[医学微生物学]衣原体螺旋体.

第21章衣原体Chlamydia概念：是严格真核细胞内寄生有独特发育周期能通过细菌滤器的一类原核细胞型微生物。衣原体的共同特征革兰阴性，圆形或椭圆形体，体积大于病毒含有DNA和RNA两类核酸有核糖体和较复杂的酶类，能进行多种代谢有独特的发育周期，二分裂方式繁殖对多种抗生素敏感主要致病性衣原体对人致病:沙眼衣原体（C.trachomatis）肺炎衣原体(C.pneumoniae)对动物致病:鹦鹉热衣原体（C.psittaci）兽类衣原体(C.pecorum)世界首次分离培养成功沙眼衣原体；“沙眼金奖”获得者——汤飞凡教授第一节概述一、生物学性状独特生长发育周期：Elementarybody原体(EB)始体或网状体(Reticulatebody,RB)0h8h24h30h35~40h一生物学性状（一）发育周期与形态染色衣原体有独特的发育周期，在普通光学显微镜下可观察到两种形态，小而致密的为原体；大而疏松的为始体原体呈球形、椭圆形或梨形，直径0.2～0.4µm，是发育成熟的衣原体。具有强感染性，在宿主细胞外较稳定，无繁殖能力。当进入宿主易感细胞后，宿主细胞膜围于原体外形成空泡，原体在空泡中逐渐发育，增殖成为网状体。Giemsa染色呈紫色，Macchiavello染色呈红色。始体体积较大，直径0.5～1.0µm，圆形或椭圆形，电子致密度较低，无胞壁，代谢活跃，以二分裂方式繁殖，在空泡内增殖成许多子代原体。成熟的子代原体从被破坏的感染细胞中释放，再感染新的易感细胞，开始新的发育周期，每个发育周期约48～72h。网状体是衣原体发育周期中的繁殖型，不具感染性，Macchivello染色呈蓝色。*发育周期从原体进入宿主细胞，到有新原体从得宿主细胞释放出来的过程称为一个发育周期一个发育周期大约48-72h*染色性用Macchiavello或Giemsa法染色，原体为红色或紫色，始体染成深蓝色原体（培养60小时）包涵体：指在易感细胞内繁殖的始体和子代原体的空泡，具有鉴别意义，成熟的包涵体含大量原体。抵抗力：对热、常用消毒剂、红霉素敏感75%乙醇0.5min可杀灭；耐低温和干燥（冷冻干燥保存30年）.感染性胞外稳定性繁殖力代谢活性原体0.2-0.4um++----始体0.5-1.0um––++培养特性：鸡胚卵黄囊接种Hela细胞抗原结构：属特异性抗原（位于胞壁，脂多糖）种特异性抗原（主要外膜抗原，MOMP）型特异性抗原（种间分血清型依据）主要外膜蛋白易变异衣原体分类：衣原体属：沙眼生物变种沙眼衣原体性病淋巴肉芽肿变种鼠生物变种肺炎衣原体鹦鹉热衣原体兽类衣原体二、致病性与免疫性致病物质与机制：脂多糖（LPS）：抑制宿主细胞代谢，破坏宿主细胞外膜蛋白：阻止吞噬体与溶酶体结合表位变异而逃避抗体的中和热休克蛋白：沙眼瘢痕的形成免疫性：不强且短暂易持续感染，反复感染如沙眼主要病原性衣原体沙眼生物型14个血清型沙眼(A、B、Ba、C血清型)包涵体结膜炎(B、Ba、D-K血清型)非淋菌性泌尿生殖道感染(D-K血清型)婴幼儿肺炎(D-K血清型)性病淋巴肉芽肿型4个血清型性病淋巴肉芽肿(L1、L2、L2a、L3血清型)肺炎嗜衣原体呼吸道感染（TWAR血清型）（一）沙眼目前世界上致盲的第一位病因通过眼—眼或眼—手—眼途径传播眼结膜上皮细胞易感，其胞质内形成包涵体早期，流泪，结膜充血及滤泡增生，伴脓性分泌物晚期，结膜瘢痕，眼睑内翻，倒睫，角膜血管翳，失明沙眼衣原体沙眼角膜血管翳新发现：沙眼衣原体G型与宫颈鳞癌的发生密切相关（二）包涵体结膜炎新生儿包涵体结膜炎：产道感染性接触—手—眼成人包涵体结膜炎污染的游泳池水—眼引起滤泡性结膜炎，症状似沙眼，但无沙眼的后期症状沙眼衣原体（三）泌尿生殖道感染非淋菌性尿道炎男性：并发附睾炎、前列腺炎等女性：并发宫颈炎.卵巢炎.