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食品安全快速检测技术yehz@zju.edu.cn快速检测的方法概述化学比色法食品中有机磷或氨基甲酸酯农药、亚硝酸盐、硝酸盐、甲醛、二氧化硫、吊白块、敌鼠、亚硫酸土等;水中硫酸盐、亚硝酸盐氮、余氯、总铁、氟化物、六价铬、氰化物、汞、镉等酶联免疫吸附法黄曲霉毒素、有机磷农药、呋喃丹、瘦肉精、氯霉素、盐酸克伦特罗、链霉素、庆大霉素、新霉素、依维菌素、磺胺二甲嘧啶、磺胺嘧啶、磺胺喹恶啉、恩诺沙星、四环素族、己烯雌酚、安定、皮质类固醇、去甲基雄三烯醇酮免疫胶体金技术有机磷农药、兽药等(盐酸克伦特罗)生物芯片免疫芯片、DNA芯片、液相悬浮芯片生物传感技术酶传感器、免疫传感器、微生物传感器、组织传感器、细胞器传感器、类脂质膜传感器、DNA传感器(鱼新鲜度、BOD)其他检测技术车载GC-MS、食品安全检测车、生物学发光、微生物快速检测等现场快速检测发展趋势①由于高新技术的应用,检测能力不断提高,检测灵敏度越来越高,残留物的超痕量分析水平已达到l0-7g②检测速度不断加快,智能化芯片和高速电子器件与检测器的使用,使检测周期大大缩短③选择性不断提高,高效分离手段、各种化学和生物选择性传感器的使用,使在复杂混合体中直接进行污染物选择性测定成为可能④由于微电子技术、生物传感器、智能制造技术的应用,检测仪器向小型化、便携化方向发展,使实时、现场、动态、快速检测正在成为现实目前我国基层单位很多快速测技术的应用还只处于定性或半定量水平,定量快速分析的小型化仪器是今后快速检测技术的发展趋势现场快速检测方法的主要形式1试纸法1.1用试纸显色来定性或作为限量指示:如农药、敌鼠钠盐等。1.2用试纸层析显色来定性并来作为限量指示:如苏丹红、瘦肉精等。1.3用试纸显色的深浅来半定量:如食用油酸价、过氧化值等。2试管法2.1用试管显色来定性并来作为限量指示:如毒鼠强、生豆浆等。2.2用试管显色的深浅来半定量:如亚硝酸盐、甲醇、二氧化硫等,比色定量可以是目视,也可以用便携式光度计。3.滴瓶法:将标准溶液放在滴瓶中,根据消耗的滴数量来判定被检物质的含量。如酸碱、氧化还原性物资等。4.便携式仪器法:如便携式甲醇速测仪、酸度计、电导仪、温湿度计、中心温度计、食用油极性测定仪、辐照度计、ATP荧光度仪等。5.其它一些形式的快速检测方法。结果的表述及注意事项食品安全现场快速检测,主要体现在定性和限量检测上。有些方法可以达到半定量或定量的效果则更加有利于结果的分析与判断。1检测方法与表述形式1.1定性检测与表述:即快速地得出被检样品中是否含有有毒有害物质,或其本身就是有毒有害物质。通常以阴性或阳性来表述。阴性表示用本方法未检出要检测的物质。阳性表示检出了有毒有害物质。1.2限量检测与表述:即快速地得出被检样品中有毒有害物质是否超出标准规定值或有效物质是否达到标准规定值。通常以合格或不合格来表述。1.3半定量检测与表述:能够快速地得出所测物质成分的大概含量,通常以合格或不合格来表述,也可标出具体数值。1.4定量检测:如温度、湿度、消毒间紫外线辅照强度、纯净水电导率等物理指标的检测。通常以具体数值表述。2注意事项2.1对于阳性结果以及不合格结果的样品:应重复测试,排除偶然误差。重要样品,如含急性中毒物质或可能会对后期处理带来较大社会影响或较大经济损失的样品,应注意留样,并将样品送实验室进一步确证2.2对于阴性与阳性、合格与不合格之间不易判定的样品:应重复测试,以多次重复相同的结果报告之国外食品安全现场快速检测状况各国不尽相同:如农药残留、金属污染物、亚硝酸盐等共同关注如牛肉中疯牛病因子的快速检测,是一些发达国家是研发的重点有些国家的科学技术较为先进,能够采用特异试材研制出专用试剂,或能够将实验室使用的大型仪器小型化,将其安放在专用车中进行现场快速检测国内食品安全现场快速检测状况我国一些单位按照发达国家的模式装备了一些快速检测车辆,起到了一定的作用,由于起步较晚,仪器设备应该如何装备以及如何发挥作用都还有一个过程过去的几年里,许多单位装备了食品安全快速检测箱等检测设备,对食品安全保障起到了很大的作用,但也有一些问题存在。