6年天津生物高考基因工程

第1页共4页天津6年高考----基因工程（2010天津）7.Ⅰ.（14分）下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因，ampR表示氨苄青霉素抗性金银，BamHI、HindIII、SmaI直线所示为三种限制酶的酶切位点。据图回答：（1）图中将人乳蛋白基因插入载体，需用限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含的培养基上进行。（2）能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是（填字母代号）。A.启动子B.tetRC.复制原点D.ampR（3）过程①可采用的操作方法是（填字母代号）。A.农杆菌转化B.大肠杆菌转化C.显微注射D.细胞融合（4）过程②可采用的生物技术是。（5）对早期胚胎进行切割，经过程②可获得多个新个体。这利用了细胞的性。（6）为检测人乳铁蛋白是否成功表达，可采用（填字母代号）技术。A.核酸分子杂交B.基因序列分析C.抗原—抗体杂交D.PCR（2011•天津）某致病基因h位于X染色体上，该基因和正常基因H中的某一特定序列BclI酶切后，可产生大小不同的片段（如图1，bp表示碱基对），据此可进行基因诊断．图2为某家庭病的遗传系谱．下列叙述错误的是（）A．h基因特定序列中Bcl1酶切位点的小事是碱基序列改变的结果B．Ⅱ-1的基因诊断中只出现142bp片段，其致病基因来自母亲C．Ⅱ-2的基因诊断中出现142bp，99bp和43bp三个片段，其基因型为XHXhD．Ⅱ-3的丈夫表现型正常，其儿子的基因诊断中出现142bp片段的概率为1/2（2012天津）7.（13分）生物分子间的特异性结合的性质广泛用于生命科学研究。以下实例为体外处理“蛋白质-DNA复合体”获得DNA片段信息的过程图。据图回答：（1）过程①酶作用的部位是键，此过程只发生在非结合区DNA，过程②酶作用的部位是键。（2）①、②两过程利用了酶的特性。（3）若将得到的DNA片段用于构建重组质粒，需要过程③的测序结果与酶的识别序列进行对比，已确定选用何种酶。（4）如果复合体中的蛋白质为RNA聚合酶，则其识别、结合DNA序列位基因的。（5）以下研究利用了生物分子间的特异性结合的有（多选）A.分离得到核糖体，用蛋白酶酶解后提rRNA第2页共4页B.用无水乙醇处理菠菜叶片，提取叶绿体基粒膜上的光合色素C．通过分子杂交手段，用荧光物质标记的目的基因进行染色体定位D．将抑制成熟基因导入番茄，其mRNA与催化成熟酶基因的mRNA互补结合，终止后者翻译，延迟果实成熟。（2013天津）9.（15分）花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化，并丧失再生能力。再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合，以获得抗黑腐病杂种植株。流程如下图。据图回答下列问题：（1）过程①所需的酶是。（2）过程②后，在显微镜下观察融合的活细胞中有供体的存在，这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。（3）原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其作用是。原生质体经过再生，进而分裂和脱分化形成愈伤组织。（4）若分析再生植株的染色体变异类型，应剪取再生植株和植株的根尖，通过、、染色和制片等过程制成装片，然后在显微镜下观察比较染色体的形态和数目。（5）采用特异性引物对花椰菜和黑芥基因组DNA进行PCR扩增，得到两亲本的差异性条带，可用于杂种植株的鉴定。下图是用该引物对双亲及再生植株1—4进行PCR扩增的结果。据图判断，再生植株1—4中一定是杂种植株的有。（6）对杂种植株进行接种实验，可筛选出具有高抗性的杂种植株。（2014天津）8.（12分）嗜热土壤芽胞杆菌产生的β-葡萄糖苷酶（BglB）是一种耐热纤维素酶，为使其在工业生产中更好地应用，开展了以下试验：Ⅰ.利用大肠杆菌表达BglB酶（1）PCR扩增bglB基因时，选用基因组DNA作模板。（2）右图为质粒限制酶酶切图谱。bglB基因不含图中限制酶识别序列。为使PCR扩增的bglB基因重组进该质粒，扩增的bglB基因两端需分别引入和不同限制酶的识别序列。（3）大肠杆菌不能降解纤维素，但转入上述建构好的表达载体后则获得了降解纤维素的能力，这是因为。Ⅱ.温度对BglB酶活性的影响（4）据图1、2可知，80℃保温30分钟后，BglB酶会；为高效利用BglB酶降解纤维素，反应温度最好控制在（单选）。A.50℃B.60℃C.70℃D.80℃第3页共4页Ⅲ.利用分子育种技术提高BglB酶的热稳定性在PCR扩增bglB基因的过程中，加入诱变剂可提高bglB基因的突变率。经过筛选，可获得能表达出热稳定性高的BglB酶的基因。（5）与用诱变剂直接处理嗜热土壤芽胞杆菌相比，上述育种技术获得热稳定性高的BglB酶基因的效率更高，其原因是在PCR过程中（多选）。A.仅针对bglB基因进行诱变B.bglB基因产生了定向突变C.bglB基因可快速累积突变D.bglB基因突变不会导致酶的氨基酸数目改变（2015天津）8.纤维素分子不能进入酵母细胞，为了使酵母菌能够利用环境中的纤维素为原料生产酒精，构建了含3种不同基因片段的重组质粒，下面是酵母菌转化及纤维素酶在工程菌内合成与运输的示意图。据图回答：（1）本研究构建重组质粒时看选用四种限制酶，其识别序列如下图，为防止酶切片段的自身环接，可选用的限制酶组合是______或__________(2)设置菌株Ⅰ为对照，是为了验证__________不携带纤维素酶基因。(3)纤维素酶基因的表达包括__________和__________过程，与菌株Ⅱ相比，在菌株Ⅲ、Ⅳ中参与纤维素酶合成和分泌的细胞器还有______________________________。（4）在以纤维素为唯一C源的培养基上分别培养菌株Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ，菌株___________不能存活，原因是_________________________________。(5)酵母菌生产酒精的细胞部位是___________，产生酒精时细胞的呼吸方式是___________，在利用纤维素生产酒精时，菌株Ⅳ更具有优势，因为导入的中重组质粒含有____________。使分泌的纤维素酶固定于细胞壁，减少因培养液更新二造成的酶的流失，提高酶的利用率。第4页共4页答案（2010天津）7.Ⅰ.（14分）（1）HindⅢ和BamHⅠ氨苄青霉素（2）A（3）C（4）胚胎移植技术（5）全能（6）C（2011天津）D（2012天津）7.（1）磷酸二酯键肽键（2）专一性（3）限制酶（4）启动子（5）ACD（2013天津）【答案】（1）纤维素酶和果胶酶（2）叶绿体（3）保持原生质体完整性细胞壁（4）双亲（或花椰菜和黑芥）解离漂洗（5）1、2、4（6）黑腐病菌（2014天津）【答案】（1）嗜热土壤芽孢杆菌（2）NdeⅠBamHⅠ（3）转基因的大肠杆菌分泌出有活性的BglB酶（4）失活B（5）A、C（2015天津）答案：（1）B(或C)C(或B)(2)质粒DNA和酵母菌基因组（3）转录翻译内质网、高尔基体（4）II缺少信号肽编码序列，合成的纤维素酶不能分泌到胞外，细胞无可利用的碳源（5）细胞质基质无氧呼吸A基因片段