组织分离培养母种、母种的转管

组织分离培养母种德化鹏祥中学母种的转管组织分离培养母种组织分离培养母种母种的来源包括从有关部门引种，以及采用组织分离和孢子分离等方法。用于组织分离的种菇，要选择头潮菇，外观好、大小适中、菌肉肥厚、尚未弹射孢子、无病虫害的菇体。弹射孢子的菇用于组织分离的种菇组织分离实验一、实验用具：酒精灯1盏、火柴1盒、解剖刀1把、75%酒精1瓶、接种铲1把、酒精棉球10粒、培养皿2个。组织分离实验二、实验材料：种菇2朵、试管斜面培养基4支。组织分离实验三、方法步骤：1、清除种菇表面及菇脚的杂物，再用75%酒精消毒种菇表面、双手及接种工具。组织分离实验2、点燃酒精灯，用手把种菇沿柄纵向掰开，使子实体成对等的两半（也可用解剖刀切开），用经灼烧灭菌冷却后的接种铲在菌柄与菌盖交界处挑取大小约为10mm3的组织块，迅速转接到试管斜面培养基上，然后用酒精灯火焰对试管口和棉塞进行灭菌处理，再塞上棉塞。组织分离实验3、将接种好的试管置于26~28℃的温度下培养，7~10天菌丝即可长满试管。培养过程中，每天检查，发现污染应及时拣出，选择菌丝生长旺盛的试管用来转管。母种的转管引进或分离获得的母种数量有限，往往不能满足生产的需要，因此要对初次获得的母种进行扩大繁殖，以增加母种数量。将试管菌种接到新的试管斜面培养基上扩大繁殖，称为转管。母种的转管一、实验用具：酒精灯1个、火柴1盒、接种钩1把、接种铲1把、镊子1把、酒精棉球10粒（装在广口瓶中）。组织分离实验二、实验材料：母种试管1支、试管斜面培养基4支。母种的转管三、方法步骤：1、接种前，先将接种工具和培养基放入接种箱，用紫外灯消毒30分钟（用紫外灯消毒时，人应离开接种室，并在关灯30分钟后方可进入接种室）。洗净双手，擦干，用75%酒精棉球擦拭；接着点燃酒精灯，右手拿起接种铲或接种钩，用火焰灼烧灭菌，待其冷却。母种的转管2、左手并握母种试管和斜面培养基试管；右手拿接种铲或接种钩，用右手小指、无名指和手掌拔掉棉塞，夹在其间，迅速用火焰封口。然后右手将接种铲或接种钩通过火焰伸入母种试管，在斜面培养基菌体上挑取少量菌种（稍带培养基），迅速接入试管斜面培养基的中央，并轻轻地按压，以防滑动。棉塞经火焰消毒后塞进试管口。母种的转管3、将接种后的母种试管，贴上标签，在试管棉塞外包裹报纸或牛皮纸，捆扎在一起，放在26~28℃的恒温培养箱中培养。待菌丝长满试管后（一般7~15天），可用来制作原种。母种的转管4、注意事项：严格按照无菌操作常规进行。德化鹏祥中学