水产生物基础实验

水产生物基础实验实验一上皮组织一、目的要求：1、通过观察各种类型的上皮组织的结构，掌握上皮组织的共同特点。2、了解各种类型上皮组织的结构与机能的关系。3、了解上皮组织细胞之间的联系二、实验内容及方法步骤：（一）被覆上皮1、单层上皮组织：（1）单层扁平上皮——蛙肠系膜镀银装片低倍镜观察，可见细胞呈多边形，彼此紧密相接，细胞之间有黑色或黑棕色的波纹线，这是被银染色的细胞间质，细胞中可见染淡黄色的椭圆形的细胞核。（2）单层立方上皮——肾髓质切片，H.E染色低倍镜观察，可见到许多含有胶体的滤泡。换高倍镜观察滤泡壁多数都是由单层立方上皮构成，细胞高度与宽度相等，呈立方形，核圆形，位于中央。（3）单层柱状上皮——胆囊切片，H.E染色低倍镜观察，可见胆囊壁的一侧有大小不等的突起，突起的表面衬有单层柱状上皮。将上皮移至视野的中央，转换高倍镜，可见细胞呈柱状，细胞排列成单层，细胞核呈椭圆形，位于细胞的基部。（4）假复层纤毛柱状上皮——气管横切片，H.E染色低倍镜观察气管内表面上皮，移至视野中央，转换高倍镜观察，可见细胞排列紧密，有一游离面和一基底面，胞核椭圆形，偏于基底面，分布于不同的水平面上，似乎细胞排列为2~3层，但每一个细胞都和基膜相连，故实为单层。仔细观察细胞的形态，其中主要为高柱状的细胞，其游离面有纤毛，另一端附着于基膜上，胞核位置较高。其次是梭形和锥形的细胞，均附着于基底面上，无游离面，胞核位置较低。2、复层上皮（1）复层扁平上皮——食管横切，H.E染色低倍镜观察，可见管壁内表面衬有复层扁平上皮。转换高倍镜观察，可见表层细胞较厚，排离紧密，为扁平形，胞质染成较深的红色，胞核也扁，呈深紫色。中层细胞大，多为椭圆形，胞核为圆形或椭圆形，细胞排列较疏松。深层细胞为矮柱状，排列较紧密，细胞界限不甚清楚，与基底膜紧密相连。（2）变移上皮——膀胱上皮，H.E染色显微镜观察，可见膀胱壁内表面为变移上皮。上皮由数层排列紧密的细胞组成，有游离面和基底面，基底面与其他组织相连。细胞的形态和层数因器官机能状态而异。观察收缩状态的膀胱上皮，上皮细胞层数较多，细胞变高，表层细胞呈倒置的梨形，核大呈圆形，深层细胞为不规则的多角形，基部为低柱状细胞，当观察舒张状态的膀胱切片时，可见细胞层数较少，表层细胞较扁，深层细胞为不规则的立方形。（二）腺上皮——小肠切片，H.E染色低倍镜观察，可见小肠内表面为单层柱状上皮。柱状上皮凹陷入肠壁，形成小肠腺，即单管状腺，管壁上皮细胞具分泌功能，即为腺上皮。转换高倍镜观察小肠内表面上皮，可见在柱状上皮细胞之间，夹有一些顶部宽大，下部狭细，呈杯状的细胞，此细胞被称为杯状细胞，此即为单细胞腺。三、思考题：1、上皮组织可分为哪几类？2、上皮组织有何一般特性？3、腺上皮与被覆上皮有何异同。四、绘图：1、单层扁平上皮结构2、单层柱状上皮结构实验二结缔组织一、目的要求：1、掌握结缔组织的结构特点。2、认识各种结缔组织的主要特点。二、实验内容及方法步骤：1、间充质——鸡胚标本，H.E染色可见有多突起的星状细胞，细胞突起互相连接成网，细胞分界不清，胞核较大，染色较浅，核仁明显。胞质少，呈嗜碱性。2、疏松结缔组织——经过活体注射染料的小家鼠的皮下疏松结地组织铺片，H.E染色低倍镜观察选择组织较薄、纤维分布均匀，细胞不重叠，轮廓较清晰的部分，转换高倍镜观察，根据细胞和核的形态特征、染色反应、胞质内的颗粒等区分为以下几种细胞：（1）成纤维细胞细胞数量最多，胞体大而多突起的扁平细胞，细胞质染色很浅，因此细胞轮廓不清。细胞核大并呈椭圆形，可见核仁一个或多个，胞体界限不清。（2）巨噬细胞细胞形状不一，近圆形或不规则形，具有很多的突起，胞质染色较深，轮廓明显。胞核小，染色较深，核内结构不清。（3）肥大细胞细胞常成堆的分布在血管的附近。细胞呈圆形或椭圆形，细胞质中充满大小一致的染成蓝紫色的颗粒。颗粒均匀分布在核周围。核小，呈圆形或椭圆形，染色浅，位于细胞的中央。