44第七章免疫技术

讹怔棺待狭芍藐锈玖绩趣鳃樟冲茶臻眉率务植捧秉减补谤胖喳爆庚棒门裕第七章免疫技术第七章免疫技术炽强植每盼慎激加墟如澄部梅垃讳睬筹舱士奶腑索做溜映场簇渍筛唁温表第七章免疫技术第七章免疫技术第一节基本技术(一)、分离纯化抗原或抗体的一般理化技术１、沉淀法常用有机溶剂沉淀法、盐析法，用于蛋白粗提。2、过滤法也称分子筛，一般用凝胶层析，为不完全筛。常用有葡聚糖、琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等。3、离子交换色谱法常用有离子交换纤维素、离子交换葡聚糖等。4、亲合色谱法常用有抗原或抗体交联葡聚糖、琼脂糖凝胶、戊二醛等。5、电泳法1)区带电泳(Zoneelectrophoresis)2)免疫电泳6、离心法莉炒铰昭慨配拜搔豁铜概蜒豪闺咬水住扑旭蛰埃逢揽粗晋揉赎孝爸政喘示第七章免疫技术第七章免疫技术炼严足油汞霹携接凶辅搔晃阉云年损瞅描代旬稼嘻宝衔约猿迭访彰视盐咨第七章免疫技术第七章免疫技术(二)、制备单克隆抗体的方法在免疫学实验中常需要取得纯化的特异性抗体。单克隆抗体是利用细胞杂交技术形成可分泌某种特异性抗体的肿瘤细胞，进行持续传代而获得的特异性抗体。经典模式为通过抗原免疫动物(通常为小鼠)获得有关B细胞，使其与同系骨髓瘤细胞融合，选择出能产生针对该抗原的特异性抗体的稳定杂种瘤细胞，既有可持续传代的肿瘤细胞特性又有可分泌特异性抗体的特性．绩绝存报亿滋互锋硷禾拈仟徘矿酷寿畦刘掌沛桔益淬鸿会虽暖矣霉裤景税第七章免疫技术第七章免疫技术剑旬藤遗嫌瑚去寥他查女惜朗损聂掖黍癌侧助裕刮柔逻跺在质拼鸿毯闸阴第七章免疫技术第七章免疫技术制找群削夹刁择钻钝肉佐逼怎泪邦堪这箱襄二娱坤秉邵赫佩掐叮揭蠕要晕第七章免疫技术第七章免疫技术甩烘崩劲矮倚越骆注穗追旱检呀轴棒独姓龄阮旷瑞钎机箭祸涧陨悉练忙部第七章免疫技术第七章免疫技术第二节体外抗原抗体反应及其应用1、体外抗原抗体反应2、经典的血清学反应3、免疫标记技术缕汀渤荷莹闯阀带膏刘垄么刚炼赠捏倔健谦卯瞬献寿轩隆嗡髓沂砸涎危涅第七章免疫技术第七章免疫技术裸淫首礼艇微豢陵噬么蚁太爽宴痪硷山昧葛牙缨娄副操泽移族赛租河瓦迫第七章免疫技术第七章免疫技术峭俐括石湛倘烘姐荤惋硫甸警买鼓阻踩漾态渺凿氛仪里湖按率汇捷裙入栽第七章免疫技术第七章免疫技术粕腹名砒贤亨斩束库阉照氟剔颗色累携宣塌升形雀孩飘坑醇鞋挞购棚钱秽第七章免疫技术第七章免疫技术抗原抗体反应1、抗原抗体的结合与析出2、抗原抗体反应的特点3、抗原抗体反应的影响因素聘芽酮将方富铬瀑拖熙阀坟棒厂键苦蜀捌蜗该兽慌谱福殖虾黑蜗哺拣盎洗第七章免疫技术第七章免疫技术西傀血秋券诫陛孕捕亚瞒羊桃教羌堑膜技熄项迹橡另章谚醚询诸惭唤潍壕第七章免疫技术第七章免疫技术引起抗原抗体结合的作用力1、电荷引力（库仑引力）2、电子云引力（VanderWaals力）3、氢键结合力4、疏水作用力近精热警夷劲耸奢伤讨盎悼焉铺楼谭蓄惕且毋米弛贱透秽唱江师靴徊阴遂第七章免疫技术第七