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基因有限公司张振华Eco™Real-TimePCRSystemIllumina的产品服务新一代测序技术平台基因芯片技术平台实时PCR技术平台厂家简介HiSeq2000RedefiningthetrajectoryofsequencingGenomeAnalyzerIIxMostwidelyadoptedNGSplatformHiScanSQUniquecombinationofsequencingandarraysHiScanSpeed,qualityandversatilityforarraysBeadXpressAccuracy,versatilityandflexibilityformoleculartestingEcoGold-standardqPCRmadeaccessibleSequencingArraysqPCRHiSeq1000AnySequencingprojectwithinreach产品简介创新技术操作界面应用内容Eco实时荧光定量PCR系统由1975年诺贝尔生理学和医学奖获得者DavidBaltimore博士和世界著名光子与微细加工专家AxelScherer博士共同研发产品简介仪器状态指示灯固定的光学系统安全的热盖高性能反应模块安全门锁安静的通风系统体积:32×34.5×32cm;重量:约16Kg32cm34.5cm32cm产品简介Eco结构马达该设计从根本上消除了热不均一性和边缘效应精准的温度控制和卓越的温度均一性提高了数据质量和实验重复性精准的控温系统导热元件是一个中空银槽,中空银槽是密闭的,内含一种特殊液体导热介质。在PCR循环过程中,液体导热介质通过两个反方向搅拌装置驱动,在中空银槽中快速流动,使热量从半导体均匀传递到整个银槽。创新技术搅拌浆Twosetsof48high-powerfixedLEDsforexcitation48Bluearray48GreenarraySeriesoffourbandpassfilters(upgradeableto5)CCDArray光学系统--光路创新技术Eco独特的校准优化数据质量光学系统--控制过程创新技术独特的图标驱动用户界面,大大简化了实验设计和设置操作软件简捷的样品类型设置操作软件直观的循环界面操作软件1.绝对定量分析2.相对定量分析--基因表达差异分析3.HRM分析4.基因分型应用AbsoluteQuantification用于分析某未知样本中个某一核酸分子的绝对量值,即通常所说的拷贝数。应用:病原微生物或病毒含量的检测转基因动植物转基因拷贝数的检测RNAi基因失活率的检测PlateLayoutStandardCurveRelativeQuantification用于测定一个测试样本中目标核酸序列与校正样本中同一序列表达的相对变化。校正样本可以是一个未经处理的对照或者是在一个过程研究中处于零时的样本。应用:比较经过不同处理样本之间特定基因的表达差异(如药物处理、物理处理、化学处理等)特定基因在不同时间的表达差异cDNA芯片或差显结果的确证PlateLayoutRQvssample高分辨率熔解(HighResolutionMelting,HRM)分析技术是基于核酸的物理性质,通过饱和的插入染料监控DNA熔解曲线变化而进行分析的一种技术。扩增子的熔解曲线完全取决于DNA碱基序列。只要一个碱基发生了突变,就会改变DNA链的解链温度。HRM可以区分单碱基差异。HRM检测不受突变碱基位点和种类的局限,无需使用序列特异性探针,具有高灵敏度、操作简单、高通量、成本低等优点HRM应用主要基于两种技术的进步:具有精确控温装置和高密度数据采集的仪器(解链温度差异极小,零点几摄氏度,使用高分辨率的仪器才可以检测)双链DNA嵌入型饱和荧光染料如LCGreenHRMHRM分析过程HRM原始曲线随着DNA熔解,SybrGreen被释放,荧光信号骤降导出图“速率”曲线的最高峰是分离速率最大的点,即等于熔解温度应用:突变发现/筛查/扫描SNP基因分型/等位基因区分物种鉴定表观遗传学/DNA甲基化微卫星分析HRMGenotyping实验注意事项仪器20分钟左右开启,预热。配制PCR体系时,加样一定要准确加每个样品一定要更换枪头,防止交叉污染样品板上的膜一定要封好样品上机之前一定要离心,避免气泡影响实验结果问题……?谢谢!Illumina公司是一家集开发,制造及销售用于分析遗传变异和生物功能的综合系统的高科技公司。1998年成立,2005年进入中国,并以惊人的速度不断发展,于2007和2009年两次入选福布斯杂志评出的美国年度成长速度最快的高科技公司,同时亚太地区也是Illumina全球增长最快的区域。2010年Illumina并购Helixes公司。厂家简介14seriesof2foldserialdilutionB-ActinFamlabeledTaqmanprobechemistryQuantitationHighResolutionMeltingGenotyping5distinctclustersobservedGGCCDELAATT操作软件开放的平台:支持实时PCR的全部应用,包括最具挑战性的高分辨熔解(HRM)曲线分析性能卓越:灵敏的精密控制的光学技术;精准的温度控制技术和极佳的温度均一性;Cq值重复性高,数据准确性高,4色荧光检测:同类产品荧光通道最多标准化:出厂时已对SYBR、FAM、HEX、VIC、ROX和Cy5等荧光染料进行校正,遵循MIQE指导原则软件:以图标驱动的软件界面,实验设计和设置简单,简洁明了的操作流程只需3个步骤通量:48孔反应板,满足绝大多数用户的需求微量:5~20μl反应体系,节约成本快速:40个循环<40分钟小型:结构紧凑、体型小巧,适合个人使用便宜:同类产品价格最低产品优势HRM分析实验操作仪器设备:1EcoTM荧光定量PCR仪及配套的已安装好分析软件的电脑2离心机3微孔板离心机4涡旋震荡器(Vortex)5移液枪(2μl,20μl,100μl,200μl各一)及相应尺寸进口tip试剂耗材:1.RealtimePCR定量试剂盒(SYBRGreen):该预混系统提供了经过优化的缓冲液、dNTP、HotStartTaqDNA聚合酶、SYBRGreenI染料和MgCl2,使用者只需加入适量的引物、模板和水,即可进行荧光定量PCR检测。2.DNA模板和引物3.DDH204.无粉乳胶手套实验所需试剂设备及样品操作流程DavidBaltimore1938出生在纽约1972年34岁成为MIT生物学教授1974年36岁当选美国科学院院士1975年37岁获诺贝尔生理医学奖1997-2006年任加州理工学院校长产品简介AxelScherer加州理工学院应用物理学系电机工程教授世界著名光子与微细加工专家
本文标题:Illumina-Eco荧光定量PCR
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