媒介生物监测技术

媒介生物监测技术孟凤霞研究员博士硕士生导师中国疾病预防控制中心传染病预防控制所电话：[e-mail]2010.5.12郑州主要内容1.我国媒介生物监测的概况2.重要媒介生物监测方法种类：分类识别和发生情况调查1.1媒介生物监测相关的知识背景1.媒介监测概况1.2世代、生长发育规律、生物学习性、种群发生规律等1.3口器孳生地和活动规律监测场所1.4媒介生物及其相关的监测？病媒生物指能通过生物或机械传播方式将病原生物从传染源或环境向人类传播的节肢动物和啮齿动物。主要包括节肢动物中的蚊、蚤、蜱、螨、虱、蝇、蜚蠊等，啮齿动物的鼠类。„病媒生物密度监测：长期、连续、系统地收集病媒生物，对其种类、数量、分布和季节消长等资料进行整理分析，并对结果进行解释和反馈，供卫生行政部门和疾病预防控制机构制定、实施、评价和调整病媒生物控制的策略和措施。„病媒生物抗药性监测：系统地了解不同区域的主要病媒生物对常用杀虫剂的抗药性水平及其发展动态，以制定抗药性治理策略，筛选有效控制药剂。„病媒生物带菌率的监测。1.4.1监测意义病媒生物监测已被列入各级疾病预防控制中心的职能之一，并列入考核项目。„了解不同区域病媒生物的分布、密度、季节消长规律等情况。„发现一些病媒生物发生、变化的规律及探索其对相关传染病的影响。„促进各级疾控中心的人员和能力建设。1.4.2我国现有的媒介生物监测体系„全国四害密度监测„全国重要病媒生物监测„全国重要病媒生物抗药性监测„其他相关监测：疟疾媒介、登革热媒介、乙脑媒介、鼠疫宿主和媒介、流行性出血热宿主等1.4.2.1四害密度监测„自20世纪50年代起，开展以“除四害”为主要内容的爱国卫生运动。“四害”：苍蝇、蚊子、蟑螂和老鼠，是我国四类重要的病媒生物。„1985-1988年建立了“四害”密度监测系统（蚊虫监测始于1987年），这个监测系统为我国传染病疾病控制和提高人民健康生活水平起了重要作用。„在全国爱国卫生运动委员会办公室统一领导下，由中国预防医学科学院流行病微生物学研究所媒介生物学及控制研究室主持全国蚊虫密度监测工作。•设福建、云南、湖南、北京、山西、江苏、上海、山东、河南、四川、辽宁、吉林、黑龙江、内蒙、广东等15个监测点„监测生境：郊区或农村住房、牲畜棚„方法：人工小时法1.4.2.2全国重要病媒生物监测„2005年卫生部下发了《全国病媒生物监测(试行)方案》，并在全国的试点省（市、自治区）试行。历时5年，收获也很大！监测网络的组织、分工和职责„(一)监测网络„中国疾病预防控制中心牵头组织，以中国疾病预防控制中心传染病预防控制所病媒生物监测中心为依托，以各省(自治区，直辖市)为单位，根据不同的病媒生物性传染病和地理特点选择代表性生境设立监测点。„(二)分工和职责„1.中国疾病预防控制中心„全国监测方案的制订，组织、协调全国监测工作的实施；承担全国病媒生物监测的技术指导和培训；监测信息的收集、整理、分析和反馈；并进行监测质量的督查和质量控制。„2.省(自治区，直辖市)疾病预防控制部门„依据全国监测方案的要求，组织开展辖区内监测工作；确定一名主管领导负责协调各级监测点的工作，督促检查监测方案落实；按时收集、分析、上报和反馈监测结果，进行技术指导和监测质量控制和考核工作。„3.市(地、州)疾病预防控制部门„负责病媒生物监测方案的实施，指定专人负责监测点工作，完成监测任务，并对区、县疾病预防控制部门工作进行技术指导。监测系统简介省份监测点名称监测点数目海南琼中县、三亚市2广西桂林、南宁2广东广州、汕头、茂名3湖北宜昌、襄樊、武汉3湖南长沙、郴州2浙江杭州、宁波2上海宝山区1江苏无锡、南京、徐州3山东青岛、济南、东营3山西太原、晋城2天津12个区县1辽宁沈阳市、大连市2吉林长春市、通化市、白城市3黑龙江哈尔滨、齐齐哈尔、牡丹江3甘肃平凉市、张掖市、兰州市3江西南昌、景德镇2四川成都、南充、雅安3北京17个区县1新疆克拉玛依、阿克苏2总计19省43•监测点分布表监测内容及方法简介„蚊虫监测：监测生境：居民区、公园、医院、农户、牲畜棚监测方法：诱蚊灯法（19省采用）、人工小时法（3省采用）监测频次：每月上、下半月各1次监测时间：常年季节性监测，各地根据当地气候条件自行决定数据分析6个指标：„种类构成；„各类病媒总密度；„各种病媒密度比较；„各省病媒密度比较；„不同环境中的病媒密度比较；„季节消长趋势。