（4）浆细胞细胞呈椭圆形，细胞核在细胞的一端，核内含有丰富的染色质，聚集在核的周围，向核中心呈辐射状排列。近核处有一着色浅而透明的区域，胞质嗜碱，染成蓝色。除上述细胞外，尚有以下纤维：（1）胶原纤维被伊红染成粉红色，呈带状，它由许多平行均细的原纤维组成，纤维粗细不等，有时呈波浪形。（2）弹性纤维被雷镀辛复红染成棕褐色,单条分布而不成束，纤维粗细不等，有分支，并交织成网。3、致密结缔组织（1）规则致密结缔组织——腱组织切片，H.E染色可见大量紧密平行排列的纤维成分和少量的细胞。纤维染成粉红色，为胶原纤维。（2）不规则致密结缔组织——皮肤切片，H.E染色低倍镜观察，可见皮肤的表面为复层扁平上皮，即表皮。表皮下可见大量排列不规则的胶原纤维束，纤维束粗大，染成粉红色。细胞成分较少，散在于纤维之间。4、网状组织——淋巴结镀银切片可见镀染成黑色的网状纤维，粗细不等，分支交织成网。网状细胞呈多角形与临近细胞的突起相连，突起顺延纤维的方向。5、脂肪组织——脂肪组织切片，H.E染色显微镜观察，因切片在染色过程中脂肪被酒精和二甲苯溶解，故脂肪细胞呈空泡状，呈椭圆形或多角形，胞质和胞核位于细胞的外周，呈一狭窄的指环形。三、思考题：1、比较上皮组织与疏松结缔组织的异同。2、联系机能比较疏松与致密结缔组织结构的异同。四、绘图：疏松结缔组织实验三软骨和骨一、目的要求：1、以透明软骨为主，了解软骨的基本构造。2、通过骨的构造了解其功能及营养转递。二、实验内容及方法步骤：1、软骨（1）透明软骨——肋软骨切片，H.E染色低倍镜观察，可见软骨外周有一条染成红色的结缔组织，此为软骨膜。转换高倍镜观察，软骨膜由致密结缔组织组成，软骨细胞形态不一，表层细胞为梭形，深部细胞逐渐变为椭圆形或圆形，细胞由2~4个成群组成，这些细胞称为同族细胞群。细胞周围染色深，称为软骨囊。细胞之间淡蓝色的均质组织为软骨基质，其中含有胶原纤维，因折光率与基质一致，故不明显。细胞存在的部位称为陷窝。（2）弹性软骨——狗耳廓火棉胶地衣红染色弹性软骨的结构基本上和透明软骨相似。注意：主要区别在于基质中含有被地衣红染色的弹性纤维，纤维形成网状结构，在软骨腔隙的周围较致密。软骨边缘的纤维直接与软骨膜中的弹性纤维相连。（3）纤维软骨——狗膝盖半月板，H.E染色注意：①基质中粉红色的胶原纤维成束平行排列。②软骨细胞成行的夹杂在纤维之间。2、骨组织也是由细胞、纤维和基质组成。由于骨组织本身排列的紧密与疏松可分为两种：骨松质和骨密质。骨密质——羊长骨横断磨片，美蓝染色先用低倍镜观察骨磨片。可见骨的外面和内面有平行于骨面的数层骨板。骨外面的称外环骨板，骨内面的称内环骨板。在内外环板之间，可见许多骨板以同心圆形式排成的哈弗氏系统。每个哈弗氏系统有粘合线与周围部分隔开。在圆形的哈弗氏系统之间还存在着一些骨板，彼此也互相平行排列，但不成同心圆，即间板，另外在圆形的哈弗氏系统中央的圆孔称哈弗氏管，与哈弗氏管相通或横过内外环骨板的管道称伏氏管。换高倍镜观察环绕着哈弗氏管的同心圆排列的环板，其上有许多蚂蚁形的空腔，称骨陷窝。骨陷窝又有无数的微细突起的小管称作骨小管。骨陷窝彼此靠骨小管相通。三、思考题：1、软骨基本结构与硬骨的主要区别。2、联系机能说明硬骨的结构特点。四、绘图：一部分透明软骨实验四血液一、目的要求：1、以人血为例，认识哺乳动物血液的基本有形成分。2、了解血涂片的制备方法。二、实验内容及方法步骤：1、制备血涂片，方法如下：（1）准备两张干净的载玻片（2）用70%的酒精消毒指腹（3）用消毒过的针刺破指腹或耳垂的皮肤，用载片的一端与血液接触，取另一张载片，斜置血滴左缘，角度以45°为宜，将沾有血液的载片向前推进，速度要一致，否则血膜形成波浪形，厚薄不均。（4）待干后，选较薄的均匀的血膜用蜡笔在它的四周划线，作为堤防。（5）滴入菜氏染液，盖满血膜即可，静放一分钟，然后，用等量的蒸馏水或缓冲液稀释染液，染2-3分钟，如液面浮现一层金黄色金属物质，表示染液起了染色作用，否则染色失败。