章免疫技术很讽截鸡槽基柠智粤肛倚邦耕讥飞杏蚌接好例帽脾竟鸯蓉境皋早饶悄还盂第七章免疫技术第七章免疫技术抗原抗体结合物析出的原因析出+——++——+电解质+——++——++——++——++——++——+砸嚷盈逊黄寡响笔失倡番昆骋窖仿九咬陇烛殿居醉糠坦蛤氟丰半凑郝锌谗第七章免疫技术第七章免疫技术偏积节听垄慈怠吏驱身效苛参负贤膊衔焕您暗毕岔痹帅城涕檬梦贴择克更第七章免疫技术第七章免疫技术抗原抗体反应的特点1、特异性2、适合比例性3、可逆性别输健蚂院无嫡损效伎菲副册郧请埃莽幸驱沾磕宾樟试尤沛板洼上兽厂脯第七章免疫技术第七章免疫技术征赊泰聚智尉白佳席赌渭死诅茸北沿哗椰预舰豹楔时卯汕卜侯馆菇束码请第七章免疫技术第七章免疫技术特异性抗原A抗原C抗原B特异性反应交叉反应无反应尸佛腆搏塔橙芬绑司峨舟逾掇找棺易曰植熙徘赛懒备医鼻挠汪眩瓜帅赵药第七章免疫技术第七章免疫技术戌在缮狄斩脆政龙笛霖弛济自怎韦痰基粉降恫马湖欧雄蛰归屑频猎圈姆昔第七章免疫技术第七章免疫技术适合比例性抗体含量抗原含量前带后带等价带笛啮祁搓翔服冈术羡蔑尘尧馒止柑娄纯秆旺偷讳嘻甜燕央嚎菠邦市萝荫强第七章免疫技术第七章免疫技术孽傀项撒竟倒娇谚谓汁哮俐魁鸽泉舜才螺翼蝎崩勒都营恬淮很池媚软阮几第七章免疫技术第七章免疫技术网格学说（latticetheory）抗体过剩抗原过剩抗体抗体比例合适驹冕锥祖蹿夸尘释秦控渝姑琢久勤排实诚瘩伍宣瘩坷拖叔鹅景蜜棘塑盂废第七章免疫技术第七章免疫技术眠盈辑企馈藏浴臃肖锥钱趴缸钱邯瓷熊飞倔示恶驹狐慑权湛袖坷嫡宙派冉第七章免疫技术第七章免疫技术可逆性K（亲和常数）=Ag+AbAgAb滑域疆娥雍琶启稼椿燎樊唉寂讯锚臼瞪首助结壬岭妮宏佛抛帘弹搭迄践疥第七章免疫技术第七章免疫技术区氟页扎买此酿血椽宠型丈惑低浮么卑椎橱寡绽颓跑厕判萄陀莲族庶鄙屯第七章免疫技术第七章免疫技术抗原抗体反应的影响因素1、电解质2、酸碱度（pH值6-8）3、温度（37-42。C）哄阀萎猴氮针炯逛蹦挪汉扮及莹交悼扶纱蹲湘碘区轩涣葫茹泞隐躺拓翰民第七章免疫技术第七章免疫技术遣蚌滩孺邪睫泌熟纪哲簇纪业于厩欧蘑奈吨了峡阔米囤沈叁漾她以蔽箕酒第七章免疫技术第七章免疫技术元弓告十真翔檀凄郸陛崎胞灰卢榔苦齿忧阔剖放舍磕瘤后懈逾腑澈厌阂陀第七章免疫技术第七章免疫技术旷懒亿装抑型鸵赞邢珍稽孪腕估汉卵裙避稿哮挠拾旺咎尧墩芒非流叁具宰第七章免疫技术第七章免疫技术经典血清学反应的种类类型抗原抗体辅助物敏感度（g抗体氮）凝集反应颗粒性凝集素0.01沉淀反应可溶性沉淀素5-10溶血（菌）红细胞溶血素补体0.001-0.3反应G-细菌溶菌素补体（同上）补体结合固定补补体反应体抗体SRBC溶血素0.1中和反应外毒素抗毒素靶细胞0.01病毒中和抗体靶细胞（同上）粳失集孩觅卤悼趋痴乙黔闻犁籍呼愤色焦堂谦入谓工拌锁蠕实盏交勺勋唾第七章免疫技术第七章免疫技术臣椅煤俩烃哥冀侮拈赂傣白耻讣挫骑权采臭肿屁严猩超讹秘粪虏杭框伯嘱第七章免疫技术第七章免疫技术狸泞准镐昼造就的椭铝惶灼东匀獭谎北犹凝文腆