盆腔炎等性传播疾病淋菌混合感染沙眼衣原体（四）性病淋巴肉芽肿人是唯一宿主性传播疾病侵犯淋巴组织男性：腹股沟淋巴结炎和慢性肉芽肿女性：会阴—肛门—直肠狭窄和梗阻腹股沟淋巴结炎肺炎嗜衣原体人是唯一宿主飞沫或呼吸道分泌物传播是呼吸道疾病重要的病原体，肺炎、支气管炎等表现为咽痛、咳嗽、咳痰、发热等新发现：肺炎嗜衣原体与冠状动脉粥样硬化的形成有关（五）呼吸道感染微生物学检查法（一）直接涂片镜检Giemsa染色，沙眼还要做碘液染色，查包涵体（二）酶抗体法检查抗原用抗衣原体抗体、酶标抗体IgG（三）分离衣原体小鼠腹腔、鸡胚卵黄囊或培养细胞（四）血清学诊断（五）检查核酸PCR，杂交等，特异性及敏感性高Giemsa染色Lugal碘液染色微生物学检查与防治特异性荧光抗体血清检测衣原体原体注意个人卫生（流水洗脸、防治性病等）红霉素、喹诺酮类药物治疗疫苗（尚无）防治原则：复习思考题名词解释：衣原体简述衣原体生活周期，比较原体始体。简述衣原体所致疾病类型及其型别。第22章螺旋体Spirochetes概述钩端螺旋体属密螺旋体属I概述螺旋体(Spirochete)--------一类细长、柔软、螺旋状、运动活泼的原核细胞型微生物。生物学性状与细菌相似。基本结构与细菌相似，例如有细胞壁、原始核质，以二分裂方式繁殖和对抗生素等药物敏感等。1概念2分类与人致病有关的螺旋体根据螺旋数目、螺旋规则程度、螺旋间距分：*钩端螺旋体属*密螺旋体属*疏螺旋体属名称螺旋数螺旋其他特点举例疏螺旋体3-10不规则回归热疏螺旋体伯氏疏螺旋体密螺旋体8-14规则，细密两端尖苍白密螺旋体苍白亚种钩端螺旋体规则，更细密两端钩状问号状钩端螺旋体重要的螺旋体螺旋体的科和属螺旋体引起人类疾病病原体螺旋体科密螺旋体属(Treponema)梅毒苍白密螺旋体苍白亚种疏螺旋体属(Borrelia)莱姆病伯氏疏螺旋体流行性回归热回归热疏螺旋体钩端螺旋体科钩端螺旋体属(Leptospira)钩端螺旋体病问号状钩端螺旋体第一节钩端螺旋体LeptospiraLeptospirosisLeptospirosisScanningelectronmicrographofLeptospirainterrogansstrainRGA.Twospirochetesboundtoa0.2µmfilter.StrainRGAwasisolatedin1915byUhlenhuthandFrommefromthebloodofasoldierinBelgium.CDC/NCID/[e-mail]1生物学性状•形态与染色螺旋细密（5-15um长，0.1-0.2um宽）、规则一端/两端钩状，菌体成8、S或C形在暗视野显微镜下运动活泼G-,Fontana镀银染色,染成棕褐色培养特性营养要求高10%兔血清的Korthof培养基温度28oC-30oC,PH7.2-7.4生长缓慢（1-2周），菌落小抵抗力抵抗力弱，但在潮湿环境中可生存数月对青霉素敏感三、致病性与免疫性1、致病物质内毒素样物质：溶血素：注射入小羊，可出现贫血、出血、肝肿大、黄疸和血尿。细胞毒性因子：患者急性期血浆中存在，将之注射小鼠，(CTF)可出现肌肉痉挛、呼吸困难而死亡。致细胞病变物质：注射入家兔，可形成红斑和水肿。主要引起细胞的退行性病变。二、致病性与免疫性•所致疾病钩端螺旋体病------一种人畜共患传染病•传染源,储存宿主•传播途径鼠和猪人与污染水或土壤接触,经粘膜或破损皮肤进入;经胎盘垂直传播动物：多不发病，在肾脏繁殖-尿-排出流行季节：秋收水稻、雨季或洪水时•临床表现进而损伤全身毛细血管内皮细胞及肝、肾、肺心及中枢神经，可出现休克、DIC、黄疸、出血、心肾功能不全、脑膜炎等。先形成钩体血症•疾病特点起病急、高热、乏力、全身酸痛、眼结膜充血、腓肠肌压痛、表浅淋巴结肿大临床特征：寒热“三痛”爬不起，拒绝检查腓肠肌，眼红出血淋巴肿，流行多在夏秋季。