531-附16-5-4方法学验证报告

5.3.1附件16-e方法学验证报告1.标题报告编号报告版本号报告日期方法学验证开始日期方法学验证结束日期申请人名称地址联系方式目录1.0标题2.0质量声明3.0试验参与人员4.0质控声明5.0方法学验证概述6.0方法验证总结7.0标准曲线和质控的制备8.0其他方法学验证内容9.0特殊情况10.0数据计算11.0未依照方案进行试验的情况12.0版本信息13.0结论14.0缩略语表15.0表格2.0质量声明-依照相关标准操作规程操作-质控工作情况相关人员签字姓名（打印）职责签名（手写）签署日期负责人分析人员监察员分析单位名称：地址：联系方式：3.0试验参与人员姓名职责学历4.0质控声明-声明质控工作情况质控人员姓名签字签署日期5.0方法学验证概述-简要说明分析方法、方法学验证方案、原始数据和资料的保存情况6.0方法验证总结6.1检测方法总结：试验涉及的SOP（标准化操作规程）（名称，版本号）方法学验证方案编号分析方法设备名称制造商型号（液相）（离子源）（检测器）分析软件离子化方式扫描方式色谱柱种类流动相流速样品的生物基质抗凝剂生物基质来源样本提取方法进样量内标化合物名称定量指标（例如：峰面积比）回归方程（线性/曲线拟合，方程表达式）权重系数线性范围最低定量限（LLOQ）最低质控浓度（LLOQQC）（若有）低质控浓度（LOQQC）中质控浓度（MOQQC）高质控浓度（HOQQC）超高质控浓度（ULOQQC）（若有）以下参数的接受标准详见表1：系统适用性（表3）：待测物保留时间、内标保留时间、面积比的变异系数。系统参数（表4）：信噪比待测物残留（carryover）内标残留（carryover）批量检测时的残留（表5）：待测物残留（carryover）内标残留（carryover）6.2检测指标准确度和精密度（表12）精密度最大值（%CV）准确度（与理论浓度的偏差）（%）批内准确度和精密度（除LLOQQC以外的所有浓度质控）批内准确度和精密度（LLOQQC）批间准确度和精密度（除LLOQQC以外的所有浓度质控）批间准确度和精密度（LLOQQC）稀释倍数（表17）回收率（表13、14）精密度（%CV）提取的样品高浓度中浓度低浓度待测物回收率均值%待测物回收率的变异系数%CV内标回收率均值%内标回收率的变异系数%CV6.3选择性选择性（表7）（不同来源基质的选择性评价结果）基质效应（表8）（不同来源基质的基质效应评价结果）基质效应因子（表9）平均内标标准化基质效应因子内标标准化基质效应因子的总体精密度%内标标准化基质效应因子的精密度变异系数（%CV）的最大值伴随药物选择性（表15）伴随用药试验（表16）（药物名称和峰浓度）6.4耐用性（表18）试验精密度最大值（%CV）准确度偏差均值%不同色谱柱（高、中、低浓度）不同色谱柱（LLOQ）不同分析人员（高、中、低浓度）不同分析人员（LLOQ）不同设备（高、中、低浓度）不同设备（LLOQ）6.5稳定性冻融稳定性（表23）（基质、储存条件、稳定时间）室温稳定性（表24）（基质、储存条件、稳定时间）自动进样器进样重复性（表25）（溶剂、储存条件、稳定时间）待测物储备液短期稳定性（表19）（溶剂、储存条件、稳定时间）待测物工作液短期稳定性（ULOQ）（表20）（溶剂、储存条件、稳定时间）待测物工作液短期稳定性（LLOQ）（表20）（溶剂、储存条件、稳定时间）内标储备液短期稳定性（表19）（溶剂、储存条件、稳定时间）内标工作液短期稳定性（表20）（溶剂、储存条件、稳定时间）待测物储备液长期稳定性（表21）（溶剂、储存条件、稳定时间）待测物工作液长期稳定性（ULOQ）（表22）（溶剂、储存条件、稳定时间）待测物工作液长期稳定性（LLOQ）（表22）（溶剂、储存条件、稳定时间）内标储备液长期稳定性（表21）（溶剂、储存条件、稳定时间）内标工作液长期稳定性（表22）（溶剂、储存条件、稳定时间）冷冻前生物基质中待测物稳定性（表26