UREA项目操作手册

XXXX医院检验科AU全自动生化仪尿素SOP文件编号:页码/Pages:生效日期:版本/Revision:仪器序列号：XXXXXX起草人:日期：修改人：日期：SOP标准操作程序UREA尿素（货号：OSR6134，OSR6234）一、目的：规范尿素测定的操作程序，确保尿素测定的结果准确二、适用范围：在BeckmanCoulterAU分析仪上定量测定人血清中的尿素（UREA）三、临床意义尿素在肝脏中合成，它是蛋白质和氨基酸代谢的最终产物。因此，尿素合成取决于每日的蛋白质摄入量和内源性蛋白质代谢。在这些代谢过程中产生的绝大多数尿素通过肾小球过滤消除，40–60%扩散返回血液中（与近端小管中的流速无关）。远侧小管内的重新扩散取决于尿流，受抗利尿激素调节。在利尿期间，最少量的尿素重新扩散进入血液，大量尿素被排泄到尿液中，血浆尿素浓度很低。在抗利尿（在少尿性心力衰竭，缺水状态或口渴中，可能出现这种状况）期间，尿素重新扩散到小管内的速度增加，血浆尿素增加。在肾前性和肾后性肾衰竭中，小管尿流减少，导致远侧小管中的尿素重新扩散增加，肌酐分泌增加。在心脏代偿失调、蛋白质分解代谢增加和缺水时，尿素会发生肾前性增加。尿素水平可能因肾脏因素而升高，例如急性肾小球肾炎，慢性肾炎，多囊肾，肾小管坏死和肾硬化。尿素的肾后性升高可能由泌尿道梗阻引起。血浆尿素浓度取决于肾灌注、尿素合成速度和肾小球滤过率(GFR)，在急性肾功能衰竭，慢性肾衰竭和肾前性氮质血症中，可能会升高。在透析患者中，尿素浓度代表蛋白质的降解，也是代谢状态的指标。在肾衰竭终末期，尿毒素病征（特别是与胃肠系统有关的尿毒素病征）与尿素浓度有密切的相关性。在肾功能的鉴别诊断中，血清尿素和血清肌酐通常会一起测定。四、方法原理在水和尿素酶存在的情况下，尿素被水解，产生氨和二氧化碳。在谷氨酸脱氢酶(GLDH)存在的情况下，上一反应中产生的氨与2-酮戊二酸和NADH结合，产生谷氨酸盐和NAD+。单位时间NADH吸光度的降低与尿素浓度成正比。反应原理分析参数：样本体积2ul吐水量0ulR1体积40ul吐水量30ulR2体积40ul吐水量10ul波长340/660方法RATE反应方向-读点112/27五、标本的采集与处理5.1.受检者的准备：空腹，采集前静坐5min，如有输液，应在停止输液3min后在另一侧肢体静脉采集。5.2.静脉采血：除非是卧床病人，一般取坐位从肘部静脉采血，使用止血带的时间不超过1min，穿刺成功后立即松开止血带。5.3.抗凝剂：本室采用带分离胶的真空采血管，其中包含促凝剂。5.4.标本处理：血标本应该尽快送到实验室，室温下放置20min后即可离心，可直接用分离胶管上机。分离的血清在2-25℃可保持稳定7天。六、标本拒收标准1）严重溶血、脂血2）标本标识不明3）采血量不足2ml七、仪器与材料XXXX医院检验科AU全自动生化仪尿素SOP文件编号:页码/Pages:生效日期:版本/Revision:仪器序列号：XXXXXX起草人:日期：修改人：日期：7.1.仪器：BeckmanCoulterAU生化分析仪7.2.试剂：BeckmanCoulterAU专用尿素（UREA）试剂【货号OSR6134或OSR6234】A.试剂准备：本试剂为即用型试剂，可以直接放在仪器上。B.储藏和稳定性：在2-8℃不开封储藏时，试剂可保持稳定到声明的失效期；开封后，在分析仪上储藏时，可保持稳定30天C.参与反应成分的最终浓度：Tris缓冲液100mmol/LNADH≥0.26mmol/L二磷酸四钠10mmol/LEDTA2.65mmol/L2-氧戊二酸盐≥9.8mmol/L脲酶≥17.76kU/LADP≥2.6mmol/LGLDH≥0.16kU/LD.此试剂作为体外诊断用；不要入口，吞下有害；如果溅入眼睛，请立即用大量清水冲洗，然后就医；避免接触皮肤，带上适当的手套；必须将试剂及其容器作为有害废物处理带上适当的手套；必须将试剂及其容器作为有害废物处理。7.3.定标品：BeckmanCoulterAU多项系统校准液SystemCalibrator，货号OE663007.4.质控液：BeckmanCoulterAU血清质控液ControlSera，货号ODC0003和ODC0004八、定标SystemCalibrator，货号OE66300。定标品UA的值可溯源到国家标准与技术协会(NIST)参考物质(SRM)909b水平1。详细操作步骤参见仪器操作规程当发生下列情况时，重新定标分析：试剂批号改变或质控值显著变化；仪器提示需要定标时；对分析仪进行了重要的预防性维护，或更换了关键部件。九、质控在BeckmanCoulterAU生化分析仪上测定ControlSera，货号ODC0003和ODC0004按照优良实验室规范（GLP）建议，在每天检验患者样本、以及在每次进行定标/空白测定时，均应检验质控品。每天测定两个水平的质控血清。