001生地检验标准操作规程(SOP-ZY-A-001-00)

某某中药饮饮片有限公司第1页共7页1目的：建立生地黄中药材各项质量指标的检验方法与操作规程。2适用范围：适用于生地黄中药材的检验。3责任者：QC主管、QC检验员。4引用标准4.1《中国药典》2010年版一部4.2企业标准《生地黄中药材质量标准》5内容5.1性状5.1.1设备及仪器放大镜、直尺。5.1.2操作方法取用供试品，用目视或用放大镜观察，并用直尺测量其直径；闻其气，用口尝其味。5.1.3记录记录观察的形状，供试品其直径数值和气味。5.1.4结果判定呈不规则团块状或长圆形，中间膨大，两端稍细，有的细小，长条状，稍扁而扭曲，长6～12cm，直径2～6cm。表面棕黑色或棕灰色，极皱缩，具不规则的横曲纹。体重，质较软而韧，不易折断，断面棕黑色或乌黑色，有光泽，具黏性。气微，味微甜。判为符合规定。5.2鉴别5.2.1仪器与用具刀片或解剖刀、镊子（包括粗镊及眼科弯镊与直镊）、剪（眼科剪与手术剪）、小烧杯、带盖搪瓷盘、毛笔、解剖针、烘箱、高速粉碎机、50ml具塞锥形瓶、量筒10ml、定性滤纸、漏斗、蒸发皿125ml、胶头滴定管、载玻片、盖玻片、酒精灯、超声仪、显微镜、打火机、水浴锅、回流提取装置、硅胶G薄层板。5.2.2试剂甲醇、三氯甲烷、正丁醇。5.2.3试液5.2.3.1梓醇对照品题目生地黄检验操作规程制定人审核人QA审核人制定日期审核日期审核日期批准人批准日期生效日期颁发部门QA中心分发部门变更历史某某中药饮饮片有限公司第2页共7页5.2.3.2茴香醛试液：取茴香醛0.5ml，加醋酸50ml使溶解，加硫酸1ml，摇匀，即得。（本液需临用新配）5.2.3.3水合氯醛试液：取水合氯醛50g，加水15ml与甘油10ml使溶解，即得。5.2.3.4毛蕊花糖苷对照品。5.2.3.50.1％的2，2-二苯基-1-苦肼基无水乙醇溶液。5.2.3横切面显微5.2.3.1操作方法5.2.3.2记录记录横切面鉴别特征。5.2.3.3结果判定横切面：木栓细胞数列。栓内层薄壁细胞排列较疏松，散有较多的分泌细胞，含橘黄色油滴；偶有石细胞，韧皮部较宽，分泌细胞较少。形成层成环。木质部射线宽广，导管稀疏，排列成放射状。判为符合规定。5.2.4粉末显微5.2.4.1操作方法取本品粉碎成粉末（过四号筛），置载玻片上，加2滴水合氯醛试液，在酒精灯下微微加热（加热时要不停移动载玻片），至边缘起小泡后，停止加热，继续补充水合氯醛试液再加热，以不烧干为度直至透化完全为止，盖上盖玻片。放冷，置显微镜下观察。5.2.4.2记录记录粉末显微鉴别特征。5.2.4.3结果判定生地黄粉末深棕色。木栓细胞淡棕色。薄壁细胞类圆形，内含类圆形核状物。分泌细胞形状与一般薄壁细胞相似，内含橙红色油滴状物。具缘纹孔导管及网纹导管直径约92um。判为符合规定。5.2.5理化鉴别照薄层色谱法(按《中国药典》2010年版一部附录ⅥB)试验5.2.5.1梓醇的鉴别5.2.5.1.1操作方法取本品粉碎后的粉末2g，加甲醇20ml，加热回流1小时，放冷。滤过，滤液浓缩至5ml，作为供试品溶液。另取梓醇对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（按《中国药典》2010年版一部附录ⅥB）试验，吸取上述供试品溶液、对照品溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层上，以三氯甲烷-甲醇-水（14：6：1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷茴香醛试液，在105℃加热至斑点清晰。5.2.5.1.2记录记录薄层色谱图及结果。某某中药饮饮片有限公司第3页共7页5.2.5.1.3结果判定供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。判为符合规定。5.2.5.2毛蕊花糖苷的鉴别5.2.5.2.1操作方法取本品粉末1g，加80%甲醇50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水5ml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取4次，每次10ml，合并正丁醇液。蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取毛蕊花糖苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（按《中国药典》2010年版一部附录ⅥB）试验，吸取上述供试溶液5μl，对照品溶液2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲醇-甲酸（16:0.5：2）为展开剂，展开，取出，晾干，用0.1%的2，2-二苯基-1-苦肼基无水乙醇溶液浸板，晾干。5.2.5.2.2记录记录薄层色谱图及结果。5.2.5.2.3结果判定观察供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。判为符合规定。5.3检查5.3.1水分5.3.1.1仪器与用具电热鼓风干燥箱、电子天平、扁形称量瓶、干燥器（硅胶干燥剂）。5.3.1.2操作方法取鉴别项下粗粉2～5g（W样），平铺于干燥至恒重的扁形称量瓶中（W瓶），厚度不超过5mm精密称定，打开瓶盖在105℃干燥5小时取出，将瓶盖盖好，移置干燥器中，冷却30分钟，精密称定，再在上述温度干燥1小时，冷却，称重，至连续两次称重的差异不超过5mg为止W恒。根据减失重量，计算药材中含水量。5.3.1.3记录记录供试品取用量、水分的计算和结果。计算公式：%100WW-WWF水分样恒瓶样5.3.1.4结果判断本品的水分小于或等于15.0%，判为符合规定。5.3.2总灰分5.3.2.1仪器与用具马弗炉、坩埚、坩埚钳、干燥器、分析天平某某中药饮饮片有限公司第4页共7页5.3.2.2试剂变色硅胶5.3.2.3操作方法取本品粉碎后过二号筛粉末约2～3g（W样），置炽灼至恒重的坩埚中（W埚），缓缓炽热至完全炭化，再放入马弗炉500～600℃取出，置干燥器中冷却30分钟，精密称定，再在上述条件灼烧1小时，冷却，称重，至连续两次称重的差异不超过0.3mg恒重为止。根据残渣重量（W残恒），计算本品中总灰分的含量（%）。5.3.2.4记录记录供试品取用量、灰分的计算和结果。计算公式：%100WW总灰分样埚残恒W5.3.2.5结果判断本品的灰分小于或等于8.0%，判为符合规定。5.3.3酸不溶性灰分5.3.3.1仪器与用具马弗炉、坩埚、坩埚钳、干燥器、电子天平、无灰滤纸。5.3.3.2试剂变色硅胶、盐酸。5.3.3.3操作方法取4.4.2总灰分项下的残渣，在坩埚中加入稀盐酸约10ml，用表面皿覆盖坩埚，置水浴上加热10分钟，表面皿用热水5ml冲洗，洗液并入坩埚中，用无灰滤纸滤过，坩埚内的残渣用水洗于滤纸上，并洗涤至洗液不显氯化物反应为止。滤渣连同滤纸移至同一坩埚中，干燥，炽灼至恒重。根据残渣重量W残恒，计算。5.3.3.4记录记录供试品取用量、酸不溶性灰分的计算和结果。计算公式：%100WW酸不溶性灰分样埚残恒W5.3.3.5结果判断本品的酸不溶性灰分小于或等于3.0%，判为符合规定。5.3.4二氧化硫残留量5.3.4.1仪器与用具1000ml两颈圆底烧瓶、刻度分液漏斗、回流泠凝管、250ml锥形瓶、酸式滴定管、磁力搅拌器、电热套。5.3.4.2试剂6mol/L盐酸、0.01mol/L碘滴定液、淀粉指示剂。5.3.4.3操作方法取鉴别项下粉末过五号筛后称定重量W样（约10g），置两颈圆底烧瓶中，加水300～400ml，连接刻度分液漏斗，并导入氮气至瓶底，连接回流泠凝管，在泠凝管的上端导出口处连接导气管，将导气管插入250ml锥形瓶底部。某某中药饮饮片有限公司第5页共7页锥形瓶内加水125ml和淀粉指示剂1ml作为吸收液，置于磁力搅拌器上不断搅拌。加热两颈圆底烧瓶内的溶液至沸，并保持微沸约3分钟后开始用碘滴定液（0.01mol/L）滴定，至蓝色或蓝紫色持续20秒钟不褪，并将滴定的结果用空白试验校正。计算样品中的二氧化硫残留量。5.3.4.4记录供试品称样量、碘滴定液的浓度、碘滴定液的耗用量、二氧化硫残留量的计算和结果。5.3.4.5结果判断本品二氧化硫残留量小于或等于150mg/Kg,判为符合规定。5.4浸出物照水溶性浸出物测定法(按《中国药典》2010年版一部附录XA)项下的冷浸法测定5.4.1仪器与用具漏斗、水浴锅、移液管、蒸发皿、恒温烘箱。