparation；Determination多年来,中药制剂大多是以单一指标成分进行质量评价,难以真正体现中药多效性和整体性的特点。随着时代的进步,中药质量标准体系已进入了全新的快速发展阶段,一系列新技术(如LC-MS,指纹图谱等)、新方法(如DNA鉴定,多指标质量控制模式等)在国家标准中得到应用[1]。现代中药多成分同步质量控制模式出现了①对照品供不应求,②药品检验成本高昂等现实的问题,限制了多指标质量评价在科研、生产、监督检验中的应用。近年实践证明,一测多评(quantitativeanalysisofmulti-componentsbysingle-marker,QAMS)在中药质量评价中具有较强的适用性。QAMS的由来、原理、应用可行性、评价模式建立过程中涉及的关键问题及其在中药材中的应用已见综述报道[2],此不赘述。本文主要介绍了QAMS在中药制剂质量评价中的研究进展,并就其存在的问题和发展前景进行讨论。1QAMS的提出与发展简介中药质量控制是中药现代化的关键性技术问题,而中药多成分、多指标质量评价模式存在对照品紧缺等问题。如何通过一个易得成分的测定实现多个成分同时测定,是现代中药质控方法的现实化问题。2006年,王智民等[3]率先提出了QAMS的中药质量评价方法。QAMS的研究思路侧重从量上阐明主要成分或药效成分间的相互关系,可实现在对照品短缺的情况下,对多指标成分进行含量测定。这种符合中药特点的多指标质量评价新模式逐渐被业内接受并认可,许多研究者进行了深入的研究[4-6],并在部分中药材、饮片、配方颗粒、复方制剂中得到应用研究,甚至还用于中药材提取工艺的优选[7]。2008年,QAMS被应用于中药复方制剂的含量测定；2010年,QAMS同时测定黄连中小檗碱、巴马汀、黄连碱、表小檗碱、药根碱等5个成分含量的方法被《中国药典》收录[8]；2011年,制订了一测多评法建立的技术指南[9](下文简称《指南》)。目前,有些企业已实现了这一技术在中成药的应用,提高了检测效率和药品质量控制标准,相关技术有望申请国家专利。第十届药典委员会在《中国药典》2015年版编制大纲中明确指出,要完善中药质量控制模式,建立完善有效活性成分测定、多成分同步定量以及特征或指纹图谱检测技术；要加强有效性的质量控制,积极采用现代科研成果，加大科研成果向标准转化的力度，增加和完善专属的与疗效相关的鉴别、检查、含量测定项目,重点引入一测多评、指纹和特征图谱、DNA分子鉴定、生物测定等新的分析方法和检测技术。相信在2015年版《中国药典》中将有更多的中药材和成方制剂采用此方法进行含量测定。2QAMS在中药制剂中的研究概况以“一测多评”、“QAMS”作为检索词检索CNKI数据库,并对结果进行逐一筛查发现,至2013年2月该库收录21篇QAMS在中药制剂中的应用研究。一测多评已经在双青咽喉片(A)、丹参注射液(B)、银黄片(C)、咳喘宁片(D)、牛黄解毒片(E)、消炎利胆片(F)三黄片(G,G1,G2)、复方丹参片(H)、银黄制剂(I,银黄颗粒I1,银黄胶囊I2,银黄含片I3,银黄片I4)、双黄连制剂(J,双黄连口服液J1,双黄连胶囊J2,双黄连片J3,双黄连口含片J4)、香连制剂(K,香连丸K1,香连片K2,香连胶囊K3)、热痹消颗粒(L)、穿心莲片(M)、新清宁片(N)、元胡止痛胶囊(O)、冠脉康胶囊(P)、麦贞花颗粒(Q)、银杏叶胶囊(R)、速效救心丸(S)、湿疹软膏(T)等20多种中药制剂(注：以字母编号)的多成分定量测定和多指标质量控制中得到了探索研究(见表1)。表1已开展一测多评研究的中药制剂品种和化学成分类别制剂生产厂家样品批次药物组成组成数测定成分类别测定成分数文献数量数量A13金银花提取物、青蒿油、青果提取物、乌梅提取物、甘草酸单铵、薄荷脑6苯丙素等10[10]B518丹参1酚酸7[11]C713金银花提取物、黄芩提取物2有机酸6[12]D620桔梗、石膏、罂粟壳、甘草、麻黄、百部、苦杏仁7生物碱5[13]E33牛黄、雄黄、石膏、大黄、黄芩、桔梗、冰片、甘草8蒽醌5[14]F130穿心莲、溪黄草、苦木3内酯4[15]G1022大黄、盐酸小檗碱、黄芩浸膏3黄酮4[16]922蒽醌4[17]H120丹参、三七、冰片3丹参酮4[18]I1828金银花提取物、黄芩提取物2黄酮4[19]I1915I277I315I411J1237金银花、黄芩、连翘3黄酮4[20]J1624J239J323J411K1616黄连、木香2生物碱4[21]K199K233K344L110黄柏、萆薢等8生物碱4[22]M1010穿心莲1内酯4[23]N120熟大黄1蒽醌4[24]O38延胡索、白芷2香豆素等3[25]P33葛根、丹参等≥2黄酮等3[26]Q110麦冬、女贞子、红花、槐米4黄酮等3[27]R412银杏叶提取物1黄酮3[28]S13川芎、冰片2萜类3[29]T110白芷、大黄等≥2香豆素2[30]表2已开展一测多评研究的中药制剂中化合物之间的校正因子制剂测定成分参比物色谱柱流动相校正因子文献A没食子酸、柠檬酸、新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C、甘草酸单铵、蒿酮没食子酸AkzoNobelKromasilC18,LubexKromasilC18,PhenomenexLunaC18,DikmaPlatisilODS乙腈-0.1%磷酸水0.015,0.418,0.420,0.418,O.517,0.518,0.516,0.096,0.641[10]B原儿茶酸、丹参素钠、原儿原儿WatersSymmetryC乙腈-0.05%三氟8.96,2.57,2.