甘氨酸的一般杂质检查

氨基酸检测甘氨酸的一般杂质检查夏小落一、背景知识•甘氨酸：英文名称：glycine;Gly•定义：学名：2-氨基乙酸。非手性分子，最简单的天然氨基酸。L-甘氨酸是蛋白质合成中的编码氨基酸，哺乳动物非必需氨基酸，在体内可以由葡萄糖转变而来，因具有甜味而得名。白色结晶或结晶性粉末。符号：G•分子式：C2H5NO2，分子量：75.07，相对密度1.595•熔点182℃，沸点：233°C，等电点是5.97•在分子中同时具有酸性和碱性官能团，在水溶液中为强电解质，在强极性溶剂中溶解度较大，基本不溶于非极性溶剂，而且具有较高的沸点和熔点，通过水溶液酸碱性的调节可以使甘氨酸呈现不同的分子形态。甘氨酸结构式•在中枢神经系统，尤其是在脊椎里，甘氨酸是一个抑制性神经递质。•用作生化试剂，用于医药、饲料和食品添加剂，氮肥工业用作无毒脱碳剂•用于制药工业、生化试验及有机合成•在农药生产上用于合成拟除虫菊酯杀虫剂的中间体甘氨酸乙酯盐酸盐，也可合成杀菌剂异菌脲和除草剂固体草甘膦•营养增补剂。主要用于调味等方面•用作缓冲剂，用于组织培养基的制备，铜、金和银的检验，医药上用于治疗重症肌无力和进行性肌肉萎缩、胃酸过多、慢性肠炎、儿童高脯氨酸血症等疾病。人体若摄入甘氨酸的量过多，不仅不能被人体吸收利用，而且会打破人体对氨基酸的吸收平衡而影响其它氨基酸的吸收，导致营养失衡而影响健康。以甘氨酸为主要原料生产的含乳饮料，对青少年及儿童的正常生长发育很容易带来不利影响。一、药物的杂质•杂质：任何影响药物纯度的物质均称为杂质•杂质检查的意义中药制剂的杂质一般是指无医疗作用且能影响制剂质量的或对人体产生危害作用的物质。•《中国药典》2005年版对杂质检查作出重大修订,收载了原子吸收分光光度法、电感耦合等离子体质谱法等先进技术,对重金属、砷盐等危害人体健康的杂质进行检测；增加了有机磷类农药、除虫菊酯类农药残留量的检查项目。使杂质检查的整体水平和质量得到显著的提高。杂质的来源（三个方面）1、是由中药材原料中带入；2、是在生产制备过程中引入；3、是贮存过程中受外界条件的影响而使中药制剂的理化性质改变而产生的。杂质的限量检查：药物中所含杂质的最大允许量，称杂质限量杂质的分类•一般杂质：是指自然界中分布比较广泛,普遍存在于药材之中,易在中药制剂的生产过程中引入的杂质。如酸、碱、硅酸盐(泥沙)、氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属、砷盐、有机氯类农药、甲醇等。它们的检查方法均在《中国药典》05年版附录中加以规定。•特殊杂质：是指在制剂生产和贮存过程中,可能引入或产生的某种(类)特有杂质,而非大多数制剂普遍存在的。这类杂质被列入《中国药典》2005年版中有关品种检查项下。例如,大黄流浸膏中的土大黄苷、阿胶中的挥发性碱性物质和附子理中丸中的乌头碱等。杂质限量计算•药物中允许杂质存在的最大量•百分之几•百万分之几•杂质限量计算%100样品量杂质最大允许量杂质限量%100%100SCVLSCVL）样品量（）标准溶液的浓度（）标准溶液的体积（）杂质限量（药物的杂质与限量杂质量≤杂质限量＜杂质量药品合格药品不合格限量检查法三种检查方法比较法灵敏度法标准对照法灵敏度法：不得有正反应出现特点：不需对照品比较法：测旋光度、吸光度不得超过标准规定特点：不需对照品标准对照法：供试品溶液与对照品，溶液同条件处理后，比较结果特点：不需知道杂质，准确含量二、实验原理•1、氯化物检查法：氯化物在硝酸溶液中与硝酸银作用，生成氯化银沉淀而显白色浑浊，与一定量的标准氯化钠溶液和硝酸银在同样条件下用同法处理生成的氯化银浑浊程度相比较，测定供试品中氯化物的限量。反应离子方程式：Cl-+Ag+→AgCl↓（白色）•2、硫酸盐检查法：药物中微量硫酸盐与氯化钡在酸性溶液中作用，生成硫酸钡沉淀而显白色浑浊液，同一定量标准硫酸钾溶液与氯化钡在同样条件下，用同法处理生成的浑浊比较，判断药物中含硫酸盐的限量。