第二章 提取、分离与鉴定的方法与技术5

第二章天然药物化学成分提取分离和鉴定的方法与技术第一节提取方法与技术第二节分离精制和鉴定的方法与技术第二章天然药物化学成分提取分离和鉴定的方法与技术第二节分离精制和鉴定的方法与技术一、系统溶剂分离法第二章天然药物化学成分提取分离和鉴定的方法与技术二、两相溶剂萃取法三、沉淀法四、结晶与重结晶法五、透析法六、分馏法七、色谱法学习目标：1.掌握沉淀分离法的原理和操作技术。2.熟悉常用沉淀分离法的类型和各种沉淀法的应用。三、沉淀法***概念：是指在天然药物提取液中加入某些试剂或溶剂，使某些成分生成沉淀从溶液中析出，从而获得有效成分或去除杂质的方法。依据加入试剂或溶剂不同，分为：酸碱沉淀法试剂沉淀法铅盐沉淀法1.酸碱沉淀法操作技术：往提取液中加入适量酸水(或碱水)，让欲分离成分生成盐溶解于酸水(或碱水)中，然后再加适量碱水(或酸水)，使其恢复为原来结构，形成沉淀而析出，最后经离心或利用与水不相混溶的有机溶剂将其萃取分出。适用范围：酸性、碱性或酸碱两性化合物的分离。特点：沉淀反应可逆。提示：①生物碱的分离②结构中含有-COOH或Ar-OH的化合物的分离③具有内酯结构的化合物的分离酸、碱、两性成分调节pH——改变分子存在状态——改变溶解度A．酸/碱法(酸提取碱沉淀法)：生物碱的提取、纯化B．碱/酸法(碱提取酸沉淀法)：黄酮、蒽醌等酚性成分的提取、纯化C.调节pH至等电点，沉淀蛋白质根据物质的溶解度差异进行分离——调节pHA．酸/碱法（酸提取碱沉淀法）——生物碱的提取、纯化H+BH+BOH-醇提物浸膏（B）药渣酸水提取液稀酸水提取（BH+）碱化沉淀（B）碱水液（水溶性杂质）（脂溶性杂质）药材（HA）药渣碱水提取液碱水提取（A-）酸化沉淀（HA）酸水液（水溶性杂质）（脂溶性杂质）B．碱/酸法（碱提取酸沉淀法）——黄酮、蒽醌等酚性成分的提取、纯化H+A-HAOH-2试剂沉淀法是利用某些成分能与某些试剂生成沉淀的性质，或利用某些成分在不同溶剂中溶解度的差异，通过加入特定试剂或溶剂，使生成沉淀而与其他成分达到分离的方法。操作技术：在提取液中加入某些特定试剂，使欲分离成分与加入的试剂生成沉淀或因溶解度降低面而沉淀析出，待沉淀完全后，滤过即得。适用范围：能与某些试剂产生沉淀或在不同溶剂中溶解度有差异的化学成分的分离。特点：沉淀反应可逆或不可逆。提示***：①生物碱沉淀试剂分离生物碱；②雷氏铵盐能与水溶性生物碱类生成沉淀，可用于分离水溶性生物碱与其它生物碱；③胆甾醇能和甾体皂苷沉淀，可使其与三萜皂苷分离；④水提取醇沉淀法，于水提浓缩液中加入乙醇使含醇量达80%以上，可使多糖（淀粉、黏液质、树胶、果胶等）、蛋白质沉淀。⑤醇提取水沉淀法，于醇提取浓缩液中加入10倍量以上水，可沉淀亲脂性成分。⑥明胶能沉淀鞣质，可用于分离或除去鞣质等。3铅盐沉淀法利用中性醋酸铅或碱式醋酸铅在水或稀醇溶液中能与许多物质生成难溶的铅盐或络盐沉淀而分离的方法。操作技术：通常将天然药物的水或醇提取液先加入醋酸铅水溶液，静置后滤出沉淀。再将沉淀悬浮于新溶剂中，通以硫化氢气体，使铅离子转为不溶性硫化铅而沉淀除去。适用范围：结构中具有邻二酚羟基和羧基的成分以及某些大分子中性成分等。特点：碱式醋酸铅的沉淀范围比中性醋酸铅更广。提示：①中性醋酸铅能与含有羧基及邻二酚羟基的酚酸类成分产生沉淀，如有机酸、氨基酸、蛋白质、黏液质、树胶、酸性树脂、酸性皂苷、鞣质、部分黄酮苷、蒽醌苷、香豆素苷和某些色素（花色苷）等。碱式醋酸铅沉淀的范围更广，除上述物质外，还能沉淀某些大分子中性成分，如中性皂苷、糖类、某些异黄酮及碱性较弱的生物碱等。②如沉淀为杂质，则可弃去；如沉淀为所要成分，则需进行脱铅处理。脱铅的方法：①通入硫化氢气体：脱铅彻底，但脱铅后溶液偏酸性，对某些遇酸不稳定成分要慎重，同时必须通入空气或二氧化碳将溶液中剩余的硫化氢驱除干净，以免它在处理溶液时参加反应。新生态的硫化铅多为胶体沉淀，能吸附药液中的有效成分，要注意用溶剂处理回收。②中性硫酸盐脱铅：用中性硫酸钠、硫酸铵等脱铅，但脱铅不彻底。③阳离子交换树脂脱铅：脱铅快而彻底，但分离生物碱时，因生物碱阳离子也能与阳离子交换树脂发生离子交换，故易造成生物碱损失，而且脱铅后的树脂再生也较困难。复习思考题1.沉淀法按所用沉淀剂不同可分为哪几种？各沉淀法可用哪些成分的分离？TheEnd