目前,我国有不少的单位都在开发快速检测方法与设备,其中有不少好的方法与产品,但也不排除有些方法有待完善,产品的质量还有待进一步提高。经过多年努力,中国疾病预防控制中心食品安全所已能开展四大类80多项现场快速检测项目,并能够提供这些项目的试剂与设备,为我国开展此领域的工作奠定了一定的基础。现场快速检测项目的分类常见食物中毒类:如农药、鼠药、金属毒物、有毒油脂、亚硝酸盐、甲醇、生豆浆、有毒豆角等的快速检测方法。非法食品添加物与劣质食品类:如掺杂造假、食品物理或化学性质的改变等。食品生产、加工和储运控制环节类:如温度、洁净度、消毒效果等。生物性污染类:如细菌总数、大肠菌群。注意:在生物性污染项目中,致病菌是常见食物中毒因子。有机磷和氨基甲酸酯类农药毒鼠强的快速检测速测管测定法试剂盒测定法鼠药氟乙酰胺速测管测定法盐酸羟胺显色测定法“雷因须氏法”——初筛铜片变色情况可能存在的金属毒物灰色或黑色砷化物灰紫色锑化物灰黑色铋化物银白色汞化物灰白色银化物黑色氯化物、亚硫酸盐砷、汞确认方法检砷管法检汞管法亚硝酸盐的快速测定方法甲醇的快速测定方法酒醇仪测定法速测盒测定法油脂酸价和过氧化值酸价速测卡过氧化值速测卡油脂酸价和过氧化值桐油的快速测定方法检测意义:桐油是从桐树果实中提出来的油,是一种快干性油,工业中用作油漆及涂料。桐油应用广乏。其色、味与一般食用油相似,故常有误食而中毒者。操作步骤:取油样1ml于小试管中,沿管壁小心加入“桐油鉴别试剂A”1ml,使试管中溶液分为两层,将试管置于35~45℃温水中(温度不宜过高),加热约10分钟。如有桐油存在,在溶液分层的界面上,会出现紫红色至深咖啡色的环,加热时间延长,颜色会加深,更易观察,检出限0.5%。左侧阴性,右侧阳性大麻油的快速测定方法检测意义:大麻系一种有毒的大麻科植物,其果实含油在30%左右。大麻油呈棕褐色略带淡绿色。由于大麻子中含有带麻醉性的有毒成分,如四氢大麻酚,大麻二酚,大麻酚等,故食用未经处理或处理不当的大麻油,会引起中毒。方法1:取油样1ml置试管中,加入浓盐酸3~5ml,加入一次量的“大麻油鉴别试剂A”,振摇1分钟,10分钟内观察,若酸层染上粉红色,静置后逐渐变成红色,示有大麻油存在。方法2:取油样1ml置于试管中,加入2ml“大麻油鉴别试剂B”,振摇混匀,静置5分钟,10分钟内观察,酸层呈现绿色,示有大麻油存在。方法1结果图方法2结果图巴豆油的快速测定方法检测意义:巴豆油是一种剧毒的非食用油,把巴豆油与巴豆油鉴别试液混合后加热,在两液交界处会产生红棕色的环,可作为鉴别巴豆油的项目之一。操作方法:取一支试管,加入3ml“巴豆油鉴别试液”。另取一支试管,将1ml油样注入其中,加入无水乙醇液5ml,充分混匀后,将此溶液沿试管壁慢慢加到盛有“巴豆油鉴别试液”的试管中,将此试管置40~50℃温水中加热30分钟,如在两液界面处出现棕色环,示有巴豆油存在。可做阳性对照实验加以确正。注意:①本方法检出限为2.5%。②棉子油,菜子油,豆油有时也会产生淡红色环,但与巴豆油红棕色环很容易区别。③因掺巴豆油的多少,色环的颜色由红棕→棕黑色。左管含10%巴豆油右管为纯豆油方法编号:CDC-1171矿物油的快速测定方法检测意义:矿物油来源于石油分馏的产物,属于较高级的直链烷烃,对人体有害。食入较多时可引起急性中毒。矿物油污染食用油的情况常见于机器润滑油溢入,盛装过矿物油的瓶、桶又装食用油,掺杂使假等。少量矿物油一般不会引起人体急性中毒,而确发生过在食用油中加入大量液体石蜡食用后中毒的事件。操作步骤:取2滴油样于比色管中,加5滴“矿物油鉴别试剂和5ml无水乙醇,不加盖,放入盛有开水的烧杯中,加热10分钟后,加入5ml蒸馏水或纯净水,若发生混浊为阳性,其浊度随矿物油的浓度增加而加大。其最低检出量为0.1%。