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1考点47动物细胞工程1.[2014·浙江高考]下列关于动物细胞培养的叙述,正确的是()A.连续细胞系的细胞大多具有二倍体核型B.某些癌细胞在合适条件下能逆转为正常细胞C.由多个祖细胞培养形成的细胞群为一个克隆D.未经克隆化培养的细胞系细胞具有相同的性状解析:连续细胞系的细胞其核型已发生改变;一个祖细胞培养形成的细胞群才为一个克隆;未经克隆化培养的细胞系细胞可能是不同细胞分裂形成的,其性状可能不同。答案:B2.实验小鼠皮肤细胞培养(非克隆培养)的基本过程如图所示。下列叙述错误的是()实验小鼠――→甲皮肤组织――→乙皮肤细胞――→丙细胞培养1――→丁细胞培养2A.甲过程需要对实验小鼠进行消毒B.乙过程对皮肤组织可用胰蛋白酶消化C.丙过程得到的细胞大多具有异倍体核型D.丁过程得到的细胞具有异质性解析:A进行细胞培养前需要对细胞进行消毒,A正确;B进行培养的组织细胞用胰蛋白酶消化分散成单个细胞,B正确;C丙过程属于原代培养,细胞的核型稳定,C错误;D丁过程属于传代培养,期间部分细胞会出现异质性,D正确;答案:C3.如图是单克隆抗体制备流程的简明示意图。下列有关叙述,正确的是()A.①是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应T淋巴细胞B.②中使用胰蛋白酶有利于杂交瘤细胞的形成C.③同时具有脾脏细胞和鼠骨髓瘤细胞的特性D.④是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞群解析:①是获得已经免疫的B细胞,A项错误;胰蛋白酶使得组织块分散为单个细胞,B项错误;③同时具有B淋巴细胞和骨髓瘤细胞的特性,C项错误;④经筛选后获得能够分泌特异性抗体的杂交瘤细胞,D项正确。答案:D5.[2013·海南高考]单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-Ⅰ)可引起水疱性口唇炎。利用杂交瘤技术制备出抗HSV-Ⅰ的单克隆抗体可快速检测HSV-Ⅰ。回答下列问题:(1)在制备抗HSV-Ⅰ的单克隆抗体的过程中,先给小鼠注射一种纯化的HSV-Ⅰ蛋白,一段时间后,若小鼠血清中抗HSV-Ⅰ的抗体检测呈阳性,说明小鼠体内产生了________反应,再从小鼠的________中获取B淋巴细胞。将该B淋巴细胞与小鼠的________细胞融合,再经过筛选、检测,最终可获得所需的杂交瘤细胞,该细胞具有的特点是__________。(2)若要大量制备抗该蛋白的单克隆抗体,可将该杂交瘤细胞注射到小鼠的________中使其增殖,再从________中提取、纯化获得。(3)通过上述方法得到的单克隆抗体可准确地识别这种HSV-Ⅰ蛋白,其原因是该抗体具有________和________等特性。解析:(1)由题意可知,单纯疱疹病毒Ⅰ型可引起水泡性口唇炎,病毒蛋白HSV-Ⅰ可以作为一种抗原刺激机体通过免疫反应产生特异性抗体。在单克隆抗体的制备过程中,首先应注射纯化的HSV-Ⅰ蛋白作为抗原,一段时间后对小鼠血清进行检测,如果抗HSV-Ⅰ蛋白的抗体检测为阳性,说明小鼠体内通过体液免疫产生了特异性抗体。此时可以从小鼠的免疫器官中,如脾脏、骨髓、淋巴结等部位获取已免疫的B淋巴细胞,与小鼠的骨髓瘤细胞融合,经过筛选检测获得能稳定的产生特异性抗体的杂交瘤细胞。已免疫的B淋巴细胞具有产2生特异性抗体的特点,而骨髓瘤细胞能无限增殖,因此获得的杂交瘤细胞具有既能无限增殖又能产生特异性抗体(抗HSV-Ⅰ蛋白的抗体)的特点。(2)获得大量单克隆抗体的途径有两种:体外培养和体内培养。体外培养即通过动物细胞培养技术获得大量的杂交瘤细胞,进而产生大量的单克隆抗体;体内培养即将杂交瘤细胞注射到小鼠的腹腔中增殖,最后从小鼠的腹水中提取、纯化单克隆抗体。(3)单克隆抗体是通过细胞融合技术将单一的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合而获得的,因此融合后的细胞只能产生一种特异性抗体,所制备的单克隆抗体具有特异性强,灵敏度高的特点。答案:(1)免疫免疫器官骨髓瘤既能无限增殖又能产生特异性抗体(2)腹腔腹水(3)特异性强灵敏度高1.