2.1按照媒介生物的类别分为：2.1.1蚊虫监测方法2.1.2家蝇的监测方法2.1.3鼠类的监测方法2.1.4蜚蠊的监测方法2.2按照监测时的状态分为：2.2.1常规监测方法2.2.2应急监测方法2.3按照媒介的危害分为：2.3.1骚扰性媒介监测2.3.2登革热媒介监测2.3.3疟疾媒介监测2.3.4流行性乙型脑炎媒介监测2.重要媒介生物的监测分类方式蚊虫的监测和调查方法1灯诱法（包括二氧化碳灯诱法）2产卵雌蚊诱集法3诱集法（人和动物诱集法）4人工小时法（人房、畜圈）5挥网法6帐诱法（人和动物诱集法）7幼虫吸管法8幼虫勺捕法9蚊虫产卵诱集法10灭蚊磁诱集法按蚊的调查方法：二氧化碳诱蚊灯法、动物诱集法、人工小时法、挥网法、帐诱法、幼虫勺捕法、灭蚊磁诱集法。库蚊调查方法：二氧化碳诱蚊灯法、蚊虫产卵诱集法、动物诱集法、人工小时法、挥网法、帐诱法、幼虫勺捕法、灭蚊磁诱集法。伊蚊调查方法：蚊虫产卵诱集法、幼虫吸管法、人诱法、灭蚊磁诱集法、二氧化碳诱蚊灯法。成蚊密度调查方法蚊虫的调查方法„„人工小时法人工小时法„„灯诱法灯诱法人工小时法1.器具、试剂电动吸蚊器、广口瓶、乙醚、手电筒、脱脂棉、橡皮筋等。2适用范围„适用于人房或畜圈中处于静止休息状态成蚊的调查与监测。人工小时法——调查点的选择„点的选择依据：按地理方位（例如东西南北不同方向）和孳生地的存在。„每个调查区域选择农户3-4户，牛棚和猪圈各3-4处，确保每个村调查农户、牛棚和猪圈各10个（户）。„定时、定点、定方法进行室内成蚊密度调查。调查区（县）1个村A点3~4户C点3~4户B点3~4户按照方案的要求选点调查时间„在蚊虫的发生期，如5、6、7、8、9月的上下旬各进行一次。日落1小时后，在手电筒的照明下，使用电动吸蚊器捕集正在栖息的蚊虫，每次每个有人居住的房间和畜圈（猪圈和牛棚）吸蚊虫15min。人工小时法——蚊虫处理分类、鉴定-20度或-80度保存记录调查结果附表C2标记标记送某单位检测送国家疾控中心鉴定„数据记录与编号。A村01-10户，人房、畜圈p58附表C2成蚊人工小时法(15分钟)调查记录表年月日省（市）市区（县）街道（乡）环境类型：□居民区（居委＋户名）□农户（村屯＋户名）□牛棚猪圈□（村屯＋户主）气温：℃，风力：级晴□多云□阴□编号地点（户名）致倦库蚊淡色库蚊骚扰阿蚊三带喙库蚊中华按蚊嗜人按蚊微小按蚊刺扰伊蚊其它合计备注调查人：审核人：调查负责人：诱蚊灯法用具及条件诱蚊灯、电源、灯的支架、乙醚、带盖中型塑料桶、脱脂棉、镊子、白瓷盘、塑料平皿、记号笔、温湿度计、风速仪、GPS灯诱法——调查点的选择例子在调查村的不同方位选择3个调查地点，农村住户外环境（有蚊虫孳生的场所如池塘、稻田等）、猪圈和牛棚，各1处，没有牲口棚的以民房外环境补齐。定时、定点、定方法进行成蚊密度调查1天。调查区（县）1个村A点外环境1处、猪圈1个、牛圈1个C点（同A）B点（同A）诱蚊灯法的调查时间„在5、6、7、8、9月的上下旬各调查一次，测定日期由各调查点确定，风雨天气(风力五级以上)顺延。诱蚊灯法操作方法„从日落前后半小时开始开灯，日出前后关灯并收集蚊虫。„将集蚊代取下，扎口后，在密封的塑料桶或其他容器中，用乙醚麻醉后，在白瓷盘中，去掉非蚊虫的昆虫。„记录能够辨认的种类，填表，不能够辨认的蚊虫放入平皿中（标记采集时间、地点、生境、采集人和采集方法），于含有变色硅胶干燥剂的干燥器内干燥数日。„待样品便干后取出，用平皿或50ML离心管封存，在离心管或平皿下放置少量脱脂棉（或棉花），以减少因运送而造成的虫体碰撞破损。