8致病性弧菌.

致病性弧菌弧菌属（Vibrio）•弧菌属，为一大群菌体短小、弯曲成弧形的革兰阴性菌•主要特点–有单鞭毛，运动活泼–培养要求为碱性环境–自然界广泛分布，以水中最多–只要有霍乱弧菌、副溶血弧菌、创伤弧菌•霍乱主要表现为剧烈的呕吐、腹泻、失水，死亡率甚高。属于国际检疫的烈性传染病。•霍乱弧菌包括两个生物型–古典生物型（Classicalbiotype）–埃尔托生物型（EL-Torbio-type）。一、霍乱弧菌1、形态与染色•革兰染色阴性；弧性或逗点状；在病人“米泔水”样便中呈“鱼群”样排列；•有一根单鞭毛，运动非常活泼，呈鱼群穿梭样或流星状，•有菌毛和性菌毛，0139群有荚膜。一、生物学性状（二）培养特性与生化反应•霍乱弧菌为需氧或兼性厌氧菌•营养要求不高，耐碱不耐酸，在pH8.8-9.0的碱性蛋白胨水或平板中生长良好。因其他细菌在这一pH不易生长，故碱性蛋白胨水可作为选择性增殖霍乱弧菌的培养基，培养基不能含有其能发酵的糖类。•无盐环境中能生长（淡水、海水），其他致病弧菌不能•TCBS（硫代硫酸盐、枸橼酸盐、胆盐、蔗糖）培养基上生成黄色菌落生化反应：•过氧化氢酶、氧化酶阳性•发酵多种糖类，产酸不产气•还原亚硝酸盐，吲哚反应阳性•霍乱红反应阳性，不同生物型生化反应不同（当培养在含硝酸盐及色氨酸的培养基中，产生靛基质与亚硝酸盐，在浓硫酸存在时，生成红色，称为霍乱红反应）抗原的构造与分群•有不耐热H抗原和耐热的O抗原。•前者为共同抗原，特异性低；•后者具群特异性和型特异性，是分群和分型的基础。•根据O抗原的不同，现有155个血清群，其中O1群、0139群引起霍乱。•出现36kb的新基因，替代原有的01群抗原基因，遗传学特征和毒力基因与O1群相似。•其余02群—0138群引起人类的胃肠炎，不引起霍乱流行，称为非Ol群霍乱弧菌。古典生物型不溶解羊RBC不凝集鸡RBC对50IU的多黏菌素敏感可被第IV群噬菌体裂解O-1群EITor生物型完全相反非O-1群：引起散发性胃肠炎。O139群：1992年起引起霍乱流行。•据O1群抗原因子A、B、C组成分为小川型、稻叶型、彦岛型，前两种易造成流行。•据表型差异，每一个血清型又可分为古典生物型和ELTor型。O1群霍乱弧菌的血清分型型别别名O抗原成份原型稻叶型（Inaba）A、C异型小川型（Ogawa）A、B中间型彦岛型(Hikojima)A、B、C霍乱弧菌的分类和流行古典生物型1817--1923ElTor生物型1961--O17次大流行O1391992.10O2、O3、........O155耐热——O抗原不耐热——H抗原耐热性抵抗力ElTor生物型和其它非01群霍乱弧菌不耐酸，在正常胃酸中仅能存活4分钟在外环境中的生存力较古典型为强水中存活长，河水、井水、海水中1-3周怕热，100℃1-2分钟死亡致病物质•ToxR蛋白调控的ctxA、ctxB、tcp、zot、ace等基因•不受ToxR蛋白调控的毒力因子基因hlyA和hap1．鞭毛、菌毛•单鞭毛–运动活泼，鱼群样穿梭–穿透能力强，有助于细菌穿过肠粘膜表面粘液层而接近肠壁上皮细胞而粘附•普通菌毛–定居因子，是细菌定居于小肠粘膜上皮细胞的重要因素–此相关基因有acf和tcpA•粘液素酶：毒力强的菌株产生，分解肠粘膜上粘液层，有助于细菌穿过粘液层•O139群还存在荚膜多糖和LPS毒性决定簇，具抵抗杀菌和黏附功能2．霍乱肠毒素•结构：1A和5B两个亚单位•功能–B亚单位与GM1神经节苷脂受体结合；介导A亚单位进入细胞，并裂解为A1和A2两条多肽，A1发挥毒性作用。–ADP+GGS；Gs使腺苷酸环化酶(AC)持续活化，cAMP水平升高。