与植物体细胞杂交相比,动物细胞融合的原理及其特有的诱导因子分别是()A.细胞膜的流动性、离心B.细胞膜的流动性、灭活的病毒C.细胞的全能性、电激D.细胞的全能性、灭活的病毒解析:植物体细胞杂交的原理是细胞膜的流动性、细胞的全能性,动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性;动物细胞融合常用的诱导因子有聚乙二醇、灭活的病毒、电激等,其中灭活的病毒是其特有的诱导因子,而聚乙二醇、电激均可用于诱导植物体细胞杂交。答案:B2.[2015·浙江嘉兴测试]下列有关动物细胞培养的叙述,错误的是()A.恶性肿瘤细胞系具有不死性和失去接触抑制等特性B.利用液体培养基和CO2培养箱,模拟动物体的内环境C.因细胞具有相互依存关系,细胞克隆需滋养层细胞支持生长D.细胞株没有差异性,在连续传代过程中遗传性状始终保持稳定解析:动物细胞的培养过程,是细胞有丝分裂的过程,在分裂过程中,由于基因突变或染色体变异会造成遗传物质的改变。答案:D3.[2015·洛阳统考]下列有关生物细胞工程的叙述正确的是()A.动物细胞工程技术中,胚胎移植、胚胎分割、核移植和动物细胞培养均可获得动物个体B.用于治疗癌症的“生物导弹”就是以单克隆抗体作为抗癌药物定向杀死癌细胞C.动物细胞培养中出现的癌变发生于传代培养过程中D.动物细胞融合与植物体细胞杂交相比,依据的原理、诱导融合的方法都相同,且获得的融合细胞都具有双亲的遗传特性解析:胚胎移植和胚胎分割属于胚胎工程,动物细胞培养不能获得动物个体;“生物导弹”中的单克隆抗体不是抗癌药物,它可携带抗癌药物定向杀死癌细胞;动物细胞融合与植物体细胞杂交相比,二者诱导融合的方法不完全相同,动物细胞融合可借助灭活的病毒,植物体细胞杂交则不能。答案:C4.对某种动物的肝肿瘤细胞进行动物细胞培养。下列说法不正确的是()A.在利用肝肿瘤组织块制备细胞悬液时,可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理B.细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行,CO2的作用是刺激细胞呼吸C.为了防止细胞培养过程中细菌的污染,可向培养液中加入适量的抗生素D.在合成培养基中,通常需加入血清、血浆等天然成分解析:本题考查动物细胞培养过程的知识,主要考查对基础知识的理解和识记能力。胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理组织块,分解细胞间的黏着物,分散开制备细胞悬液;细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行,CO2的作用是维持培养液的PH;为了防止细胞培养过程中细菌的污染,可向培养液中加入适量的抗生素;在合成培养基中,通常需加入血清、血浆等天然成分。答案:B5.[2014·江苏南通期末]下列关于动物细胞工程的叙述,正确的是()A.动物细胞培养过程中更换培养液的目的仅是为了补充营养物质B.杂交瘤细胞进行体外培养,可获得单克隆抗体C.杂交瘤细胞进行体内培养,可获得能产生单克隆抗体的胚胎D.动物细胞培养过程中,用胃蛋白酶处理组织使细胞分散解析:本题考查动物细胞工程的知识,主要考查对基础知识的理解和识记能力。动物细胞培养过程中更换培养液的目的是为了补充营养物质,和清除代谢产物;杂交瘤细胞进行体3外培养也可以在小鼠体内增殖,可获得单克隆抗体;动物细胞培养过程中,用胰蛋白酶处理组织使细胞分散。答案:B6.对下面制备单克隆抗体的过程示意图的叙述不正确的是()A.①表示B淋巴细胞和骨髓瘤细胞均是从小鼠的脾脏中提取的B.④中的筛选是通过抗原、抗体反应实现的C.②促进细胞融合的过程可以利用聚乙二醇作介导D.⑤可以无限增殖解析:①表示提取过程,指的是从小鼠的脾脏内提取B淋巴细胞,从骨髓中提取骨髓瘤细胞。答案:A7.[2014·北京西城期末]某小鼠生活过程中被多种病原体感染过,科学家以该小鼠为实验材料,利用单克隆抗体技术,获得了抗某种病原体的高纯度单克隆抗体。下列叙述不正确的是()A.被多种病原体感染过的小鼠体内会产生多种效应B细胞B.经细胞融合后形成的单个杂交瘤细胞可分泌多种特异性抗体C.用“抗原—抗体检测法”可筛选出产生特定抗体的杂交瘤细胞D.