密度指数计算：密度(只/灯·小时)=蚊虫捕获数÷（灯数×调查小时数）诱蚊灯法——蚊虫处理分类、鉴定-20度或-80度保存记录调查结果附表C2标记标记送国家疾控中心检测无法鉴定的送某单位鉴定附表C1成蚊诱蚊灯调查记录表年月日省（市）市区（县）街道（乡）气温：℃，风力：级晴□多云□阴□环境类型编号致倦库蚊淡色库蚊白纹伊蚊骚扰阿蚊三带喙库蚊中华按蚊嗜人按蚊微小按蚊刺扰伊蚊帕氏按蚊其它合计备注居民区（农户）牛棚猪棚调查说明每个调查处所，（1）在居民区或农户各调查1晚，日落前后半小时（下午5-6点钟）放，日落前后半小时（早晨5-6点钟）收；（2）在牛圈或猪圈各调查1晚调查人：审核人：调查负责人人诱法„一人坐在室外，暴露小腿吸引蚊虫前来刺叮，在一定时间，一般为半小时或1个小时内用吸蚊管或电动吸蚊器捕捉小腿上停落的蚊虫，以捕捉的蚊虫数/人小时表示密度。疫区不好做„以这种方法调查淡色库蚊、致倦库蚊、中华按蚊应在日落后1-1.5小时内进行。而调查白纹伊蚊则应在白天进行。场所：¾人房¾猪舍¾野外¾监测指标及意义‡种类－优势蚊种‡密度‡季节消长－生态分布规律‡蚊虫带毒率监测－乙脑病毒人类发病牲畜发病（马）蚊虫鸟类死亡时间发病监测方法敏感动物WNV阳性血症灯诱法和人工小时法都适宜流行性乙型脑炎媒介的监测标本分拣、记录、运输及保存取出倒出标本标本分类标本分装剔除雄蚊放入-20℃冰箱取出液氮疟疾媒介的密度监测方法1.人工小时法2.蚊帐内捕蚊法3.宿主诱捕法(1)人诱捕法：(2)动物诱捕法：4.灯诱法：5.叮人率人诱法指每人每夜受到蚊虫叮咬的频率，它不单是媒介按蚊传疟能量计算的一个重要参数，也可作为按蚊密度的指标。方法：于日落至第二天清晨，在居民点附近在室外安置单人蚊帐一顶，帐门关闭，蚊帐内置一床，一人睡于床上作为诱饵，另一人手持捕蚊管和手电筒，搜捕停于蚊帐外的按蚊。前、后半夜帐内帐外人员可交换。人诱法最大的缺点是限于条件，不可能设立很多的点，而捕蚊结果受捕蚊人的技术水平而出现误差。在实施诱蚊时，由于诱捕者的个体差异，可出现明显的差异。其次，诱捕人应具有奉献精神，实施诱蚊前，不能预先作任何防蚊和驱蚊的准备。叮人率调查的注意事项1.捕蚊时必须定时定人定点。2.如遇刮风下雨，可延后1~2天。3.参与捕蚊的人员，捕蚊时不宜在蚊帐周围抽烟。4.捕蚊人员可穿长衣长裤，但不宜涂抹趋避剂。5.第二日清晨，应立即将捕蚊管内的捕获按蚊，麻醉后，鉴定蚊种并在调查表中作好记录。蚊虫的分类鉴定成蚊标本制作致倦库蚊（Culexpipiensfatigans）/淡色库蚊（Cx.pipienspallens）白纹伊蚊（Aedesalbopictus）、骚扰（刺扰）阿蚊（Armigeressubalbatus）、三带喙库蚊（Cx.tritaeniorhynchus）、三带喙库蚊（Cx.tritaeniorhynchus）、嗜人按蚊（Anophelesanthropophagus）、微小按蚊（An.minimus）、刺扰伊蚊（Ae.vexans）、帕氏按蚊（An.pattoni）蚊虫的孳生地类型„田塘型：主要孳生在稻田、沼泽、人工湖、各类池塘等大型或较大积水场所，中华按蚊、嗜人按蚊、三带喙库蚊是本型代表蚊种。„缓流型：主要孳生在小溪、沟渠等缓流中，微小按蚊是这个类型的代表蚊种。„丛林型：主要孳生在丛林或山麓灌木隐蔽下的石穴、溪床积水等小型积水中，大劣按蚊是这个孳生类型的代表蚊种。„坑洼型：主要孳生在坑洼、尤其是污染的积水中，淡色库蚊、致倦库蚊和骚扰阿蚊是这个类型的代表。„容器型：主要孳生在人工或/和植物容器积水中，埃及伊蚊和白纹伊蚊是这个类型的代表。成蚊栖息习性与宿主选择性雌蚊选择适宜宿主吸血后离开，寻找合适的场所栖息，等待蚊胃中的血液消化和卵巢发育成熟，在室内栖息的蚊虫，喜欢在潮湿的房内、卧室内，尤其是在悬挂汗污的衣物上停留。在野外的栖息场所有桥洞、土穴、灌木丛、草丛、树洞和鼠洞等隐避的地方。根据雌蚊吸血