）（样品分离并储存前待测物的稳定性）生物基质中待测物的长期稳定性（基质、储存条件、稳定时间）6.6对照品详情项目原药/代谢产物内标名称级别（国家/省/企业）（国家/省/企业）生产商批号纯度/含量有效期是否附有质报告注：每个待测物及其内标的上述信息应单独列表7.0标准曲线和质控的制备7.1标准曲线-说明标准曲线的称量、配制过程标准曲线浓度点：（列出各浓度点的浓度值及其浓度单位）7.2质控样品-说明标准曲线的称量、配制过程配制日期日期时间试验内容保存温度室温稳定性冻融稳定性生物基质中的长期稳定性质控样品浓度：（列出各浓度点的浓度值及其浓度单位）8.0其他方法学验证内容8.1请叙述详情（若有）9.0特殊情况9.1请叙述详情（若有）10.0数据计算10.1说明色谱图采集、浓度计算方法等情况。10.2说明浓度单位、小数点保留方法等。10.3说明数据转移、计算过程，及其使用的软件10.4说明表格中数据的计算方法（尤其有多种表示方法的数据）11.0未依照方案进行试验的情况-说明是否有未依照方案进行试验的情况。12.0版本信息-说明版本更新时间和更新内容13.0结论-简要说明方法学验证的结论14.0缩略语表英文缩写英文全称中文含义LLOQLowerlimitofquantification标准曲线最低定量浓度ULOQupperlimitofquantification标准曲线最高定量浓度……15.0表格表1可接受标准项目可接受标准系统适用性系统参数（信噪比）自动进样器样品残留待测物和内标检测的残留效应接受标准选择性：生物基质的筛选选择性基质效应基质效应因子存在合并用药时检测方法的特异性合用药物试验线性批内精密度批间精密度批内准确度批间准确度待测物和内标的回收率稀释验证试验耐用性，自动进样器进样重复性待测物和内标储备液短期稳定性待测物和内标储备液长期稳定性冷冻前生物基质中待测物稳定性（样品分离并储存前待测物稳定性的接受标准）冻融、室温稳定性生物基质中长期稳定性未知样品检测批次的质控表2批量样品检测Watson-lims的批运行工作（若有）检测批次序列号检测内容检测日期是否合格检测设备的批量样品检测列表检测批次编号检测内容检测日期是否合格表3系统适用性检测批次编号%CV检测设备待测物保留时间内标保留时间面积比表4系统参数检测批次编号信噪比残留%检测设备待测物内标表5批量样品检测过程的残留序号检测批次名称空白样品中待测物残留的面积空白样品中内标残留的面积LLOQ-1检测面积LLOQ-2检测面积内标平均面积药品残留百分比%内标残留百分比%检测设备表6自动进样器残留试验结果（注明检测设备名称）检测批次编号：日期：样品名称峰面积药品内标未提取样品RSAQULOQRSAQLLOQ%残留率已提取样品STDBLULOQSTDBLLLOQ%残留率表7生物基质的选择性检测批次编号：日期：序号基质的批号药物响应值内标响应值STDBLLLOQ干扰%STDBLLLOQ干扰%面积保留时间面积保留时间序号基质的批号药物响应值内标响应值STDBL水相LLOQ干扰%水相LLOQ干扰%面积保留时间面积保留时间表8基质效应Watson数据血药浓度样品编号Rep.理论浓度实测浓度准确度%平均浓度平均准确度%%CV表9基质效应试验检测批次编号：日期：HQCMQCLQC水相面积比率#水相面积比率水相面积比率123456平均值SD%CV检测批次编号：日期：生物基质批号HQCMQCLQC生物基质面积比#平均面积比内标归一化基质效应因子*生物基质面积比率平均面积比内标归一化基质效应因子*生物基质面积比率平均面积比内标归一化基质效应因子*均值均值均值SDSDSD%CV%CV%CV总计均值SD%CV#面积比计算方法：待测物面积/内标面积*归一化基质效应因子计算方法：生物基质面积比/水相面积比表10标准曲线参数检测日期批次编号斜率截距R2LLOQULOQ拟合方程平均SD%CVn表11标准曲线的计算浓度检测日期检测批次编号STD8（浓度）准确度偏差%STD7（浓