[11]茶醛、香草酸、阿魏酸、迷迭香酸、丹酚酸B茶醛18,InertsilODS－SP,CAPCELLPAKC18乙酸水63,1.17,2.27,4.99C绿原酸(5-O-咖啡酰奎宁酸)、3-O-咖啡酰奎宁酸、4-O-咖啡酰奎宁酸、4,5-O-二咖啡酰奎宁酸、3,5-O-二咖啡酰奎宁酸、3,4-O-二咖啡酰奎宁酸绿原酸钻石二代,资生堂G120,Thermo,kromasil,Agilent-extend,PhenomenexLuna,大连依利特(BDS)乙腈-0.4%磷酸水1.0112,1.0198,1.0534,1.1886,1.2241[12]D吗啡、磷酸可待因、盐酸罂粟碱、盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱吗啡AgilentXDB-C18,AgilentZorbaxSB-C18,AlltimaC18,Shim-packVP-ODSC18,Shim-packVP-ODS,ShiseidoC18MG2乙腈-0.1%磷酸水1.357,0.542,2.410,2.465[13]E大黄素、芦荟大黄素、大黄酸、大黄酚、大黄素甲醚大黄素DiamonsilC18甲醇-0.1%磷酸水1.351,1.010,1.490,0.571[14]F穿心莲内酯、新穿心莲内酯、去氧穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯穿心莲内酯PhenomenexC18,AgelaC18,AgilentC18,DionexC18乙腈-水1.156,0.769,0.759[15]G1黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素黄芩苷XtimateTMC18甲醇-0.2%磷酸水1.22,1.61,1.63[16]G2大黄素、大黄酸、大黄酚、大黄素甲醚大黄素DiamonsilC18,SynergiHydro-RPC18,KromasilC18,XtimateC18,AccurasilC18甲醇-0.4%磷酸水1.13,1.46,1.01[17]H丹参酮ⅡA/二氢丹参酮Ⅰ、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ丹参酮ⅡAEcosilC18,MerckPurospherSTARRP-18e,AgilentTC-C18,InertsilODS-3,WatersSymmetryC18,WatersSunFireC18甲醇-水1.614,0.737,2.283[18]I黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素黄芩苷DiamonsilC18,GeminiNXC18,KromasilC18,XtimateTMC18、AccurasilC18甲醇-0.2%磷酸水1.20,1.62,1.68[19]J黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素黄芩苷XtimateTMC18甲醇-0.2%磷酸水1.22,1.69,1.65[20]K小檗碱、表小檗碱、黄连碱、巴马汀小檗碱Kromasil100-5C18乙腈-水(45：55,含50mmol·L-1磷酸二氢钾,25mmol·L-1十二烷基磺酸0.980,0.911,1.008[21]钠,pH3)L小檗碱、黄柏碱、药根碱、巴马汀小檗碱KromasilC18,WelchMaterialsC18,HederaC18乙腈-0.1%磷酸水(36∶64,每1000mL中加入2g十二烷基磺酸钠)3.025,0.966,0.965[22]M脱水穿心莲内酯、穿心莲内酯、新穿心莲内酯、去氧穿心莲内酯脱穿心莲内酯依利特HypersilC18,DikmaDiamonsilC18,SHISEIDOC18,GLInertsilC18乙腈-水0.9685,0.6356,0.8642[23]N大黄素、大黄酸、大黄酚、大黄素甲醚大黄素AccurasilC18甲醇-0.4%磷酸水1.107,1.438,1.016[24]O欧前胡