反应离子方程式：SO42-+Ba2+→BaSO4↓(白色)3、铁盐检查法：三价铁盐在硝酸酸性溶液中与硫氰酸盐生成红色可溶性的硫氰酸铁络离子，与一定量标准铁溶液用同法处理后进行比色。反应离子方程式：Fe3++3SCN-→Fe（SCN）3（红棕色）三、试剂与仪器•(1)稀硝酸:取硝酸10.5ml，加水稀释至100ml，即得。本液含HNO3应为9.5％～10.5％•(2)、稀盐酸:取盐酸23.4ml,加水稀释至100ml，即得。本液含盐酸分数应为9.5%~10.5%•(3)、硝酸银溶液（0.1mol/L）:称取1.75g硝酸银，溶于100mL水中。•(4)、标准氯化钠溶液（10μgCl－/ml）:称取氯化钠0.165g，置1000ml量瓶中，加水适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。临用前，精密量取贮备液10ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得(每1ml相当于10μg的Cl-)•(5)、25％氯化钡溶液:称取25g固体氯化钡溶解于100ml蒸馏水中，摇匀。•(6)、标准硫酸（100μgSO42+/ml）溶液：称取硫酸钾0.181g，置1000ml量瓶中，加水适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，即得（每1ml相当于100μg的SO42-）•(7)、标准铁溶液2.0ml：称取硫酸铁铵〔FeNH4(SO4)2*12H2O〕0.863g，置1000ml量瓶中，加水溶解后，加硫酸2.5ml,用水稀释至刻度，摇匀作为贮备液。临用前，精密量取贮备液10ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得（每1ml相当于10ug的Fe)。仪器：比色管，容量瓶，滴管，烧杯玻棒，天平，PH试纸，四、实验步骤•1、氯化物供试品的配制：称取甘氨酸0.30g，加水搅拌溶解使成25ml，加稀硝酸10ml，置50ml纳氏比色管，加水使成约40ml，摇匀，即为供试液。2.标准品的配制:另取标准氯化钠溶液6.0ml，置50ml纳氏比色管中，加稀硝酸10ml，加水使成40ml，摇匀，即得对照溶液。于供试溶液与对照溶液中，分别加入硝酸银试液1.0ml，用水稀释使成50ml，摇匀，在暗处放置5min，同置黑色背景上，从比色管上方向下观察、比较，供试管不得浓于对照管。不得更浓（0.007％）对照液2、硫酸盐1.供试品的配制：称取甘氨酸1.0g，加水搅拌溶解使成约40ml，置50ml纳氏比色管中，加稀盐酸2ml，摇匀，即为供试液。2.标准品的配制：另取2.0ml标准硫酸钾溶液，置50ml纳氏比色管中，加水使成约40ml，加稀盐酸2ml，摇匀，即得对照溶液。于供试溶液与对照溶液中，分别加入25%氯化钡溶液5ml，用水稀释至50ml，充分摇匀，放置10min，同置黑色背景上，从比色管上方向下观察、比较，供试管不得浓于对照管。不得更浓（0.006％）。1.供试品的配制：称取甘氨酸1.0g，加水搅拌溶解使成25ml，移置50ml纳氏比色管中，加稀盐酸4ml与过硫酸铵50mg，用水稀释使成35ml后，加30%硫氰酸铵溶液3ml，再加水适量稀释成50ml，摇匀，得供试溶液。2.标准品的配制：另取标准铁溶液1.0ml，置50ml纳氏比色管中，加水使成25ml，加稀盐酸4ml与过硫酸铵50mg，用水稀释使成35ml，加30%硫氰酸铵溶液3ml，再加水适量稀释成50ml，摇匀，即为对照溶液。同置于白色背景上，从比色管上方向下观察、比较，供试管颜色不得深于对照管。不得更深（0.001％）。3、铁盐4、PH值取本品1.0g，加水20ml溶解后，pH值应为5.6～6.6注意事项：1.若供试品有色，需经处理后方可检查。内消色法，外消色法2、仪器的配对性：如纳氏比色管应配对，刻度线高低相差不超过2mm3、对照品与供试品的同步操作谢谢！