乳腺癌术后病理报告的解读

湘西自治州人民医院乳甲外科吉首大学第一附属医院乳甲外科王庆乳腺癌术后病理报告的解读目录1.乳癌术后病理大体标本解读2.乳腺病理免疫组化3.Her-2的意义及检测方法总体要求肿瘤的分化程度力求全面、规范、报告内容集体包括：肉眼检查肿块部位、大小、形状；显微镜下组织学类型、分级、癌周围组织病变，血管、淋巴管受侵，淋巴结是否转移、切除个数、阳性个数（淋巴结转移个数/切除淋巴结个数），直径1cm应注明其大小；免疫组化检查：ER、PR、c-erB-2(Her-2)、Ki-67等。高分化→中分化→低分化乳腺癌术后病理报告的解读分化差，预后差高分化低分化中分化G1：细胞分裂慢G3：细胞分裂快G2：细胞分裂居中肿瘤的分化程度病理分型浸润性特殊癌浸润性非特殊癌非浸润性癌导管内癌、小叶原位癌、粉刺癌等小管癌、粘液癌、浸润性乳头状癌、Paget病等浸润性导管癌、浸润性小叶癌肿瘤的病理类型腋淋巴结的转移数目腋淋巴结的转移部位至少检测10个淋巴结才能准确评价腋淋巴结转移的状态①：无淋巴结转移②：1～3个淋巴结转移③：4～9个淋巴结转移④：≥10个淋巴结转移腋上组（LevelI）:胸小肌外侧组腋中组（LevelII）:胸小肌后组腋后组（LevelIII）:胸小肌内侧组腋淋巴结转移情况腋窝的淋巴引流高度恶性：5年生存率（0%）III级I级II级中度恶性：5年生存率（32%）低度恶性：5年生存率（68%）肿瘤细胞的分级：根据核分裂像及异型性免疫组化免疫组化临床常用指标：雌激素受体（ER）孕激素受体（PR）人表皮生长因子-2基因（C-erb-2/Her-2）核蛋白Ki-67：细胞核内与细胞增殖有关的非组蛋白性核蛋白ER的分类及ER、PR的意义ERERα（50%-80%positive）PR(主要显示了ER的功能性途径)ERβ（与乳癌的预后有关）绝经后来曲唑、阿拉曲唑三苯氧胺（他莫昔芬）绝经前依西美坦氟维司群托瑞米芬内分泌治疗原则及药物三、乳腺癌中HER-2的检测及其临床意义（一）HER-2概况◆Her-2:又名C-erbB-2,Her-2/neu定位于17q12.1-21◆Her-2属于EGFR家族成员◆为原癌基因,编码185KD的跨膜型酪氨酸激酶生长因子受体◆现有研究表明,在30%以上的人类肿瘤中存在Her-2基因的扩增/过度表达(如乳腺癌、卵巢癌、子宫内膜癌、输卵管癌、胃癌和前列腺癌等）其中25~30%的乳腺癌为Her-2基因的扩增/过度表达。国外文献报道的乳腺肿瘤HER2阳性情况HER2StudynStagepositive,%Ross(2003)5003Ⅰ-Ⅲ22Owens(2004)6556Ⅰ-Ⅳ24Ross(2003)279Ⅳ26Penault-Llorca(2005)699Ⅳ30（三）、乳腺癌中HER-2扩增/过度表达的临床意义1987年Slamon等首次报道乳腺癌原癌基因HER-2的扩增，导致肿瘤易复发，与患者总生存期短密切相关．SlamonDJ,etal.Science.1987,235(4785):177-82.HER2阳性患者的生存期比正常者缩短一半以上转移性乳腺癌患者的中位生存期HER2阳性8-10个月HER2阴性17-22个月SlamonDJetal.Science1987;235:177–82（一）无病生存期和总生存期短相关,肿瘤预后差.在多变量分析结果中，HER2是肿瘤复发和总生存期长短的独立预后因素复发率(P=0.001)总生存(P=0.02)至今为止已有国内外数百篇文献研究HER-2与乳腺癌的关系，国外八十多篇文献报道报道HER-2扩增／过表达与患者预后差相关．Her-2是目前公认的一个乳腺癌重要的预后/预测因子1.000.750.500.250累计生存率024487296120144无扩增扩增基因扩增:10拷贝数无基因扩增:3拷贝数临界值:不包括死亡时间(月数)Logrankp0.001RossJS,FletcherJA.StemCells1998;16:413–428HER2阳性状态的患者无病生存期缩短淋巴结阴性SeshadriRetal.JClinOncol1993;11:1936–421008060402000122436486072无病生存概率死亡时间(月数)HER2基因3拷贝数HER2基因³3拷贝数对数秩检验p=0.001淋巴结阳性2005年St.Gallen指南乳腺癌危险度分级低度危险◆LN（-）且◆标本中病灶大小（pT）≤2CM◆分级1级◆瘤周脉管未见肿瘤侵犯◆HER2基因没有过度表达或扩增◆年龄≥35岁2005年St.Gallen指南乳腺癌危险度分级中度危险◆LN（-）阴性且有下列至少一条标本中病灶大小（pT）≥2CM分级2-3级有瘤周脉管肿瘤侵犯HER2过度表达或扩增年龄≤35岁◆LN1-3个（+）且未见HER2过度表达或扩增高度危险◆LN1-3个（+）且HER2过度表达或扩增◆LN4个及以上（+）(二)HER2阳性状态可以预示肿瘤对常规治疗的反应情况◆内分泌治疗HER2阳性患者相对耐药◆CMF方案HER2阳性患者相对耐药◆蒽环类对大剂量蒽环类相对敏感◆紫杉类药物相对敏感（三）、靶向Her-2的人源化单抗—赫赛汀赫赛汀®靶向HER2的人源化单抗用于治疗HER2阳性乳腺癌生存率提高达45%疗效改善并持续维持生活质量95%人源化,5%鼠抗，具有高度亲和性(Kd=0.1nM)和特异性，显著降低免疫原性(HAMA)（四）.Her-2阳性状态的检测方法常用检测方法1.