用活性饲料养鱼实验方案

用活性饲料养鱼实验方案饲料对水质的影响实验BOD和COD的检测原理及方法BOD检测原理：生化需氧量是指在规定条件下微生物分解存在水中的某些可氧化物质，特别是有机物所进行的生物化学过程中消耗溶解氧的量。BOD5是指在20℃培养5d分别测定样品培养前后的溶解氧，二者之差即为BOD5值，以氧的mg/L表示。仪器：恒温培养箱、20ml系口玻璃瓶、1000ml量筒、玻璃搅棒（棒的长度长于普通玻璃棒，在棒的底端固定一个直径比量筒底小，并带有几个小孔的硬橡胶板。）溶解氧瓶（250ml，带有磨口玻璃塞并且有供水封用的钟形口）移液管（供分取水样和添加稀释水用）试剂：1、磷酸盐缓冲溶液：将8.5g磷酸二氢钾，21.75g磷酸氢二钾，33.4g七水合磷酸氢二钠和1.7g氯化铵溶于水中，稀释至1000ml，此溶液的pH值应为7.22、硫酸镁溶液：将22.5g七水合硫酸镁溶于水中，稀释至1000ml。3、氯化钙溶液：将27.55无水氯化钙溶于水，稀释1000mL4、氯化铁溶液：将0.25g六水合氯化铁（FeCl3·6H2O）溶于水中稀释至1000ml5、盐酸溶液：将40ml（=1.18mg/l）盐酸溶于水，稀释至1000ml6、氢氧化钠溶液：将20g氢氧化钠溶于水中，稀释至1000ml。7、亚硫酸钠溶液：将1.575g亚硫酸溶于水中，稀释至1000ml，需现用现配。8、葡萄糖-谷氨酸标准溶液：将葡萄糖和谷氨酸在130℃干燥1h后，各称取150mg溶于水中，移入1000ml容量瓶内稀释至标线，混合均匀。此标准溶液临用前配制。9、稀释水：在5-20L玻璃瓶内装入一定量水。控制水温在20℃左右，然后用无油空气压缩机，将吸入的空气经活性碳吸附管及洗涤管后，导入稀释水内曝气2.8h。使稀释水中的溶解氧接近饱和。放置于20℃培养箱中放置数小时。使水中的溶氧达到8mg/l左右，临用前每升加入氯化钙、氯化铁溶液、硫酸镁溶液、磷酸盐缓冲液1ml，并混合均匀的PH值为7.2。其BOD5应为小于0.2mg/l.10、接种液：城市污水，在室温下放置一昼夜，取上清液使用。11、接种稀释水：分取适量接种液，加入稀释水中混匀。每升稀释水中接种液加入量为：生活污水1～10ml.接种液配置后立即使用。步骤：1、水样的预处理2、调节pH值3、保持20℃的水样温度。4、水样测定：按照选定的稀释比例，用虹吸沿筒壁先引入部分稀释水于1000ml量筒中。加入需要量的均匀水样。再加入稀释水至800ml，搅拌时防止出现气泡。另外取两个溶解氧瓶用虹吸法装满稀释水作为空白试验，测定5d前后的溶解氧。不经稀释直接培养的水样：BOD5（mg/L）＝c1-c2式中：c1—水样在培养前的溶解氧浓度（mg/L）;c2—水样经5d培养后，剩余溶解氧浓度（mg/L）。经过稀释后的水样计算：BOD5（mg/L）＝（(c1-c2)-(B1-B2)f1）/f2式中：B1—稀释水在培养前的溶解氧；B2—稀释水在培养后的溶解氧；f1—稀释水在培养液中所占的比例；f2—水样在培养液中所占的比例。COD检测操作细则（重铬酸钾法）原理:在强酸性溶液中，用一定量的K2CrO7氧化水中还原性物质，过量的K2CrO7以试亚铁灵作指示剂，用(NH4)2Fe(SO4)2溶液回滴。根据(NH4)2Fe(SO4)2的用量算出水样中还原性物质消耗氧的量仪器:回流装置(带250ml锥形瓶的全玻璃回流装置)、加热装置（编阻电炉）、50ml酸式滴定管试剂：1、重铬酸钾标准溶液（1/6K2CrO7=0.2500mol/l）:称取预先在1200C烘干2h的基准或优级纯K2CrO712.258g溶于水中，移入1000ml容量瓶，稀释至标线，摇匀。2、试亚铁灵指示液：称取1.485g邻菲啰啉，0.695g硫酸亚铁溶于水中，稀释至100ml，贮于棕色瓶内。3、(NH4)2Fe(SO4)2标准溶液：称取39.5g(NH4)2Fe(SO4)2于水中,边搅拌边缓慢加入20ml浓硫酸，冷却后移入1000ml容量瓶中，加水稀释至标线，摇匀。