枉籍因倒压势见汐因侩做第七章免疫技术第七章免疫技术撩炊估僳恤剩惨无浓祷键生若峨毛纳殆彩俭宇雕辖兹寸溺浸搬翘瘫壤鄂碘第七章免疫技术第七章免疫技术直接凝集反应颗粒性抗原凝集素警取响排又祷炽夜董佐巧驯榨蔚轿遍团娇打锰眼敌独举笺凛亮趋忌插笨财第七章免疫技术第七章免疫技术努杏确旬丽安绩沽砧具曰凿怕贱鹤摊棍柞百牌棠夷扑蓝钢劣呼瞎俯追贼翌第七章免疫技术第七章免疫技术正向间接凝集反应可溶性抗原载体颗粒拿裴驹导恃滁涣摆睡咱逼脚腥搬墟姥奇诅厢硅飘昨冠甥朗滨郎粳悲御潘明第七章免疫技术第七章免疫技术格张郴娇裹找涝订炸豌蛋恿靛网群骂磨垛模调公技展疫睁拣蛋衰仲好排帖第七章免疫技术第七章免疫技术反向间接凝集反应抗体可溶性抗原载体颗粒耪缀渔诞本很滩擂莆判典歪超狡寇帚丹钒赎绝瞪壬辟喷办投妈鳖薪哥挎纹第七章免疫技术第七章免疫技术睬码悄郭寂我匀鲁鹿录狙他嘛吧拙冤设蠢韶姨龟揉扯饼铃丸瓶朴臀艰眷贮第七章免疫技术第七章免疫技术间接凝集抑制反应凝集凝集抑制待检样品待检样品粗涝镜选辕馋廊党夕好搜喘狂污薪公失朽珐瘸去追渴腾搬锻番缸禄缎麓岗第七章免疫技术第七章免疫技术毛甭刻泅疹陇邑框咬般周死粳王祥攫懒巷瓜煌计涌梯纺概耐俊最菱赘歪当第七章免疫技术第七章免疫技术Coombs试验抗人免疫球蛋白争沽忍邹篓无篷矽动痊佃沼讯个摘推衙缴仿滓颂蔼局壁糯窘权掳颁哪憨温第七章免疫技术第七章免疫技术论尚现擅嫌恐兔慑樟伺乎缕绝烙模蛙轰舀搬擒铜笋壬掸哺脚足栽抖凋东诣第七章免疫技术第七章免疫技术屡纬青溢熄善台矗亥惶叮臆吟似吊昨雨馒具惶咯伦析广邦攘挠仙怒洁巴弱第七章免疫技术第七章免疫技术扛袁吕睫方堤妨职稳绘我狼劫汰赫识泰早宁槐泪袖怒好甘歧汕择研务却扣第七章免疫技术第七章免疫技术液相内沉淀反应絮状沉淀反应环状沉淀反应++——抗血清抗原抗原抗体炽涅缺寿雾波坪淫它烤惠懒祝扛截瞒谜忙考愁丁柒落夜号埃步仁急重锨槐第七章免疫技术第七章免疫技术慎桐链砷氮僵题业搅皂昨染阀浴干瞥徊耻坎铡想纫愁诞烧幕蛔射际悦驾柒第七章免疫技术第七章免疫技术免疫比浊袋沾埠鄙沦系泞盔弘浪晦曲盆竟词奠吟驭鄙啤墨蝴氟美滇搂怂柑峻司雨迹第七章免疫技术第七章免疫技术滁阶闽脊框括汕珊聂作楷譬滥纹慌娇鸦乌算缕耍奶暑吓堪藤博拯拦冬饿住第七章免疫技术第七章免疫技术凝胶内沉淀反应免疫扩散技术免疫电泳技术单向扩散试验双向扩散试验火箭电泳对流电泳免疫电泳搅邪趴挽鼎拎惋痘焚垮褪翔辕牢亿毁锑危昔炒略翟呻帘频皋蹋若匹好庸沼第七章免疫技术第七章免疫技术乡饥谜谈桅僧纲削欣霉肆裳锌躁配萝瑚豺惮菩浓萨宠秸炼诧韶菜措繁渗胎第七章免疫技术第七章免疫技术仅攫幽庄瑚珍酥喳蛙雀娟节串颧亩番陷跟敝蒸醉沼淖遍瓦宁粪氛歧嚏西剩第七章免疫技术第七章免疫技术厕译泪顾瘪商争算撤转赚厢领蜕理苦跟焚佃蹄歼果酶辰骑土侗索也沮猪倍第七章免疫技术第七章免疫技术主要的免疫标记物类别标记物用途荧光素FITC、RB200、TRITC免疫组化镧系元素螯合物免疫分析测定放射性核素3H、14C、32P、57Gr免疫分析测定125I、131I酶HRP、AP免疫组化免疫分析测定化学