（6）用蒸馏水冲去过剩的染料，血膜呈粉红色，晾干即可镜检。如要保留，可滴树胶封固。染色结果：红血球细胞质染粉红色，淋巴细胞质天兰色。细胞核兰紫色，嗜碱性颗粒兰紫色，嗜酸性颗粒粉红色，嗜中性颗粒细小淡紫色。2、人血涂片的观察先用高倍镜再用油镜观察，辨识血液中的三种有形成分——红细胞、白细胞和血小板（1）红细胞：小而圆、染粉红色的无核细胞。（2）白细胞：①粒细胞：细胞质中有特殊染色颗粒，根据颗粒对染料选择性的不同可分为：中性粒细胞：是白细胞中数量最多的，体积稍大于红细胞，细胞质染粉红色，胞质中充满细小的兰紫色的颗粒，核紫色，形状变化很大，常分叶，二叶到五叶之间。嗜酸性粒细胞：数量少，只占白细胞总数的2–4%，较中性大，胞质中充满红色的大小一致的粗大圆形颗粒。细胞核淡紫色，分成1-3叶，一般为两叶。嗜碱性粒细胞：数量极少，只占白细胞总数的1%以下，细胞质淡紫色，颗粒大小不一，染成紫色或深蓝色，分布不均，细胞核形状不定，圆形或分叶，染色浅。②淋巴细胞与单核细胞——是无颗粒的白细胞。正常血液中一般看不到大淋巴细胞，主要是小淋巴细胞和一定数量的中淋巴细胞。小淋巴细胞：稍大于红细胞，核大，细胞质极少只有一薄层，核的一侧有缺痕，核染深蓝色，胞质染成淡兰色，胞质内有时含有染成深红色的嗜天青颗粒。中淋巴细胞：二倍于红细胞，核圆形或卵圆形，染成深蓝色，细胞质较小淋巴细胞稍多。单核细胞：细胞体积较大，胞质较多，呈灰蓝色，有时含有细小的嗜天青颗粒，胞核圆形、肾形或马蹄形。（3）血小板：形状不规则的染淡蓝色的原生质小体。内有紫色颗粒聚集，经常成堆分布在红细胞之间。三、思考题1、血液中有哪些有形成分？2、如何区分三种白细胞？四、绘图人血的有形成分实验五肌肉组织一、目的要求：1、掌握肌肉组织的特点，并能区分三种不同的肌肉。2、了解肌肉组织与结缔组织的关系。二、实验内容及方法步骤：1、平滑肌——肠横切片，H.E染色肉眼观察小肠壁，可见肠壁外染成红色的部分为肌层，衬在小肠内面的紫红色的带状组织是粘膜，二者之间的粉红色部分是粘膜下层。低倍镜观察肌层，可见基层分为二层，内层为环形肌，外层为纵形肌。转换高倍镜观察纵形肌层的细胞，细胞的断面是大小不等的圆形，相互交织存在。观察外层的环形肌层，可见细胞呈长梭形，纵形平行排列，细胞的两端尖细，而中央部分粗大，有染成兰紫色的椭圆形的细胞核。2、骨骼肌——骨骼肌纵切片，铁矾苏木精染色先用中倍镜选择染色较均匀的部分进行观察，横纹肌纤维呈长圆柱形，具有明暗相间的横纹，肌纤维表面有肌膜，肌膜内有多个染为蓝黑色的卵圆形核，位于纤维的周围。用高倍镜观察肌原纤维及其横纹结构，每条肌原纤维都有明带和暗带，明带染色浅，暗带染色深。选择较清楚的部分在油镜下观察，在暗带中央区的透明线为H线，明带中央的暗线是Z线，Z线与Z线之间即所谓一个肌节。骨骼肌横切，铁矾苏木精染色在高倍镜下观察横切的肌纤维是圆形，卵圆形或多角形，细胞核靠近肌膜，每一肌纤维的外面都包有极薄的疏松结缔组织，称肌内膜，很多肌纤维又被肌束膜包围形成肌束。3、心肌——心脏切片，铁矾苏木精染色低倍镜观察，由于心肌纤维走向不同，因而在切片上可以看到各种不同的切面，选择典型的纵切面，置视野中央。转换高倍镜可见心肌纤维有分支，细胞核卵圆形，染成兰黑色，位于细胞的中央，肌纤维的横纹呈兰黑色，但不如骨骼肌明显，闰盘呈深兰黑色，较骨骼肌明显。三、思考题：1、骨骼肌纤维如何形成一块肌肉？2、联系机能说明肌肉组织有何共同特点？四、绘图：1、高倍镜下绘制骨骼肌的纤维结构。2、高倍镜下绘制心肌纤维的结构。实验六神经组织一、目的要求：1、掌握神经元的结构。2、识别神经胶质细胞。二、实验内容及方法步骤：1、神经元——脊髓切片，H.E切片肉眼观察组织呈椭圆形，左右对称，中央呈蝶形，染深红色，为脊髓的灰质。灰质周围部分染色浅，称为白质。低倍镜观察脊髓灰质，可见在灰质内有散在的染成紫红色、形态较大而有突起结构的细胞，即神经细胞。有些神经细胞内有圆形的细胞核，有的没有。选择一典型的神经细胞，置视野