单克隆抗体的制备过程中使用了细胞培养和细胞融合技术答案:B经细胞融合后形成的单个杂交瘤细胞既能迅速大量繁殖,又能产生专一的抗体。8.[2014·江苏无锡期末]人乳头状瘤病毒(HPV)与宫颈癌的发生密切相关,抗HPV的单克隆抗体可以准确检测出HPV,从而及时监控宫颈癌的发生,以下是以HPV衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体的过程,请据图回答:(1)上述单克隆抗体制备过程中涉及的细胞工程技术有______________。(2)杂交瘤细胞中染色体数目与普通淋巴细胞相比具有的特点是________,在HAT培养基上存活的细胞可能包括________(填下列序号)①无抗体分泌的细胞②抗HPV抗体的分泌细胞③其它无关抗体的分泌细胞(3)对于抗体检测呈________性的杂交细胞应尽早进行克隆化,克隆化的方法最常用的是有限稀释法,即稀释细胞到3~10个细胞/mL,每孔加入细胞稀释液________mL(0.1/1/10),使每个孔内不多于一个细胞,达到单克隆培养的目的。(4)由上述过程生产出的单克隆抗体不能直接用于人体,理由是____________。(5)科学家从某些无限增殖细胞的细胞质中分离出了无限增殖调控基因(prG),该基因能激发动物细胞分裂,这为单克隆抗体的制备提供了更多的思路。除本题描述的一种制备单克隆抗体技术外,请再简要写出一种制备单克隆抗体的思路____________________。解析:本题考查单克隆抗体制备过程的知识,主要考查对基础知识的理解和识记能力。(1)图中单克隆抗体制备过程中涉及的细胞工程技术有动物细胞培养、动物细胞融合。(2)杂交瘤细胞是两个细胞融合得到,染色体数目与普通淋巴细胞相比具有的特点是染色体数目加倍,在HAT培养基上存活的细胞可能包括无抗体分泌的细胞、抗HPV抗体的分泌细胞、其它无关抗体的分泌细胞。(3)对于抗体检测呈阳性的杂交克隆应尽早进行克隆化,克隆化的方法最常用的是有限稀释法,即稀释细胞到3~10个细胞/mL,每孔加入细胞稀释液0.1mL,4使每个孔内不多于一个细胞,达到单克隆培养的目的。(4)由上述过程生产出的单克隆抗体不能直接用于人体,因为小鼠形成的抗体对人体来说是抗原,存在着排异反应。(5)制备单克隆抗体的新思路是通过基因工程向浆细胞中导入prG、利用核移植技术将浆细胞的细胞核移植到去核的无限增殖细胞中。答案:(1)动物细胞培养、动物细胞融合(2)染色体数目加倍①②③(3)阳0.1(4)因为小鼠形成的抗体对人体来说是抗原,存在着排异反应(5)通过基因工程向浆细胞中导入prG、利用核移植技术将浆细胞的细胞核移植到去核的无限增殖细胞中(答对其一即可)9.[2014·浙江宁波期末]下图为动物细胞培养过程中细胞增殖情况的变化曲线(图中B、E两点表示经筛选、分装后继续培养),请据图回答下列问题:(1)OB段的培养称为________培养,AB段可能发生了________现象,使增殖速率减缓,用________酶可使组织细胞分散开来,分装到多个卡氏瓶中进行________培养。(2)B点的细胞群体称为________。B点时筛选出一个细胞,通过________方法单独培养使之繁衍成一个新的细胞群体,该细胞群体称为________。(3)E点后的细胞大多数具有________核型,从而可连续传代。解析:本题考查动物细胞培养过程的知识,主要考查对基础知识的理解和识记能力。(1)动物细胞培养包括原代培养和传代培养两个过程,10代以内的培养称为原代培养,此时发生接触抑制现象,用胰蛋白酶可使组织细胞分散开来,分装到多个卡氏瓶中进行传代培养。(2)B点的细胞群体称为细胞系,B点时筛选出一个细胞,通过克隆培养法单独培养使之繁衍成一个新的细胞群体,该细胞群体称为细胞株。(3)E点后的细胞发生了基因突变,大多数具有异倍体核型,从而可连续传代。答案:(1)原代接触抑制胰蛋白传代(2)细胞系克隆培养细胞株(3)异倍体10.[2015·东城区普通校联考]克隆猪成功率较低,与早期胚胎细胞的异常凋亡有关。Bcl-2基因是细胞凋亡抑制基因,用PCR技术可以检测该基因转录水平,进而了解该基因与不同
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