临用前，用重铬酸钾标准溶液标定。标定方法：准确吸取10.00ml重铬酸钾标准溶液于500ml锥形瓶中，加水稀释至110ml左右，缓慢加入30ml浓硫酸，混匀。冷却后，加入3滴试亚铁灵指示液（约0.15ml）,用(NH4)2Fe(SO4)2溶液滴定，溶液的颜色由黄色经蓝绿色至红褐色即为终点。C[(NH4)2Fe(SO4)2]=0.2500×10.00/V式中：C—(NH4)2Fe(SO4)2标准溶液的浓度（mol/l）；V—(NH4)2Fe(SO4)2标准滴定溶液的用量（ml）。4、H2SO4-Ag2SO4溶液：于2500ml浓H2SO4中加入25gAg2SO4。放置1～2d，不时摇动使其溶解。（或在500ml浓硫酸中加5gAg2SO4）。5、Hg2SO4：结晶活粉末。步骤：1、取20.00ml混合均匀的水样至于500ml磨口的回流锥形瓶中，准确加入10.00ml重铬酸钾标准溶液及数粒洗净的玻璃珠或沸石，连接磨口回流冷凝管，从冷凝管上口慢慢加入30mlH2SO4-Ag2SO4溶液轻轻摇动锥形瓶使溶液混匀，加热回流2h（自开始沸腾时计时）。2、冷却后，用90ml水从上部慢慢冲洗冷凝管，取下锥形瓶。溶液总体积不得少于140ml，否则因酸度太大，滴定终点不明显。3、溶液再度冷却后，加3滴试亚铁灵指示液，用(NH4)2Fe(SO4)2溶液滴定，溶液的颜色由黄色经蓝绿色至红褐色即为终点，记录(NH4)2Fe(SO4)2溶液的用量。4、测定水样的同时，以20.00ml重蒸馏水，按上述步骤作空白试验。记录滴定空白时(NH4)2Fe(SO4)2标准溶液的用量。计算：CODCr(O2,mg/L)=(V0-V1)·C·8·1000/V式中：C—(NH4)2Fe(SO4)2标准溶液的浓度（mol/l）；V0—滴定空白时(NH4)2Fe(SO4)2标准溶液用量(ml)；V1—滴定水样时(NH4)2Fe(SO4)2标准溶液用量(ml)；V—水样的体积(ml)；8—氧（1/2O）摩尔质量（g/mol）。溶解氧的测定:实验原理：利用水中溶解氧氧化Mn2+后用I－还原，然后用碘量法滴定生成的碘。有关化学方程式：2Mn2++2OH—+O2===2MnO(OH)2↓MnO(OH)2+4H++2I—===Mn2++I2+3H2OI2+2Na2S2O3===Na2S4O6+2NaI实验仪器和药品：仪器：铁架台（铁夹）、酒精灯、石棉网、烧杯、锥形瓶、酸式滴定管、碱式滴定管、铁圈、滴定管夹、试剂瓶、漏斗、滤纸、玻璃棒、容量瓶、精密天平、25ml量筒固体：MnSO4、KIO3、Na2S2O3、NaI、可溶性淀粉溶液：6mol/LNaOH、1mol/LHCl、新鲜水样实验准备：１、配制溶液。MnSO4：称取药品1.000克，用250ml容量瓶配制，转移至试剂瓶。KIO3：准确称取药品0.4280克，用250ml容量瓶配制成0.008000mol/L的溶液，转移。Na2S2O3：称取药品1.000克，用500ml容量瓶配制，转移。可溶性淀粉：用大烧杯盛半杯蒸馏水，煮沸，再在小烧杯中用蒸馏水溶解淀粉成糊状，并搅拌均匀，在大烧杯煮沸时加入，搅拌均匀后冷却。NaI：在大烧杯中加入药品，加蒸馏水配制成溶液。２、标定Na2S2O3浓度。用量筒量取一定量KIO3标准溶液，加入过量NaI和HCl，然后加入几滴淀粉溶液，用Na2S2O3滴定，记录消耗的Na2S2O3体积，重复一次。Na2S2O3浓度=KIO3体积×KIO3浓度×6/Na2S2O3体积３、取新鲜水样100ml，过滤，转移至锥形瓶，加盖静置。实验步骤：1、取过滤好的新鲜水样25ml，加入NaOH和过量MnSO4，静置。2、待溶液不再变色，加入HCl和过量NaI，振荡后静置。3、加入少量淀粉溶液后用Na2S2O3滴定。实验现象：加入NaOH后再加入MnSO4，溶液颜色逐渐变黄，出现沉淀。加入HCl和NaI后，溶液颜色逐渐加深，变成棕黄色。