臭椿抗烟草花叶病毒活性物质的分离与结构鉴定

福建农林大学硕士学位论文臭椿抗烟草花叶病毒活性物质的分离与结构鉴定姓名：谭庆伟申请学位级别：硕士专业：植物病理学指导教师：吴祖建20070401臭椿抗烟草花叶病毒活性物质的分离与结构鉴定作者：谭庆伟学位授予单位：福建农林大学相似文献(4条)1.期刊论文沈建国.张正坤.吴祖建.谢联辉.林奇英.SHENJian-guo.ZHANGZheng-kun.WUZu-jian.XIELian-hui.LINQi-ying臭椿抗烟草花叶病毒活性物质的提取及其初步分离-中国生物防治2007,23(4)以烟草花叶病毒为供试病毒,采用生物活性跟踪的方法对臭椿抗病毒活性物质进行了提取与初步分离.结果表明,臭椿乙醇提取物、甲醇提取物和丙酮提取物均有较好的抗烟草花叶病毒作用;通过系统溶剂提取、硅胶柱层析分离和活性筛选,从臭椿乙醇提取物的氯仿极性部位获得两个抗烟草花叶病毒活性组分Fr3与Fr6;经硅胶柱层析进一步分离,氯仿/甲醇梯度洗脱,得到4种相对较纯的活性成分C1、C2、C3、C4.生测结果显示,4种活性成分对烟草花叶病毒具有一定程度的抑制作用,但效果均低于原乙醇提取物,在活体条件下对烟草花叶病毒系统侵染的防治作用不明显.2.学位论文毕燕鸦胆子粗提物、臭椿粗提物和Y-D对TMV、CMV-RNA的抑制作用2008烟草花叶病毒(Tobaccomosaicvirus，TMV)在世界范围内都有分布，可侵染十字花科、茄科、菊科等多种植物，是具有经济重要性的植物病毒之一。黄瓜花叶病毒(Cucumbermosaicvirus，CMV)的寄主十分广泛，能侵染85科1000多种植物。TMV可以与CMV复合侵染，不仅造成植物品质的下降同时可以造成巨大的经济损失。TMV、CMV引起的病毒病不但危害严重，其防治也相当困难。鸦胆子(Bruceajavanica(L.)Merr)、臭椿(AilanthusaltissimaSwingle)均系苦木科(Simaroubaceae)植物果实，为传统中药。在本实验室以前的研究中，已经得出，在接种TMV6-8h后的普通烟K326，1.0mg/mL的鸦胆子和臭椿粗提物处理的病毒增殖抑制率分别为90.9％和89.4％；分别利用半叶法和叶碟法测定了鸦胆子素D的抗TMV侵染和增殖作用，结果为，在0.025mg/mL浓度下抗TMV侵染效果达到75％以上，而在2x10-3mg/mL的浓度下其抗TMV增殖作用仍达到60％。BrtlticineD(Y-D)、鸦胆子粗提物和臭椿粗提物对TMV有很好的抑制增殖的作用，为了研究Y-D、鸦胆子粗提物和臭椿粗提物对TMV核酸、CMV核酸在寄主体内的增殖情况的影响，本实验采用了semi-quantitiveRT-PCR的方法，对TMV-RNA的复制酶基因、外壳蛋白基因(CP)、运动蛋白基因(MP)、烟草内参基因(actingene)和CMV-RNA3分别进行了退火温度优化、Mg2+浓度优化、循环次数优化，进一步研究接种TMV6h的普通烟K326和接种CMV12h的假酸浆(Nicandraphysalodes(L.)Gaertner)，用Y-D、鸦胆子粗提物和臭椿粗提物对其处理48h，检测三种药剂对TMV、CMV的RNA的抑制作用。同时采用quantitivereal-timePCR的方法，检测Y-D对TMV-RNA、CMV-RNA的抑制作用，对TMV基因组、TMV-CP亚基因组和TMV-MP亚基因组的抑制率分别为93.04％、94.79％和95.82％。两种方法的结果是相同的，不仅确定了BruceineD、鸦胆子粗提物、臭椿粗提物对寄主体内的TMV-RNA的增殖有很强的抑制作用。同时证明了semi-quantitativeRT-PCR实验结果的正确性，证明了semi-quantitativeRT-PCR技术的可靠性，在相对定量的研究中，由于荧光实时定量PCR仪价格昂贵，当条件有限时，如果操作得当，半定量PCR法可以替代荧光定量PCR法，得到应用。但对CMV-RNA的抑制作用从实验结果看是抑制增殖作用不强，但并不能就此断定三种药剂对CMV没有抑制增殖的作用，也就不能做出BruceineD、鸦胆子粗提物、臭椿粗提物三种药剂对+ssRNA病毒在寄主体内不具有广谱的抑制作用，还可以从蛋白等方面进一步研究药剂的抗病毒作用。3.期刊论文沈建国.张正坤.吴祖建.谢联辉.林奇英.SHENJian-guo.ZHANGZheng-kun.WUZu-jian.XIELian-hui.LINQi-ying臭椿和鸦胆子抗烟草花叶病毒作用研究-中国中药杂志2007,32(1)目的:研究臭椿和鸦胆子的抗植物病毒作用.方法:以烟草花叶病毒(tobaccomosaicvirus,TMV)为供试病毒,采用局部枯斑法测定2种药用植物提取物对TMV侵染的抑制作用;叶碟法研究2种药用植物提取物的抗TMV增殖作用,并通过盆栽试验,测定2种药用植物提取物对烟草花叶病的防治作用.结果:臭椿和鸦胆子提取物不仅能有效抑制TMV侵染,而且对TMV的增殖也有明显抑制作用,并对烟草花叶病具有较好的防治效果.结论:臭椿和鸦胆子抗烟草花叶病毒作用显著,在抗植物病毒方面具有进一步研究和开发价值.4.学位论文沈建国两种药用植物对植物病毒及三种介体昆虫的生物活性2005植物中活性成分丰富，从植物中寻找抗病毒活性物质为植物病毒病的防治提供了一条新途径。本文以烟草花叶病毒(TMV)为供试病毒，采用局部枯斑法和叶碟法对我国78科164种药用植物抗病毒活性进行了系统筛选。从中筛选出具有显著抑制TMV侵染和增殖的药用植物两种，即臭椿和鸦胆子，对两种药用植物的抗病毒生物活性、作用机制、有效成分进行了研究，并初步探讨了两种药用植物抗病毒活性物质提取条件、稳定性、剂型加工以及对植物病毒介体昆虫的生物活性。本文链接：授权使用：苏延科(wfxnny)，授权号：62af23da-1813-456d-a49d-9e9200b2ad8b下载时间：2011年2月22日