好东西

幻灯片1干细胞移植在肝病领域的应用幻灯片2慢性肝病的发展过程好转、痊愈肝炎病毒酒精化学物质广泛肝细胞坏死重型肝损伤肝脏病变环境因素迁延、进展肝硬化遗传因素幻灯片3终末期肝病治疗现状肝移植——最有效的办法供需矛盾突出：肝源缺乏免疫排斥反应费用昂贵：40-50万定期检查及维持费用幻灯片4干细胞干细胞研究的突破性进展为肝病开拓了新的契机幻灯片5干细胞生物学特性干细胞具有自我更新能力和高度增殖以及多向分化的潜能。按照其分化的潜能，可分为：全能性的多能性的专能性的幻灯片6干细胞的来源来源于胚胎---胚胎干细胞ESC胚胎性生殖细胞EGC来源于成体---成年组织来源的干细胞ASC*骨髓干细胞BMSC*脐带干细胞UCSC*诱导多能干细胞IPS幻灯片7一、胚胎干细胞胚胎干细胞（embryonicstemcells，ECSs）由胚胎内细胞团或原始生殖细胞经体外抑制培养而筛选出的细胞，具有强大的自我更新能力以及分化的潜能。1998年Dr.Thomson从人类胚胎的囊胚期内细胞群中直接分离多能干细胞Science,1998,Vol282:1145－1147幻灯片8胚胎干细胞的实验研究利用胚胎干细胞(ESC)移植治疗CCl4诱导大鼠肝纤维化模型能减轻肝纤维化，并能促进肝样细胞的产生。MoriyaK,YoshikawaM,OujiY,SaitoK,Nishiofukuetal.EmbryonicstemcellsreduceliverfibrosisinCCl4-treatedmice.IntJExpPathol2008;89:401-409.幻灯片9二、成体干细胞成体干细胞（somaticstemcell）是指存在于一种已经分化组织中的未分化细胞，能够自我更新并且能够特化形成该类型组织的细胞。骨髓干细胞脐带干细胞诱导多能干细胞外周血干细胞肝干细胞胰腺干细胞等幻灯片10（一）骨髓干细胞骨髓干细胞（Bonemarrowstemcells，BMSCs）是一类具有自我更新、高度增生和多向分化潜能的细胞群体，特定条件下具有分化并发育为肝干细胞及肝细胞的潜能。包含造血干细胞(HSC)、间充质干细胞(MSC)、血管内皮前体细胞等。幻灯片11骨髓干细胞向不同组织器官分化图示幻灯片12骨髓干细胞的实验研究2000年，Alison等便发现女性患者接受骨髓移植治疗（男性捐献者）后肝脏内发现Y染色体阳性的肝细胞。TheiseND,NimmakayaluM,GardnerR,IlleiPB,MorganG,TepermanL,etal.Liverfrombonemarrowinhumans.Hepatology2000;32:11-16.幻灯片13骨髓干细胞治疗肝癌的临床应用幻灯片14国内自体骨髓干细胞治疗肝硬化病例情况肝炎后肝硬化自身免疫性肝病血吸虫型肝硬化酒精性肝硬化合计例数89611610235女，67男，年龄：26-76岁治疗方式经肝动脉回输，细胞数量为5-7×107/次沈阳军区总医院消化内科幻灯片15治疗结果92.2%7.8%102例患者中，8例死亡，4例为肝硬化终末期肝功能分级ChildC，合并上消化道大出血死；4例为肝硬化合并晚期肝癌死亡。幻灯片16肝硬化患者自体骨髓干细胞移植前后实验室指标变化020406080100存活死亡ALB(g/L)ALT(U/L)AST(U/L)T-BIL(umol/l)PT(Sec)FIB(g/L)移植前28.27±4.29109.17±89.7494.57±53.2837.39±26.8718.23±4.581.96±0.89移植后37.09±6.1577.27±19.5760.07±17.3835.81±23.9016.72±4.332.42±1.01P值P0.05P0.01P0.05P0.05P0.05P0.01血浆白蛋白在各项指标中改变最显著，其次是凝血功能的改善，提示肝脏的合成功能提高。幻灯片17国内自体骨髓干细胞治疗重症肝病病例情况60例重症肝病患者，年龄在20-65岁治疗方法肝动脉回输，剂量为：5×107-108/次姚鹏，王帅，胡大荣等.自体骨髓干细胞移植治疗慢性重症肝病临床研究.透析与人工器官，2006，17(1)：18-21幻灯片18治疗12周后实验室指标变化治疗前（平均值）59.5581.5832.1353.48%109治疗后（平均值）136.34ALTT-BIL122.88ALB27.5326.33%PTA血氨151.14幻灯片19骨髓间充质干细胞骨髓干细胞中，间充质干细胞（Mesenchymalstemcells，MSCs）移植治疗的研究倍受关注，其具有自我更新和多向分化潜能，能向肝样细胞分化。功能:减轻和消除炎症组织损伤修复免疫调节改善造血幻灯片20一、减轻炎症反应1、独特的免疫表性MSCs低表达MHC-I类分子，不表MHC-Ⅱ类分子、FasL和T细胞协同刺激分子B7等，故免疫原性很弱,移植治疗时能避免排斥反应。MajumdarMK,Keane-MooreM,BuyanerDetal.Characterizationandfunctionalityofcellsurfacemoleculesonhumanmesenchymalstemcells.JBiomedSci2003;10:228-241幻灯片212、免疫调节作用RasmussonI.Immunemodulationbymesenchymalstemcells.ExPCellRes.2006;312:2169一2179.幻灯片22二、抗肝纤维化MSCs通过旁分泌作用调节肝星形细胞（HSC)的功能，分泌IL-10和TNF-a抑制HSC增殖及基质合成，减少细胞外基质沉积，抑制肝组织纤维化的形成。ParekkadanB,vanPollD,MegeedZetal.ImmunomodulationofactivatedhepaticstellatecellsbyMesenchymalstemcells.BiochemBiophysResCommun.2007Nov16;363(2):247-52.