2血液一般检验

第二章血液一般检验台州学院医学院检验系血液一般检验是指血液检验项目中最基础及最常用的检验，主要包括：手工或仪器血细胞计数及相关参数测定、血细胞形态学检查、止血凝血筛检试验、血型及交叉配血等。由于血液一般检验标本采集容易、检测便捷，目前仍然是筛检疾病的首要项目。第一节红细胞检查红细胞是血液中数量最多的有形成分，其主要功能是作为携氧或二氧化碳的呼吸载体和维持酸碱平衡等。可通过检测红细胞参数和形态变化对某些疾病进行诊断或鉴别诊断。一、红细胞计数常作为诊断贫血及红细胞增多的主要指标。【检测原理】1、显微镜法用等渗稀释液将血液稀释一定倍数（200倍），充入改良牛鲍血细胞计数板中，在显微镜下计数一定区域内的红细胞数量，经换算求出每升血液中的红细胞数量。2、血液分析仪法电阻抗法、流式细胞法【方法学评价】常用好【质量保证】误差来源：技术误差、仪器误差、分布误差【参考区间】成年：男性（4.0～5.5）×1012／L女性（3.5～5.0）×1012／L新生儿：（6.0～7.0）×1012／L医学决定水平：高于6.8×1012/L，应采取相应治疗措施；低于3.5×1012/L可诊断贫血；低于1.5×1012/L应考虑输血。【临床意义】1、生理性变化增多：新生儿、高原居民、剧烈运动等；成年男性高于女性；静脉压迫时间＞2min；毛细血管血高于静脉血测定；早7时最高。减少：生理性贫血，如：造血原料相对不足、造血功能减退、血容量增加等2、病理性变化增多：1）相对增多：血容量减少如：呕吐、高热、腹泻等2）绝对增多：继发性：组织缺氧，EPO代偿性增高如：严重慢性心肺疾病EPO非代偿性增高如：肝、肾的癌症原发性：如真性红细胞增多症减少：见于各种贫血，主要分为3类1）RBC生成减少骨髓功能衰竭，如再障；造血物质缺乏或利用障碍，如肾性贫血、缺铁性贫血、铁幼粒细胞性贫血、巨幼细胞性贫血2）RBC破坏过多①RBC内在缺陷：膜缺陷，如遗传性异常RBC增多症酶缺陷，如遗传性G-6-PD缺乏症（蚕豆病）血红蛋白异常，如珠蛋白生成障碍性贫血②红细胞外在异常：免疫反应引起的贫血，如新生儿溶血、血型不合输血后溶血等机械性损伤，如行军性血红蛋白尿疾病所致溶血，如疟疾、细菌等所致溶血性贫血3）红细胞丢失：急、慢性失血性贫血此外，某些药物也可引发贫血。二、血红蛋白测定缩写：Hb或HGB功能：输送氧、二氧化碳理化性质：含铁，0.347gFe≈100gHb相对分子量64458每克Hb可携带1.34ml氧由四条珠蛋白肽链（2条α链，2条β链）和四分子亚铁血红素组成的具有四级空间结构的四聚体，可结合4分子的氧。还原血红蛋白（Fe2+）--99%高铁血红蛋白（Hi）--1%氧合血红蛋白（HbO2）碳氧血红蛋白（HbCO，COHb）硫化血红蛋白（SHb）【检测原理】HiCN法：氰化高铁血红蛋白法在溶血标本中，Hb中的Fe2+被高铁氰化钾氧化为Fe3+，Hb转化为Hi。Hi与KCN中的氰离子反应生成HiCN，在540nm处的吸光度与溶液中的浓度呈正比，根据测得吸光度可求得Hb的浓度。WHO和ICSH推荐的参考方法。【方法学评价】【质量保证】1、标本2、器材及试剂3、技术操作4、废弃物【参考区间】成年：男性120～160g/L女性110～150g/L新生儿：170～200g/L【临床意义】基本等同于RBC，在判断贫血程度方面优于RBC。轻度贫血：Hb＜120g/L（女性Hb＜110g/L）；中度贫血：Hb＜90g/L；重度贫血：Hb＜60g/L；极重度贫血：Hb＜30g/L。当RBC＜1.5×1012/L，Hb＜45g/L时，应考虑输血。注意：1、某些贫血RBC和Hb减少程度不一致，应同时测定2、影响检验结果的因素三、红细胞形态检查【检测原理及方法学评价】【质量保证】【临床意义】1、正常红细胞形态双凹圆盘形，大小相对均一，平均直径7.2μm（6.7～7.7μm），瑞氏染色呈粉红色或琥珀色，血红蛋白充盈良好，呈正常色素性，向心性淡染，中央为生理性淡染区，约为细胞直径的1/3，胞质内无异常结构。