加入淀粉后溶液变蓝，滴定至终点后溶液呈无色。氨基氮的测定：原理氨基酸是两性电解质，在水溶液中有如下平衡：－NH3是弱酸，完全解离时PH为11－12或更高，若用碱滴定－NH3所释放的H＋来测定氨基酸，一般指示剂变色域小于10，很难准确指示滴定终点。常温下，甲醛能迅速与氨基酸的氨基结合，生成羟甲基化合物，使上述平衡右移，促使－NH3释放H＋，使溶液的酸度增加，滴定中和终点移至酚酞的变色域内（PH9.0左右）。因此可用酚酞作指示剂，用标准氢氧化钠溶液滴定。如样品为一种已知的氨基酸，从甲醛滴定的结果可算出氨基氮的含量。如样品为多种氨基酸的混合物如蛋白质水解液，则滴定结果不能作为氨基酸的定量依据。但此法简便快速，常用来测定蛋白质的水解程度，随水解程度的增加滴定值也增加，滴定值不再增加时，表明水解作用已完全。仪器、试剂、材料1.仪器25ml锥形瓶；3ml微量滴定管；吸管；研钵。2.试剂(1)300ml0.05mol/L标准甘氨酸溶液准确称取375mg甘氨酸，溶解后定容至100ml。(2)500ml0.02mol/L标准氢氧化钠溶液(3)20ml酚酞指示剂0.5％酚酞的50％乙醇溶液(4)400ml中性甲醛溶液在50ml36－37％分析纯甲醛溶液中加入1ml0.5％酚酞乙醇水溶液，用0.02mol/L的氢氧化钠溶液滴定到微红，贮于密闭的玻璃瓶中。操作方法3.取3个25ml的锥形瓶，编号，向1、2号瓶内各加入7ml样品水。向3号瓶内加入7ml水。然后向三个瓶中各加入5滴酚酞指示剂，混匀后各加2ml甲醛溶液再混匀，分别用0.02mol/L标准氢氧化钠溶液滴定至溶液显微红色。重复以上实验两次，记录每次每瓶消耗的标准氢氧化钠溶液的毫升数。取平均值。4.取未知浓度的甘氨酸溶液2ml，依上述方法进行测定，平行做几份，取平均值。计算每毫升甘氨酸溶液中含有氨基氮的毫克数。结果处理5.氨基氮计算：氨基氮（毫克/毫升）=（V未－V对）×NNaOH×14.0082公式中V未为滴定待测液耗用标准氢氧化钠溶液的平均毫升数。V对为滴定对照液（3号瓶）耗用标准氢氧化钠溶液的平均毫升数。NNaOH为标准氢氧化钠溶液的摩尔浓度。氢氧化钠的标定：原理：固体氢氧化钠具有很强的吸湿性且易吸收空气中的水分和二氧化碳，因而常含有Na2CO3，且含少量的硅酸盐、硫酸盐和氯化物，因此不能直接配制成准确浓度的溶液，而只能配制成近似浓度的溶液然后用基准物质进行标定，以获得准确浓度。由于氢氧化钠溶液中碳酸钠的存在，会影响酸碱滴定的准确度，在精确的测定中应配制不含Na2CO3的NaOH溶液并妥善保存。由反应可知，1mol邻苯二甲酸氢钾与1molNaOH完全反应。到化学计量点时溶液呈碱性，PH约为9，可选用酚酞做指示剂，滴定溶液由无色变为浅粉色，30s不褪色即为滴定终点。操作步骤：在分析天平上称取三份一在105-110℃烘过两小时的基准物质邻苯二甲酸氢钾0.4-0.6g于250ml锥形瓶中，各加25ml煮沸后刚刚冷却的水使之溶解（如没有完全溶解，可稍微加热）。冷却后滴加2滴酚酞指示剂，用欲标定滴定的氢氧化钠溶液滴定至溶液由无色变为微红色30s不褪色即为终点，记下氢氧化钠溶液消耗的体积。要求三份标定的相对平均偏差应小于0.2%。计算：C(NaOH)=m（邻苯二甲酸氢钾）/{204.22*V（氢氧化钠）}注意事项6.标准氢氧化钠溶液应在使用前标定，并在密闭瓶中保存。不可使用隔日贮在微量滴定管中的剩余氢氧化钠。7.中性甲醛溶液在临用前配制，若已放置一段时间，则使用前需要重新中和。8.本实验为定量实验，氢氧化钠的浓度要严格标定，加量要准确，全部操作要按分析化学要求进行。饲料的成分检测：真蛋白的测定：氢氧化钠、五水硫酸铜、硫酸（不含氮）、无水硫酸钠、硼酸、甲基红、溴甲酚绿、乙醇、盐酸溶液的配制：2.5%的氢氧化钠溶液；40%的氢氧化钠溶液；1%的硼酸溶液；10%的硫酸铜溶液(称取五水硫酸铜10g加水溶解定容至100mL，混匀即可)混合催化剂：6g无水硫酸钠，0.4g五水硫酸