第一章 组织学绪论

组织学与胚胎学组织学分三大部分：（1）绪论；（2）总论：四大基本组织（上皮组织、结缔组织、肌组织、神经组织）；（3）各论：器官系统（神经系统、眼与耳、循环系统、皮肤、免疫系统、内分泌系统、消化系统、呼吸系统、泌尿系统、男性生殖系统、女性生殖系统）。学习目的：达到掌握正常人体组织器官微细结构及其相关功能的知识。胚胎学分二部分：（1）绪论、总论（人胚发生和早期发育）；（2）各论：器官发生（颜面和四肢的发生、消化系统和呼吸系统的发生、泌尿系统和生殖系统的发生、心血管系统的发生、神经系统和眼耳的发生、畸形学概述）。学习目的：达到掌握个体发生、发育及其发生机理的知识。第一章组织学绪论组织学是一门什么样的科学？组织学在医学研究体系中的地位是什么？组织学需要掌握的基本内容研究方法组织学:是研究机体微细结构和相关功能的科学。A.微细结构:1.光学显微镜(Lightmicroscope，LM):计量单位是微米(μm)。(1μm=0.001mm)。2.电子显微镜(Electronmicroscope，EM):计量单位是纳米(nm)。(1nm=0.001μm)。光学显微镜基本结构：1.照明灯(Lamp)2.聚光器(Condenser)3.载物台和切片夹(Mechanicalstageandspecimenretainer)4.推进器(Mechanicalstageadjustmentknob)5.物镜(Objectives)6.粗细螺旋(Courseandfinefocusknob)7.目镜(Oculars)8.照相机等接口(Connectiontocamera,etc.)EM技术:1.EM可分为透射电镜(TEM)和扫描电镜(SEM)2类。2.EM的原理和LM相似，但用电子束代替光线，磁场代替玻璃透镜。分辨率约为0.2nm。(1)透射电镜（EM）:观察C内部更细微的结构,即超微结构。(2)扫描电镜观察组织C的表面立体结构。B.相关功能:微观结构和其功能相适应，反之亦然。C.人体结构的4个层次:1.细胞(Cell):人体结构的基本结构和功能单位。2.组织(Tissue):由一群结构和功能相同或相似的细胞(及其细胞间质)构成。人体内有4种基本组织：上皮组织，结缔组织，肌组织和神经组织。3.器官(Organ):由组织有机地结合起来而构成。4.系统(System):由结构相似且功能相关的器官构成。细胞（cell－C）组织（tissue）器官（organ）系统（system）研究内容:细胞、组织、器官和系统几部分,又称显微解剖学。细胞C膜、C质、C核是人体结构和功能的最小单位光学显微镜（lightmicroscope－LM）即可观察到。细胞膜细胞核细胞质卵细胞组织:结构相同或相似的C群及C外基质构成。四大基本组织：上皮组织结缔组织肌组织神经组织器官:不同的组织按一定的比例、数量及方式组合成器官。系统:若干功能相关的器官构成系统。细胞组织器官系统｝｝组织学各论组织学总论1.光学显微镜(光镜)的发明Lightmicroscope（LM)2.细胞学说的提出和组织学的建立十九世纪三大发现3.电子显微镜(电镜)的发明和超微结构的发现Electronmicroscope（EM）亚细胞水平：0.2um----0.2nm4.当代组织学二.组织学的发展简史和当代组织学问题解决方法观察对象太小放大显微镜观察对象无色，无反差染色（HE染色）观察对象生化成分不同细胞化学、免疫组织化学观察对象是活体培养组织胚胎学研究技术苏木精-伊红染色法苏木精：碱性染料，使C核内的染色质及C质内的核糖体染成紫蓝色。伊红：酸性染料，C质和C外基质中的成分染成红色。最常用的组织切片染色法－HE染色苏木精（Hematoxylin）伊红（Eosin）染色碱性染料酸性染料将嗜碱性物质（本身酸性）染成蓝色将嗜酸性物质（本身碱性）染成红色细胞核中的DNA、RNA细胞质中的RNA细胞质、膜性结构（线粒体、溶酶体、滑面内质网）HE染色中性:对于两种染料亲和力都不强的性质,HE染色着色淡。