注意：正常RBC可自然退化变性，即使高质量的正常人血涂片，也可见到变形或破碎的红细胞，但数量很少，分布局限。2、异常红细胞形态在排除人为因素后，若血涂片中出现异常形态红细胞且数量较多，往往提示病理性改变。常见的异常形态可分为红细胞大小、形态、血红蛋白含量、结构和排列异常。小红细胞淡染区消失的小红细胞（球形红细胞）红细胞大小不均巨红细胞球形红细胞Hb按结构分类：血红蛋白A(HbA)，α2β2，占成人Hb的98％；血红蛋白A2(HbA2)，α2δ2，占成人Hb的2％；血红蛋白F(HbF)，α2γ2，仅存在于胎儿血中；血红蛋白H(HbH)，β4，血红蛋白H病；血红蛋白C(HbC)，β链中Glu被Lys取代；血红蛋白S(HbS)，β链中Glu被Val取代，镰形红细胞血红蛋白。假性椭圆形红细胞椭圆形红细胞靶形红细胞口形红细胞镰形红细胞棘红细胞锯齿状红细胞泪滴形红细胞红细胞形态不整正常、低、高色素性红细胞嗜多色性红细胞豪-焦小体（Howell-JollyBody）染色质小体卡波环（Cabotring）嗜碱性点彩红细胞有核红细胞缗钱状红细胞四、血细胞比容测定血细胞比容：（Hct、HCT；旧称红细胞压积，PCV）是指一定体积的全血中红细胞所占体积的相对比例。影响HCT的因素：红细胞数量、平均体积、血浆量。HCT的用途：贫血、真性红细胞增多症和红细胞增多的诊断；血液稀释和血液浓缩变化的测定、红细胞平均体积和红细胞平均血红蛋白浓度的计算等。【检测原理】直接测定：离心法微量法、温氏法间接测定：血液分析仪法HCT=RBC×红细胞平均体积【方法学评价】微量法：WHO推荐的常规方法CLSI推荐的参考方法血液分析仪法：目前的常用方法【质量保证】1、操作规范化2、注意干扰因素【参考区间】男性：0.40～0.50女性：0.37～0.48【临床意义】与红细胞计数相似，HCT降低是贫血诊断的指标。表2-19。主要应用价值：1、临床补液量的参考2、真性红细胞增多症诊断指标3、红细胞平均指数计算的基础数据五、红细胞平均指数包括：红细胞平均体积（MCV）红细胞平均血红蛋白量（MCH）平均红细胞血红蛋白浓度（MCHC）应用：红细胞平均指数有助于深入认识红细胞特征，为贫血的鉴别诊断提供线索。【检测原理】1、手工法：根据RBC、Hb、Hct测定结果计算而来。2、血液分析仪法：MCV：仪器直接测定MCH：Hb/RBCMCHC：Hb/（RBC×MCV）【方法学评价】手工法红细胞平均指数由RBC、HGB、HCT测定后计算而来，因此，必须采用同一抗凝血标本，且所检测的结果必须准确。仪器法红细胞平均指数的测定同样依赖于RBC、HGB和MCV测定的准确性。【参考区间】注意成年人【临床意义】有助于贫血形态学分类及提示贫血的可能原因。六、网织红细胞计数▲网织红细胞（Ret，RET）：介于晚幼红细胞和成熟红细胞之间的过渡阶段细胞，略大于成熟红细胞，胞质中残存有嗜碱性物质RNA，经碱性染料活体染色后，呈现蓝色或紫色的点粒状或丝网状结构，故名网织红细胞。网织红细胞自骨髓释放到外周血后仍具有合成血红蛋白的能力，约1-2天后，过渡为成熟红细胞（新鲜标本检测）。RBC的生成网织红细胞检测的目的：①鉴别贫血的类型（增生性、非增生性、增生增高性）。②检查骨髓的功能。③检测贫血的治疗效果。④评估骨髓移植后、再生障碍性贫血细胞毒药物诱导治疗后或EPO治疗后的红细胞造血情况。【检测原理】1、普通显微镜法：活体染料（新亚甲蓝或煌焦油蓝）的碱性着色基团（+）可与Ret中RNA的磷酸基（-）结合，形成蓝色的点状、线状或网状结构。2、仪器法：流式细胞仪、Ret计数仪、血液分析仪等【方法学评价】【质量保证】以手工计数法为重点。1、染料选择2、正确辨认Ret：具2个及以上网织颗粒,且颗粒必须远离细胞边缘的红细胞。3、Ret计数方法：Miller窥盘计数法显微成像系统：HFR，MFR，LFR？