眼结膜充血3免疫性特异性的体液免疫－－特异性抗体4微生物检查法1）病原学诊断取标本－－镜检－－分离培养－－动物实验2）血清学诊断5防治方法抗菌疗法药物：青霉素非特异性：防鼠，灭鼠，圈猪，保护水源特异性构体外膜亚单位疫苗治疗药物首选青霉素检查与防治病原体检查：直接镜检、分离培养、动物试验及其他血清学诊断：显微镜凝集试验、补体结合试验、间接凝集试验防治原则：第二节梅毒螺旋体Treponemapallidum（苍白密螺旋体苍白亚种）SyphilisisaPublicHealthProblemWorldwide12MillionNewCasesEachYear90%ofcasesoccurindevelopingnationsSub-saharanAfrica33%SouthandSoutheastAsia33%LatinAmericaandCaribbean25%NorthAfricaandMiddleEast3%EastAsiaandPacific2%NorthAmerica1%WesternEurope1%Eastern1%EuropeSource:WorldHealthOrganization.Globalprevalenceandincidenceofselectedcurablesexuallytransmitteddiseases:overviewandestimates.Figure9:Estimatednewcasesofsyphilisamongadults,1999.一、生物学性状•大小0.1–0.27–8um•形态染色两端尖直、8-14个密螺纹Fontana镀银染色呈棕褐色暗视野下，观察运动活泼暗视野显微镜下观察HistopathologyHistopathologyshowingshowingTreponemapallidumTreponemapallidumspirochetesinspirochetesintestisofexperimentallyinfectedrabbit.testisofexperimentallyinfectedrabbit.ModifiedSteinersilverstain.ModifiedSteinersilverstain.CDC/Dr.EdwinP.Ewing,Jr.epe1@CDC/Dr.EdwinP.Ewing,Jr.epe1@cdccdc..govgov梅毒螺旋体梅毒螺旋体，Fontana镀银染色•抵抗力极弱，对红霉素、青霉素、砷剂敏感注：4℃血库存放3天以上的血液无传染梅毒的危险•培养组织细胞培养，但生长困难二、致病性----梅毒•致病物质：荚膜样物质（唾液酸、粘多糖）主要外膜蛋白，透明质酸•传染源：梅毒病人（人是唯一宿主）•传播途径：三种（性传播、血液传播、垂直传播）先天梅毒：三联征锯齿形牙、间质性角膜炎（垂直传播）神经性耳聋后天梅毒：传染过程分三期，反复隐伏和再发（性传播、血液传播）先天梅毒先天梅毒儿锯齿形牙锯齿形牙间质性角膜炎第一期：硬性下疳期第二期：梅毒疹期第三期：树胶肿期后天梅毒早期梅毒晚期梅毒3weeks皮肤粘膜梅毒螺旋体硬性下疳传染！梅毒螺旋体潜伏在体内2~3个月无症状潜伏期梅毒疹期3周~3月症状消退而痊愈少数病例潜伏感染约4年早期梅毒传染性强破坏性小晚期梅毒树胶肿期I期梅毒生殖器硬下疳梅毒皮疹（II期）梅毒全身皮疹（II期）树胶肿（III期）鞍状鼻梅毒性主动脉瘤三、免疫性特异性制动抗体--抗TP抗体反应素（IgA+IgM）--抗脂质抗体辅助诊断，非特异性•传染性免疫•以细胞免疫为主•两种抗体四、微生物学检查非密螺旋体抗原试验(RPRtest或USRtest)密螺旋体抗原试验荧光密螺旋体抗体吸收试验(FTA–ABS)梅毒螺旋体制动试验(TPI)梅毒螺旋体血凝试验(TPHA)直接镜检荧光抗体镜检检查梅毒螺旋体血清学试验梅毒诊断：病史+临床症状+病原体检测+血清学检测五、防治原则1.加强卫生宣传和社会管理2.避免经性接触而感染3.病人应早诊断及彻底治疗4.治疗首选青霉素且剂量要足思考题1.钩端螺旋体所致疾病、传染源储存宿主，传播途径？2.梅毒螺