度）准确度偏差%STD6（浓度）准确度偏差%STD5（浓度）准确度偏差%STD4（浓度）准确度偏差%STD3（浓度）准确度偏差%STD2（浓度）准确度偏差%STD1（浓度）准确度偏差%平均值SD%CV准确度偏差%n表12批间批内样品检测的精密度和准确度检测时间运行编号LLOQQC准确度偏差%LOQ准确度偏差%MQC准确度偏差%HQC准确度偏差%批内均值批内SD批内%CV批内准确度偏差%n批内均值批内SD批内%CV批内准确度偏差%n批内均值批内SD批内%CV批内准确度偏差%n平均实测浓度批间SD批间%CV批间准确度偏差%n表13待测物回收率检测批次编号：日期HQCMQCLQC提取后峰面积未提取的峰面积提取后峰面积未提取的峰面积提取后峰面积未提取的峰面积12345峰面积平均值SD%CV平均回收率%总体回收率%总体变异%CV计算公式：表14内标回收率检测批次编号：日期浓度提取后内标峰面积未提取内标峰面积12345峰面积平均值SD%CV平均回收率%计算公式：表15有合并用药时待测物检测的选择性伴随药物名称：检测批次编号：日期：序号基质批号待测物通道响应值内标通道响应值空白基质LLOQ干扰%空白基质LLOQ干扰%面积保留时间面积保留时间123456表16合并用药试验检测时间检测批次编号CDELQC(药物1名称，浓度)准确度偏差%CDELQC(药物2名称，浓度)准确度偏差%CDELQC(药物3名称，浓度)准确度偏差%LQC准确度偏差%MQC准确度偏差%CDEHQC(药1)准确度偏差%平均值SD%CV准确度%准确度偏差%n表17稀释验证检测时间检测批次编号LQC（浓度）准确度偏差%MQC（浓度）准确度偏差%HQC（浓度）准确度偏差%DQC(1/10)（浓度）准确度偏差%DQC(1/2)（浓度）准确度偏差%平均值SD%CV准确度%准确度偏差%n表18耐用性检测时间检测批次编号LLOQ准确度偏差%LOQ准确度偏差%MQC准确度偏差%HQC准确度偏差%批内均值批内SD批内%CV批内准确度偏差%n批内均值批内SD批内%CV批内准确度偏差%n批内均值批内SD批内%CV批内准确度偏差%n平均实测浓度批间SD批间%CV批间准确度偏差%n表19短期保存稳定性检测批次编号：日期：待测物内标储存条件：储存条件：理论浓度（单位）理论浓度（单位）检测峰面积比检测峰面积比对照样品稳定性考察样品对照样品稳定性考察样品123456平均值SD%CV平均稳定性%检测峰面积比定义：对照样品来源：表20工作液短期稳定性（ULOQ,LLOQ和内标工作液稳定性）检测批次编号：日期ULOQLLOQ内标储存条件：储存条件：储存条件：理论浓度（单位）理论浓度（单位）理论浓度（单位）检测峰面积比检测峰面积比检测峰面积比对照样品稳定性考察样品对照样品稳定性考察样品对照样品稳定性考察样品123456平均值SD%CV平均稳定性%表21长期保存稳定性检测批次编号：日期待测物内标储存条件：储存条件：理论浓度（单位）理论浓度（单位）检测峰面积比检测峰面积比对照样品稳定性考察样品对照样品稳定性考察样品123456平均值SD%CV平均稳定性%表22药物工作液长期稳定性（ULOQ,LLOQ和内标工作液稳定性）检测批次编号：日期ULOQLLOQ内标储存条件：储存条件：储存条件：理论浓度（单位）理论浓度（单位）理论浓度（单位）检测峰面积比检测峰面积比检测峰面积比对照样品稳定性考察样品对照样品稳定性考察样品对照样品稳定性考察样品123456平均值SD%CV平均稳定性%表23冻融稳定性（说明储存条件）检测时间检测批次编号LLQC（浓度）准确度偏差%LQC（浓度）准确度偏差%MQC（浓度）准确度偏差%HQC（浓度）准确度偏差%平均值SD%CV准确度%准确度偏差%n表24室温稳定性室温稳定性（储存条件及试验结果）检测时间检测批次编号LLQC（浓度）准确度偏差%LQC（浓度）准确度偏差%MQC（浓度）准确度偏差%HQC（浓度）准确度偏差%平均值SD%CV准确度%准确度偏差%n表2