依次为机油、煤油和葵花子油方法编号:CDC-1181生熟豆浆的快速检测方法操作:取1ml豆浆样品于检测管中,加入2滴A试液,盖盖后摇匀,再加入2滴B试液,摇匀,2分钟内观察结果,未煮熟的豆浆呈青色;煮熟的豆浆为本色,2分钟后逐渐变为灰色。意义:大豆中含有皂苷毒素对人体有害。如果豆浆未能煮沸持续10分钟破坏毒素,饮用后,短则30分钟,长则1小时即会引起急性中毒(胃部不适、恶心、呕吐、腹胀、腹痛、腹泻等,体弱者会有生命危险)。本试剂盒适用于豆浆生熟度的快速检测。由左向右:1管为熟豆浆,2管为生豆浆3管4管为摇动后的状态。方法编号:CDC-1201有毒豆角的快速检测方法1.检测意义:未煮熟、炒透的扁豆中含有皂素及其它一些有害物质,对人体消化道有强烈刺激作用,可引起出血性炎症,并对红细胞有溶解作用,100℃加热10分钟以上,或更高温度时炒熟炒透可裂解皂素消除有害物质。有毒扁豆快速检测试剂盒,可在10分钟左右判别扁豆(豆角)是否煮熟、炒透。2.操作方法:将豆角剪成1mm左右的细丝,称取约2.5g放入10mL比色管中,加C试液到10mL,用力振摇50次左右,取1ml滤液于1.5ml透明离心管中,加入2滴A试液,盖盖后摇匀,再加入2滴B试液,摇匀,2分钟内观察结果,未煮熟的豆角呈青黑色;煮熟的豆角为溶剂本色,2分钟后逐渐变为灰黑色。检测时可将一份豆角将其于沸水中煮上5分钟左右,取此豆角做为阴性对照样对比检测更加有利于结果判断。豆角煮制0、1、2、3、4分钟时的结果加入B试液后的情况二十一、变质水产品的快速检测酸度计测定法方法原理:一般活鱼肌肉的pH值为7.2~7.4,鱼死后僵硬期,pH值会有暂时的下降,大约为5.6~6.4,随着尸僵的消失和进入自溶阶段,pH值上升接近于中性7.0,当死亡后储藏了一段时间的鱼体pH值大于7.0时,标志鱼体已不新鲜,pH值越高,腐败越严重。样品处理:取5g鱼肉剪碎,用50mL生活饮用水浸泡15min,期间振摇3~4次,取上清液测定。测定与换算1假设生活饮用水的pH值为7.0,首先用酸度计测试并记录其pH值,再测试并记录样品浸泡上清液的pH值。2若测得饮用水的pH值大于7.0时,按下式换算鱼体酸碱度:鱼体酸碱度=浸泡液pH值-(饮用水pH测定值-7.0)5.3若测得自来水的pH值小于7.0时,按下式换算鱼体酸碱度:鱼体酸碱度=浸泡液pH值+(7.0-饮用水测定pH值)方法编号:CDC-2084变质肉类的快速检测检测意义:不新鲜的肉是指肉类开始或已经变质,病害肉是指因病死亡或快要死亡时屠宰的肉。食用不新鲜或病害肉后,会引起身体不适、中毒表现或感染疾病。适用范围:酸碱度的快速检测方法以及过氧化物酶的快速检测方法适用于畜禽肉的快速监测。挥发性盐基氮的快速检测方法除适用于畜禽肉外,也适用于鱼肉的快速监测。方法原理:畜禽肉变质后或病害肉,其肉体内的挥发性盐基氮、pH值以及过氧化物酶都会发生改变。测试酸碱度,可初步反映出其新鲜程度;测试挥发性盐基氮,可判断是否新鲜或腐败;测试过氧化物酶,可初步判断是否是病害肉。检测试材:便携式pH酸度计,挥发性盐基氮快速检测仪,过氧化物酶快速检测仪。方法编号:CDC-2084(一)酸碱度的快速检测样品处理:取5g无脂肪、无筋腱的肉样剪碎,用50ml自来水浸泡15分钟,期间振摇3~4次,用滤纸过滤或取上清液待测。测定与计算:首先用酸度计测试并记录自来水的pH值,再测试并记录样品浸泡液的pH值。设定正常自来水的pH值为7.0,若测得自来水的pH值大于7.0时,应在测得样品浸泡液pH值的基础上减去大于值;若测得自来水的pH值小于7.0时,应在测得样品浸泡液pH值的基础上加上小于值。结果判断:pH值在5.8以下时常为未经过排酸(迅速冷却)处理的肉;5.8~6.4之间为鲜肉;6.5~6.7之间为次鲜肉;6.7以上时为变质肉,当pH值大于6.7以上时,可进行挥发性盐基氮的检测加以确认。(二)挥发性盐基氮与
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