(一)光镜技术1.石蜡切片术①取材和固定;②脱水和包埋;③切片和染色;④封片。1.切片(Section):将组织切薄使光线可以透过。a.固定(Fixation):为保存新鲜组织的微观结构，尽快将组织浸入到酒精，甲醛，苦味酸，Bouin’s液或Zenker’s液等固定剂中。b.石蜡包埋(Paraffinembedding):*脱水(Dehydration):用浓度逐渐升高的酒精(70~100%)将组织中的水完全置换出来。*透明(Clearing):用二甲苯完全置换出酒精。*浸蜡(Infiltration):在60~62◦C时，用液态石蜡完全置换出二甲苯。室温时石蜡凝固成固态，内含待切组织。切片:用切片机将组织切成1~20μm厚的蜡片，然后将其放到温水上，待其完全展开后，捞到有粘附剂的载玻片上.其他切片技术:火棉胶包埋,冰冻切片,涂片,铺片,磨片。其他染色法:硝酸银→神经细胞(黑)。镀银染色示大脑皮质神经细胞1.透射电镜必须制备超薄切片用戊二醛和锇酸两次固定，脱水、包埋，用超薄切片机切片，再经醋酸铀和柠檬酸铅染色，因为不同细胞成分的密度及吸附重金属铀、铅、锇的程度不同，发生散射，产生电镜照片的黑和灰色(二)电镜技术扫描电镜技术不需要制备切片，组织块用戊二醛和锇酸固定后，脱水、干燥，再于表面喷镀薄层碳与金属膜巨嗜细胞细胞分裂2.扫描电镜观察组织C的表面立体结构。组织化学术:为应用化学、物理、生物化学、免疫学或分子生物学原理和技术,与组织学技术相结合而产生的技术,能在组织切片定性、定位、定量地显示某种物质的存在与否以及分布状态。细胞化学术:前述技术用于游离细胞样品则称为～(cytochemistry)。(三)组织化学术1.一般组织化学术基本原理是在切片上添加某种试剂,和组织中待测反应物发生反应,其终产物或为有色沉淀,以用光镜观察,或为重金属沉淀以用电镜观察。(1)糖类:PAS反应,pariodicacidSchiffreaction(2)脂类:油红、尼罗蓝及苏丹类染料(3)核酸:福而根反应→DNA;甲基绿-派若宁反应→DNA绿色,RNA红色。(4)酶类:酶组织化学术。通过显示酶的催化活性以表示酶的存在。2.免疫组织化学术immunohistochemistry:是根据抗原与抗体特异性结合的原理,检测组织中肽和蛋白质的技术。肽和蛋白质均具有抗原性,当把人或动物的某种蛋白质作为抗原注入另一种动物,其体内则会产生针对该抗原的特异性抗体。将抗体从动物血清中提出后,与标记物相结合,即成为标记抗体。用标记抗体与组织切片孵育,抗体则与组织中相应抗原特异性结合在显微镜下通过观察标记物而获知肽或蛋白质的分布部位。常用的标记物有荧光素,辣根过氧化物酶、胶体金。3.原位杂交技术即核酸分子杂交组织化学术。其原理为用带有标记物的已知碱基序列的核酸探针，与细胞内待测的核酸按碱基配对的原则进行特异性原位结合，即杂交。然后，通过对标记物的显示和检测而获得待测核酸的有无及相对量。常用的标记物有放射性核素（35S，32P，3H等）和地高辛。原位杂交术（地高辛标记）(四)放射自显影技术(五)图象分析术(六)细胞培养术和组织工程学习组织学应注意的问题:1.体内结构为立体的，三维的，而课本、讲义和显微镜下的结构均为平面的，二维的。2.学习组织学应注意静态与动态、理论与实践相结合为什么要学习组织学?地位1.组织学又叫微观解剖学(Microanatomy)，是解剖学知识的进一步完善。2.结构是功能的基础，学好组织学是学好生理学(Physiology)的基础。3.只有了解正常结构，才能学习其异常变化。因此组织学是病理学(Pathology)的基础。怎样学习组织学?1.对组织学内容的审视角度2.注意形态与功能的统一3.注意培养观察与空间思维的能力