幻灯片23三、MSCs向肝脏细胞分化ChoKA,JuSY,ChoSJ,JungYJ,WooSY,etal.Mesenchymalstemcellsshowedthehighestpotentialfortheregenerationofinjuredlivertissuecomparedwithothersubpopulationsofthebonemarrow.CellBiolInt.2009Jul;33(7):772-7..幻灯片24四、归巢特性我们的相关研究也发现,重型肝炎患者肝组织与外周之间存在有助于MSCs向肝脏归巢的SDF-1,并且患者机体环境促使MSCs胞膜表达SDF-1CXCR4，该归巢机制是MSCs特异迁移到损伤部位，参与肝脏局部的再生及负性免疫调节的重要理论基础。甘建和，黄小平，秦爱兰等。慢性肝功能衰竭时骨髓间充质干细胞胞膜CXCR4的表达及影响因素。中国组织工程研究与临床康复，2009；13（40）：7885-7888。甘建和，王晓红，黄小平等。SDF-1其意义。中华临床感染病杂志，2008；1(14):232-234。幻灯片25BM-MSC动物实验研究BM-MSC通过分泌细胞因子来调节机体免疫功能而促进急性肝衰竭大鼠模型恢复。ParekkadanB,vanPollD,SuganumaK,CarterEAetal.Mesenchymalstemcell-derivedmoleculesreversefulminanthepaticfailure.PLoSONE.2007;2(9):e941幻灯片26国外BM-MSC治疗肝硬化临床应用病例情况（伊朗Taleghani医院）治疗方法：经肝动脉回输自体骨髓MSC，细胞数为3-5.0×107KharazihaP,HellströmPM,NoorinayerB,etal.Improvementofliverfunctioninlivercirrhosispatientsafterautologousmesenchymalstemcellinjection:aphaseI–IIclinicaltrial.EurJGastroenteroHepatol2009;21:1199–1205.幻灯片2724W后治疗结果：幻灯片28国内BM-MSC治疗肝衰竭临床应用病例情况慢性肝衰竭移植组对照组男女男女例数302564年龄（y）43.8±11.344.2±11.3治疗方式局部麻醉下行介入术，经肝固有动脉输入MSCs。高志良，彭亮，崇雨田等。骨髓问充质干细胞自体移植治疗慢性肝衰竭的疗效研究。现代消化及介入诊疗，2007，12[S]:23-27病例情况慢性肝衰竭移植组32例，男30例，女2例对照组60例，男56例，女4例幻灯片29治疗结果幻灯片30治疗结果两组患者出院时转归比较（例数，%）手术成功率100%，术中术后均为出现严重不良反应及并发症。幻灯片31（二）脐带间充质干细胞脐带间充质干细胞（UC-MSC）来源于分娩后的废物，取材方便，且生物学特性，免疫特性相对纯净。生物学功能和BM-MS相似但来源丰富,具有广阔的临床前景。幻灯片32UC-MSC的实验研究与其他干细胞相比，在肝损伤小鼠体内，人脐带间充质干细胞在损伤肝脏中浓度最高，并在肝内可产生T细胞趋化因子、非白细胞抑制因子和催乳素等减轻肝脏炎症。PeichunT,TzwinF,YimingA,etal.TheTherapeuticPotentialofHumanUmbilicalMesenchymalStemCellsfromWharton’sJellyIntheTreatmentofRatLiverFibrosis.LiverTransplantation2009;15:484-495.幻灯片33UC-MSC的实验研究Pei-Chun等利用人UCMSCs移植治疗CCL4诱导的小鼠肝损伤后，发现移植后小鼠转氨酶下降，肝细胞变性及凋亡减少，而肝细胞再生增加，证明UCMSCs移植可治疗肝损伤。A:正常大鼠肝脏B:CCl4处理后4WC:CCl4处理后8WD:CCl4处理后8W+UCMSCPei-ChunTsai,Tz-WinFu,Yi-MingArthurChen,Tsui-LingKo,etal.TheTherapeuticPotentialofHumanUmbilicalMesenchymalStemCellsfromWharton’sJellyintheTreatmentofRatLiverFibrosis.Livertransplantation2009(15):484-495幻灯片34UC-MSC治疗肝病临床研究在国家“十一五”科技重大专项子课题“抗病毒及免疫调节结合人工肝支持技术治疗乙型重型病毒性肝炎的应用”的资助下，我科与中国科学院上海生命科学院、解放军302医院、北京和泽生物公司联合开展脐带间充质干细胞治疗肝衰竭、终末期肝病的研究。幻灯片35幻灯片36研究已在最大临床试验注册库ClinicalTrials.gov网站注册幻灯片37治疗对象：肝硬化患者（治疗组26例，对照组20例）肝衰竭患者（治疗组21例，对照组17例）自身免疫性肝病（治疗组7例）治疗方法：1、细胞数量：前臂静脉1.6×106/kg肝动脉0.8×106/kg2、治疗频率：肝硬化2周一次肝衰竭1周一次自疫肝1月一次3、输注方法：前臂静脉直接输入或肝动脉介入输注。幻灯片38UC-MSC治疗肝硬化两组肝硬化患者治疗前后不同时间ALB的变化01020304050基线第2周第4周第8周第12周治疗时间ALB(g/L)治疗组对照组幻灯片39UC-MSC治疗肝硬化两组肝硬化患者治疗前后不同时间PAB的变化050100150200250基线第2周第4周第8周第12周治疗时间PAB（g/L)治疗组对照组幻灯片40UC-M