免疫组化（IHC）检测Her-2蛋白表达（1）抗原修复：95-99℃EDTA（1mMpH80）或枸橼酸钠（0.05MpH6.0）（2）常用IHC检测的抗体/试剂盒抗体/试剂盒类型CB11单抗4D5单抗TAB250单抗A0485多抗HercepTestTM多抗HercepTest:美国FDA批准用于临床诊断公司名Novacastra(newcastle,upontyne,UK)Genentech(SanFrancisco,CA)Zymed(SanFrancisco,CA)DAKO(SanFrancisco,CA)DAKO(SanFrancisco,CA)抗体阳性率HerceptTest(DAKO)31/86(38.1%)AO485(DAKO)25/66(37.8%)4D5(Genetech)15/86(17.4%)CB11(BiogenexNovocastra)25/86（9.1%）◆CB11或4D5（+++）HerceptTest（+++）;HerceptTest（++）CB11或4D5（-）◆FISH(+),HerceptTest+++:19/20;FISH(-),HerceptTest++:5;FISH(+),IHC(-):3例。GouveaAP,MilaneziF,etal.ApplImmunohistochemMolMorphol.2006Mar;14(1):103-8.（3）结果判读注意点：◆计数胞膜完全着色的细胞比例及着色强度◆胞浆着色忽略不计◆评定浸润部位的着色情况◆正常上皮细胞不应着色染色形态评分染色图例完全没有染色或是肿瘤细胞中0少于10%肿瘤细胞有细胞膜染色大于10%的肿瘤细胞有呈现清淡地/1+稍微地并且是不完整的细胞膜染色这些细胞只染在部分的细胞膜大于10%的肿瘤细胞有呈现2+轻度至中度的完整的细胞膜染色大于10%的肿瘤细胞有呈现3+强度的完整的细胞膜染色HercepTestTM判读标准01+3+2+免疫组织化学法0-3+评分系统Immunohistochemistry(IHC)3+CerbB23+CerbB22+CerbB22+CerbB21+CerbB22.显色原位杂交（CISH）一种用碱性磷酸酶标记的探针，在甲醛固定、石蜡包埋组织切片上进行杂交，再用鼠抗地高辛抗体和辣根过氧化物酶抗鼠抗体进行免疫结合，DAB显色，普通光学显微镜观察有无基因扩增的异常信号的方法。CISH技术比FISH简单，试剂较便宜，不需昂贵的仪器设备，且可长期保存切片。（1）所需主要设备◆电炉、带温度计的高压锅或微波炉◆原位PCR仪或原位杂交炉◆37℃温箱◆亮视野显微镜（2）检测三大关键步骤◆标本的加热预处理用电炉，15分钟98℃–100℃所有载玻片必需全部浸入缓冲液◆酶消化室温10分钟或37℃3分钟◆严格冲洗0.5xSSC,75-80℃,5分钟过度酶消化酶消化不够恰当的酶消化Adiploid-triploidHER2copynumberisusuallyclearCISH检测无HER2基因扩增样本CISH检测低扩增样本Genecopyclusters:100%evidenceofgeneamplificationCISH检测高扩增样本HER2/CISHNoHER2amplificationHER2amplification3.荧光原位杂交（FISH）是一种通过荧光标记的DNA探针与细胞核内的DNA靶序列杂交，在荧光显微镜下能原位显示细胞核内杂交信号的分子细胞遗传学技术。FISH技术用于检测基因扩增的准确性比其他检测技术高，可以避免由于染色体的多体而呈现的假阳性，故被誉为“金标准”。但FISH技术操作较复杂，试剂(荧光标记的探针试剂盒)和仪器设备(荧光显微镜)昂贵，目前在国内只有少数实验室具有相应技术条件进行该技术的检测。（1）两种探针◆应用Her-2和17号染色体双荧光标记探针，两种信号的比值（2或者=2）Her-2是否扩增◆应用单一针对Her-2的地高辛标记探针，直接定量Her-2的扩增程度（2）FISH主要设备：荧光显微镜原位杂交仪细胞遗传分析工作站高压消毒炉（3）结果观察◆75%以上癌细胞核中都有杂交信号◆细胞核大小一致、边界完整、染色均一、无重叠FISH:PathVysionTM无扩增扩增比值2提示Her-2无扩增比值2提示Her-2有扩增FISH:INFORM®低扩增高扩增Ki-67的意义Ki-67(增殖细胞相关的核抗原)功能：与细胞有丝分裂密切相关，在细胞增殖中是不可缺少，Ki-67作为标记细胞增殖状态的抗原,阳性说明癌细胞增殖活跃判读标准：以14%为界限阳性（＞14%）阴性（《14%）谢谢观赏WPSOfficeMakePresentationmuchmorefun@WPS官方微博@kingsoftwps