【参考区间】Ret%：成人和儿童：0.5%～1.5%新生儿：2.0%～6.0%Ret绝对值：成人：（24～84）×109/L【临床意义】反映骨髓造血功能的重要指标。1、评价骨髓增生能力，判断贫血类型1）Ret增多：造血功能旺盛，见于各种增生性贫血，溶贫尤为显著2）Ret减少：无效红细胞造血的指征，见于非增生性贫血、慢性病性贫血（再障）。3）贫血鉴别：2、评价疗效1）观察贫血疗效：随访项目之一2）骨髓移植后的监测：3、放、化疗的监测可指导临床适时调整治疗方案，避免造成严重的骨髓抑制。4、药物影响七、嗜碱性点彩红细胞计数【检测原理】【参考区间】＜0.03%【临床意义】升高主要见于重金属（铅、汞等）、硝基苯、苯胺中毒；溶血性贫血、巨幼细胞性贫血、白血病、恶性肿瘤也可见升高八、红细胞沉降率测定红细胞沉降率（ESR）简称血沉：指在规定条件下，离体抗凝全血中的红细胞自然下沉的速率。【检测原理】1、魏氏（Westergren）法：2、自动血沉仪法：【方法学评价】魏氏法：传统方法，国内的规范方法自动血沉仪法：快【参考区间】男性0-15mm/h女性0-20mm/h【临床意义】常规的筛查试验，缺乏特异性，主要用于观察病情的动态变化、区别功能性与器质性病变、鉴别良性与恶性肿瘤等。1、生理性：新生儿较慢；女性高于男性；经期、妊娠增快；50岁后增快。2、病理性增快：组织损伤如严重创伤、术后、心梗；恶性肿瘤；炎症疾病如风湿病、结核病的活动期；自身免疫病如SLE、类风关；高球蛋白血症如MM、巨球蛋白血症、肝硬化等；高胆固醇血症如动脉粥样硬化、DM等。3、病理性减慢：真性红细胞增多症、RBC形态异常等第二节白细胞检查白细胞分类白细胞（LEU）粒细胞(GRAN)淋巴细胞(L)单核细胞(M)中性分叶核粒细胞(Nsg)中性杆状核粒细胞(Nst)嗜酸性粒细胞(E)嗜碱性粒细胞(B)N粒细胞增殖动力学各阶段52143分裂池成熟池、贮存池循环池（50%）边缘池（50%）组织固有池1/20什么情况下要进行白细胞检查？一、白细胞计数定义：指测定单位容积的外周血中各种白细胞的总数。【检测原理】显微镜计数法血液分析仪法【临床意义】WBC高于10×109/L称为白细胞增多；WBC低于4×109/L称为白细胞减少；低于2.5×109/L肯定异常。二、白细胞分类计数白细胞分类计数（DLC）：在显微镜下观察染色后的血涂片上白细胞的形态，并进行分类计数，求得各种白细胞的比值（百分率）和绝对值。DLC的目的：1、观察白细胞增多症、减少症，感染、中毒、恶性肿瘤、白血病和其他血液系统疾病的白细胞变化情况。2、同时评估红细胞和血小板形态。【检测原理】显微镜分类计数法和血液分析仪法。显微镜分类计数法：制备血涂片，经Wright染色后，在油镜下根据白细胞形态特点逐个分类计数（100-200个），同时观察其形态的变化，然后求得各种白细胞的比值（百分率）。再根据WBC计数结果计算各种白细胞的绝对值。绝对值＝WBC数×该白细胞的百分率【方法学评价】【质量保证】【参考区间】【临床意义】1、白细胞总数与中性粒细胞（N）：（1）生理性变化：暂时性，波动大包括年龄，日间，运动、疼痛和情绪，妊娠、分娩，吸烟等。（2）中性粒细胞增多：反应性增多：急性感染及炎症最为常见。多为成熟的Nsg或较成熟的Nst异常增生性增多：主要为病理性或未成熟粒细胞。常见于白血病（急粒、慢粒）、骨髓增殖性疾病（MPD）。（3）中性粒细胞减少：机制：1）增殖和成熟障碍；2）消耗或破坏过多；3）分布异常。常见于：某些感染（病毒）、血液病（再障）、脾功能亢进、理化损伤、自身免疫性疾病等2、嗜碱性粒细胞（B）（1）增多：过敏性和炎症性疾病；嗜碱性粒细胞白血病（少见类型）；骨髓增殖性疾病（慢粒）；内分泌疾病（DM）；其他。（2）减少：多无临床诊断意义。3、淋巴细胞（L）绝对值的变化：（1）增多：感染性疾病（急性细菌感染恢复期、病毒所致急性传染病、慢性感染），淋巴细胞性白血病（急淋、慢淋），移植排斥前期，某些血液病，药物。（2）减少：凡