–肠上皮细胞主动分泌Na+、K+、HCO3－和水；肠腔大量积液，导致严重腹泻和呕吐A1结构：1A、5BB亚单位与小肠粘膜上皮细胞GM1神经节苷脂受体结合A亚单位裂解为A1和A2两条多肽，A1亚单位进入细胞发挥毒性作用A1活化AC，使ATP转化成cAMP，使之在细胞内含量增高cAMP水平升高，导致肠腺上皮细胞分泌功能亢进，大量水和电解质在肠腔堆积，引起剧烈腹泻A15个B亚单位A2受体GM1细胞膜腺苷环化酶ATPcAMPH2OCI-Na+大量分泌腹泻腹泻腹泻致病机理霍乱肠毒素的作用机制霍乱肠毒素的编码•基因–结构基因ctx(choleratoxin)A和ctxB编码–ctxAB操纵子–毒性相关基因•zot(zonulaoccludenstoxin，小带联结毒素)•ace(accessorycholeraenterotoxin，附属霍乱肠毒素)基因剧烈腹泻和呕吐（米泔水样腹泻物），大量水分和电解质丧失，低容量性休克及心力不齐和肾衰竭（死亡率高达60%）烈性肠道传染病，为我国的甲类法定传染病传播途径主要是通过污染的水源或食物经口摄入所致疾病传染源临床表现霍乱病人、无症状感染者上吐下泻•古典型所致疾病较ElTor生物型重；•O139群感染比O1群严重。霍乱病人脱水貌—眼窝深陷、皮肤弹性消失霍乱病人免疫性感染霍乱弧菌后，机体可获得针对同群的体液免疫为主的牢固免疫力O1群霍乱弧菌•感染霍乱弧菌后，机体可获得牢固免疫力，再感染少见–保护性的抗肠毒素抗体及抗菌抗体–肠道局部粘膜免疫是保护性免疫的基础O139群霍乱弧菌•感染O1群获得的免疫对O139群感染无交叉保护作用–O1群的脂多糖O抗原与O139群存在显著差异，且还缺少荚膜多糖表面抗原–而O139群的保护性免疫以针对脂多糖和荚膜多糖的抗菌免疫为主–故O1群引起的免疫不能交叉保护O139群的感染（流行病学调查）微生物学检查法标本直接镜检分离培养悬滴法观察细菌呈穿梭样运动涂片见G-性弧菌，鱼群状排列碱性蛋白胨水增菌选择培养基为TCBS玻片凝集反应病人粪便，肛拭水样鉴定试验确定血清群确定血清型生物分型快速诊断免疫荧光球法SPA协同凝集试验噬菌体裂解凝集试验防治原则改善社区环境，加强水源管理，培养良好个人卫生习惯疫苗预防接种使用抗生素，并及时补充液体和电解质，预防大量失水导致的低血容量性休克和酸中毒治疗霍乱的关键控制传染源切断传播途径提高易感者免疫力隔离病人，治疗无症状携带者二、副溶血弧菌（V.cholerae）•生物学特性–形态：弧形，单鞭毛；条件不适宜则呈长or球杆状等；–抵抗力：不耐热，90C1分钟即被杀死；不耐酸，50%食醋中1分钟死亡；•培养特性–嗜盐（halophilic）：在培养基中以含3.5%NaCl生长最为适宜，无盐或高于8%NaCl则不能生长；–在普通血平板上（羊、兔、马血）不溶血或只产生α溶血；–神奈川现象（Kanagawaphenomenon,KP）：在“我妻（wagatsuma）琼脂平板”（7%NaCl、人O型血or兔血、D-甘露醇）上产生β溶血，呈阳性（KP+）的菌株是致病住株。致病因子•耐热直接溶血素（thermostabledirecthemolysin，TDH）•耐热相关溶血素（thermostablerelatedhemolysinTRH）•其它致病物质可能还包括粘附素和粘液素酶所致疾病•食物中毒•传播途径：烹饪不当的海产品、盐腌制品或生熟不分所传播•潜伏期5~72小时，可从自限性腹泻至中度霍乱样病症•免疫性：病后免疫力不强，可重复感染•该菌还可引起浅表创伤感染、败血症等诊断•标本采集：患者粪便、肛拭或剩余食物•分离培养：SS琼脂平板或嗜盐菌选择平板•嗜盐性试验与生化反应•诊断血清进行鉴定防治•治疗可用抗菌药物•严重病例需输液和补充电解质