5.4.2操作方法取鉴别项下粉末过二号筛后称定重量W样（约4g），置250ml的带塞锥形瓶中，精密加入水100ml，塞紧，冷浸，前6小时内时时振摇，再静置18小时，用干燥漏斗迅速滤过，精密量取滤液20ml，置已干燥至恒重W皿的蒸发皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥3小时，移置干燥器中，冷却30分钟，迅速精密称定重量W恒，以干燥品计算供试品的水溶性浸出物的含量（%）。5.4.3记录记录供试品取用量、浸出物的计算和结果计算公式：%100F）-（120/10浸出物皿-恒5.4.4结果判断本品的浸出物不少于65.0％。判为符合规定。5.5含量测定5.5.1仪器与用具高效液相色谱仪、容量瓶10ml、回流装置、分析天平、移液管5.5.2试剂与试液5.5.2.170%甲醇；取甲醇70ml，加水稀释至100ml。5.5.2.2梓醇对照品、毛蕊花糖苷对照品5.5.2.3乙睛、甲醇5.5.2.40.1%磷酸：取磷酸1g，加水稀释至1000ml。5.5.2.51%醋酸：取冰醋酸5ml，加水稀释至500ml。5.5.3操作方法某某中药饮饮片有限公司第6页共7页5.5.3.1梓醇照高效液相色谱法（按《中国药典》2010年版一部附录VID)测定5.5.3.1.1色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙睛-0.1%磷酸(1：99)为流动相；检测波长为210nm，理论板数按梓醇峰计，应不低于5000。5.5.3.1.2对照品溶液的制备取梓醇对照品适量W对，精密称定，加流动相制成每1ml含10ug的溶液，即得C对。5.5.3.1.3供试品溶液的制备取本品切成约5mm的小段，经80℃减压干燥24小时6后，磨成粗粉，取约0.8g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，加热回流1.5小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。精密取续滤液10ml，浓缩至近干，残渣用流动相溶解，移置10ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。5.5.3.1.4测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液10ul，注入液相色谱仪，测定，即得。5.5.3.1.5记录记录对照品浓度、对照溶液主峰面积S对、供试液的主峰的面积S供、样品称样量、含量的计算和结果。计算公式：%1001050/1SS梓醇的含量6供对对供供WCC5.5.3.1.6结果与判定本品按干燥品计算含梓醇应不得少于0.20%，判定为合格，反之，判定为不合格。5.5.3.2毛蕊花糖苷5.5.3.2.1色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键盘合硅胶为填充剂；乙睛-1%醋酸溶液（16：84）为流动相；检测波长为334nm。理论板数毛蕊花糖苷峰计算应不低于5000。5.5.3.2.2对照品溶液的制备取毛蕊花糖苷对照品适量，精密称定，用流动相制成每1ml含10ug的溶液（C对）。5.5.3.2.3供试品溶液的制备精密量取含量测定梓醇项下续滤液20ml，减压回收近干，残渣用流动相溶解，移置5ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。某某中药饮饮片有限公司第7页共7页5.5.3.2.4测定法分别精密吸取上述两种溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，即得。5.5.3.2.5记录记录对照品浓度、对照溶液主峰面积S对、供试液的主峰的面积S供、样品称样量、含量的计算和结果。计算公式：%100105/2050/SS含量6样对对供WC5.5.3.2.5结果与判定本品按干燥品计，毛蕊花糖苷的总量应不得少于0.020%，同时两结果标准偏差应不得过2.0%。判定为合格，反之，为不合格。5相关记录中药材检验记录：