本实验室获得的结果，可能与给定的均值不同，因此实验室在根据要求运行多次后，得出特定于被分析物的质控目标值，这些目标值应在相关产品文献提供的相应可接受范围内。如果发现新的趋势或数值突然变化，应检查全部工作参数当发生下列情况时，需要再次质控：重新定标、仪器保养后十、定标及质控达不到要求10.1.查看定标报告，根据提示采取相应的措施10.2.质控达不到要求：A.对同一份质控血清进行进行重新测定B.同批号内更换质控血清进行重新测定C.更换不同批号质控血清进行重新测定D.对失控项目进行重新定标E.检查仪器参数，进行仪器保养和维护F.请示上级主管，向专家请教XXXX医院检验科AU全自动生化仪尿素SOP文件编号:页码/Pages:生效日期:版本/Revision:仪器序列号：XXXXXX起草人:日期：修改人：日期：十一、参考范围期望值可能随着年龄、性别、样本类型、饮食和地理位置的不同而有所差异。各实验室应验证期望值对其人群的可转移性，必要时应按照优良实验室规范（GLP），测定自己实验室的参考范围。用于诊断时，应始终结合患者病史、临床检查和其他发现来评估结果。本实验室综合评估后采取以下参考范围：血清/血浆成人2.8–7.2mmol/L(17–43mg/dL)新生儿1.4–4.3mmol/L(8.4–25.8mg/dL)婴儿/儿童1.8–6.4mmol/L(10.8–38.4mg/dL)十二、具体性能特征线性：在0.8-50mmol/L(5-300mg/dL)的浓度范围内，本实验呈线性。精密度：通过对3份血清混合物长达20天得分析，获得下列数据N=80批内检测总计平均值mmol/LSDCV%SDCV%1.970.052.280.063.259.710.101.030.232.3837.400.340.910.912.42灵敏度：灵敏度为最低可检测水平代表非零UREA的最低可测量水平。本实验室通过重复测定不含被分析物的样本20次，将其绝对平均值加上三倍标准差，得出UREA灵敏度可达到0.38mmol/L。干扰物质：研究发现，本方法对干扰物质具有如下敏感性：黄疸：浓度达20mg/dL（合342μmol/L）的胆红素，干扰小于10%溶血：浓度达2.5g/L的血红蛋白，干扰小于10%脂血症：浓度达500mg/dL的Intralipid®，干扰小于3%十三、参考文献1、ThomasL.Ureaandbloodureanitrogen(BUN).In:ThomasL,ed.Clinicallaboratorydiagnostics.Useandassessmentofclinicallaboratoryresults.Frankfurt/Main:TH-BooksVerlagsgesellschaft,1998:374-377.2、NewmanDJ,PriceCP.Renalfunctionandnitrogenmetabolites.In:BurtisCA,AshwoodER,eds.Tietztextbookofclinicalchemistry.Philadelphia:WBSaundersCompany,1999;1239-1241.3、TalkeH,SchubertGE.EnzymatischeharnstoffbestimmunginblutundserumimoptischentestnachWarburg.KlinWochenschr1965;43:174-75.4、EhretW,HeilW,SchmittY,TöpferG,WisserH,ZawtaB,etal.Useofanticoagulantsindiagnosticlaboratoryinvestigationsandstabilityofblood,plasmaandserumsamples.WHO/DIL/LAB/99.1Rev.2:44pp,49pp.5、NCCLS.Urinalysisandcollection,transportation,andpreservationofurinespecimens;approvedguideline.NCCLSDocumentGP16-A2,2nded.Pennsylvania:NCCLS,2001.6、PainterPC,CopeJY,SmithJL.Referenceinformationfortheclinicallaboratory.In:BurtisCA,AshwoodER,eds.Tietztextbookofclinicalchemistry.Philadelphia:WBSaundersCompany,1999;1838pp.7、Kazmierczak.Urea.In:KaplanLA,PesceAJ,eds.Clinicalchemistrytheory,analysisandcorrelation.St.Louis:Mosby;1996:500pp.8、YoungDS.Effectsofdrugsonclinicallaboratorytests,5thed.AACCPress,2000.