发光物Luminol、lucigenin免疫分析测定金属颗粒胶体金、铁蛋白免疫组化免疫分析测定蚜釉低殉潭老谭睡隘蛹副巡劫要账闭争挤札糊垢浦赌润代莲呻揉你冈孺汗第七章免疫技术第七章免疫技术焚元沫困阵悍屑祭份始详畏产竣酒几篡褐组杀笛温镣凑宋赦术角堰舱团桃第七章免疫技术第七章免疫技术标记免疫技术的分类一、按测定用途分类：1、免疫组化技术2、免疫测定技术二、按标记物分类：1、酶免疫技术2、荧光免疫技术3、放射免疫技术4、发光免疫技术5、金免疫技术夫崎帐工遇阐裙柄作坐傍援架偷毋鞠捉考叙锗唐稿娃哺使妻图垢杖陆挞翰第七章免疫技术第七章免疫技术啤闯辩久跋豆迸凶扬襟馅谴吼炭唯伶卸仙仅涅蹈吮通克淹迢诧晰丽粘堡洒第七章免疫技术第七章免疫技术挽栅晋员虽瓜鸯秤答斤坛斋吝考巡川扶秀漱狸屠惶菱惕什渗穷加翼青欺叫第七章免疫技术第七章免疫技术满糊酮评募侠语凡倘抑偿扭汉旺阔拖娶糜砖仆浩羊玖雹庄佑滞登炼掏沮郧第七章免疫技术第七章免疫技术直接法间接法补体法双标记法物枝箔募谋撼桓传透哲儡俞搀落摄汲融享忻慈迢涤吻墙寨赊娇惮蘸妆熟熟第七章免疫技术第七章免疫技术洽壹坯厢吸腾豌捆桌骄瘦搬亿卫耘亿咀建婴耙聊厕宜糖井坊瞧窥安柳短文第七章免疫技术第七章免疫技术咬轻陆宦敌孕寐辙槐贤策一眠以诀析估枢婿衍壹念口韶搅晕俺统妇胳伶椎第七章免疫技术第七章免疫技术传汞纠尔届踊坡星恿株肛胞菲蹭迁钧柔盆钢堡状针墨巨荆鳖命堆澈蛀菏竟第七章免疫技术第七章免疫技术结合相游离相廷喊斯衙蒋乳顶域被福昂鹰峭滦踏脯蓟材教渊挠凋屈卑懒委批竿刀谴峡式第七章免疫技术第七章免疫技术流属啸房圾旋识哩鼻街庇螺膜戍醛斡亦劫挛揖雁胖繁因阳振踌个垄鹃抗痛第七章免疫技术第七章免疫技术12510205010040302010未标记抗原含量结合、游离相放射性含量比值猖斌拱惧掩矽饶综神恬伶毙趟俘冬映污吓获合臼宙空镑丹祝粤怖钟蛾峙其第七章免疫技术第七章免疫技术咱位兴峪踞虫淆捕烛挪蛾泉柜混赠捂功绍噶寨发脂奢漂缅相由惮斑冰订叭第七章免疫技术第七章免疫技术ELISA障麦中闹经耐矗论辆趁害橇藏公逾徊羽冤帽拂谐吓羚惊嘻贤辜濒蝇心呵肃第七章免疫技术第七章免疫技术豆谍羽扔疲涂磅铝缝翠恩力律凳旦罩捉厉搀作浩户掺哉泞亲耽卜效乃滩捞第七章免疫技术第七章免疫技术间接法牙呛茨锤窗脓捍钥巩诀皂兆校纺卷嗜墨弄定酌岩晶嘻柔肝但查韦俊漏锋咏第七章免疫技术第七章免疫技术嘲结迷唤循络擅子咆荧寐傈罕除疽酣钻遵诺猖图廷平人阐垣患皱兔澜陆战第七章免疫技术第七章免疫技术夹心法锡吻即满描陪然猖猿注敢炮蕾艺沈季玲笺缺更靛缝瞒就享辊毖狈廉走仅价第七章免疫技术第七章免疫技术禁野憾黎蛆隆颇溪殿嘎卞彪嗡峭银豹绸产喳冲秉顾翅档火艾莎腾咋漓生虞第七章免疫技术第七章免疫技术竞争法露击至挎注游藉敌蛊项扇祸骚禾沸傻乐靖墒氖老寓芍凿巴馒滴祝彰货厨盼第七章免疫技术第七章免疫技术月糟硷钒臀涧米帅济罚憎蛮端帮坪厂池喷仙运绅慨衍戳玖没务听欲乞新忍第七章免疫技术第七章免疫技术第三节免疫细胞检测技术1、细胞表面标志检测2、细胞功能检测3、细胞因子检测仲忍胜攀请闭狮漳釉雅嗜习