非发酵菌(wmy)

不发酵革兰阴性杆菌定义不发酵革兰阴性杆菌，指一大群不发酵葡萄糖或仅以氧化形式利用葡萄糖的需氧或兼性厌氧、无芽胞的革兰阴性杆菌；多为条件致病菌。O-F试验发酵型（F）氧化型(O)产碱型(-)革兰阴性杆菌O-F试验F－o/－非发酵菌氧化酶试验+弧菌科肠杆菌科革兰阴性菌初步分群不发酵革兰阴性杆菌包括假单胞菌属、产碱杆菌属、无色杆菌属、不动杆菌属、莫拉菌属、金氏杆菌属、黄杆菌属、艾肯菌属、土壤杆菌属、黄单胞菌属、丛毛单胞菌属等。分类分群依据氧化酶试验葡萄糖氧化发酵试验动力试验常见不发酵革兰阴性杆菌的初步分群鉴定试验假单胞菌属无色杆菌属黄杆菌属不动杆菌属产碱杆菌属丛毛菌属莫拉菌属氧化酶+++/--+++/-O/F试验O/-OOO/----动力+/-+/-+/--++-注：+：90%以上阳性；-10%以下的阳性；+/-：约70%为阳性；O：为氧化。不发酵革兰阴性杆菌假单胞菌属假单胞菌属为需氧、有鞭毛、无芽胞、无荚膜的革兰阴性杆菌，氧化酶试验阳性，DNAG+C为58～71mol％，包括200余种菌。多数为腐生菌，少数为植物和动物寄生菌，大多为条件致病菌。代表菌株为铜绿假单胞菌。假单胞菌属分布广泛，土壤、水和空气中均有存在，人类非发酵菌感染中，假单胞菌占70％～80％，主要为铜绿假单胞菌，其他较为常见的菌种有嗜麦芽窄食单胞菌、荧光假单胞菌、恶臭假单胞菌、产碱假单胞菌等。这些菌种也是医院感染的主要病原菌。临床意义微生物特性共性:G-杆菌，无芽孢，有荚膜，多数菌有鞭毛，专性需氧菌，生长温度范围广，最适35度，普通培养基上可以生长，可产各种水溶性色素。抵抗力强，多种抗生素耐药微生物检验2.鉴定：氧化分解葡萄糖、产酸不产气，触酶氧化酶阳性，吲哚、甲基红、VP阴性。微生物检验3.药敏试验A组：头孢他定、庆大霉素、美洛西林、替卡西林、哌拉西林B组：头孢吡肟、头孢哌酮、氨曲南、亚胺培南、阿米卡星、妥布霉素、环丙沙星C组：头孢噻肟、氯霉素U组：羧苄西林、头孢唑肟、四环素、诺氟沙星、SMZ4.抗菌药物：β内酰胺类，氨基糖苷类，喹诺酮类。5.β-内酰胺类抗生素是含有β-内酰胺环的一大类抗生素,以青霉素类、头孢菌素类为典型代表,此外还包括非典型β-内酰胺类抗生素如青霉烯类、碳青霉烯类、氧青霉烯类及单环β-内酰胺类等。铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌广泛存在环境中，加之多种传播途径和污染，因此易感染,特别是免疫力低下的患者。引起:1.皮肤感染、呼吸道感染、泌尿道感染、烧伤感染2.菌血症、心内膜炎、囊性纤维变性3.感染眼部的铜绿假单胞菌，可以合成胶原酶，以致引起角膜穿孔而失明。临床意义致病物质：1.粘附素-菌毛2.多糖荚膜3.内毒素，外毒素4.绿脓毒素-催化过氧化氢和超氧化物5.弹性蛋白酶6.磷脂酶C临床意义生物学性状形态与染色：G-杆菌，多形性，有鞭毛、菌毛、荚膜，无芽孢,产荧光素和绿脓素2.生物学特性培养特性：专性需氧，4℃不生长42℃生长，在血平板上经35—37℃，18—24h培养可表现为：菌落大而扁平、湿润、边缘不齐,有金属光泽,有生姜样芳香气味,菌落周围有宽大的兰绿色透明溶血环。2.生物学特性血平板，麦康凯平板上五种菌落1.典型型-灰绿色，大小不一，扁平湿润，金属光泽2.大肠菌样型-灰白色半透明3.黏液型-光滑突起，成粘液状4.侏儒型-细小，无光泽，半透明5.粗糙型-中央凸起，边缘扁平，表面粗糙铜绿假单胞菌（P.aeruginosa)可产生多种色素：荧光素与绿脓素铜绿假单胞菌（P.aeruginosa)绿脓素生物学性状普通琼脂培养基上能产生水溶性绿色素，使整个培养基变为绿色。MAC培养基上，18-24h可形成微小无光泽半透明的菌落。SS平板上可行成类似沙门菌的菌落。(中心黑色菌落）生物学性状生化反应：氧化酶阳性，触酶阳性，O/F氧化型，精双（+）还原硝酸盐。抗原构造和分型：菌体O,鞭毛H,粘液S和菌毛抗原。抵抗力:耐潮湿、干燥、紫外线，不耐热和消毒剂，临床分离的菌株多耐药。铜绿假单胞菌检验1．标本采集按疾病和检查目的，分别采取不同的标本：患者的血液、脑脊液、胸(腹)水、脓液、分泌液、痰、尿液、十二指肠引流液、粪便等；医院病区或手术室的空气、水、地面、把手、医疗诊断器械及生活用品。检验方法直接镜检：G-杆菌分离培养：在普通培养基生长良好，经18—24h形成圆形、扁平隆起、湿润菌落。琼脂被染成绿色或黄绿色，约80％-90％产生绿脓素或荧光素。在血平板上表现为：菌落大而扁平、湿润、边缘不齐；有金属光泽；有生姜样芳香气味；菌落周围有宽大的兰绿色透明溶血环。检验方法鉴定：氧化酶阳性，触酶阳性，O-F试验氧化型、木糖产酸不产气，液化明胶，还原硝酸盐产生氮气，吲哚阴性，利用枸橼酸盐，精氨酸双水解酶阳性。铜绿假单胞菌快速鉴定要点：1、能产生绿色素。2、血平板上菌落大而扁平、湿润、边缘不齐；有金属光泽；有生姜样气味；菌落周围有宽大的兰绿色透明溶血环。3、氧化酶阳性90%检验结果分析与报告1.结合感染症状，在血、尿及无菌体液中检出特别是重复检出即可确定为病原菌。2.若无感染症状，特别是儿童，检出的革兰阴性杆菌可视为正常菌群。3.注意铜绿假单胞菌的耐药性。马勒伯克霍尔德菌与伪马勒伯克霍尔德菌属于rRNA第II群鼻疽病与类鼻疽病的病原体2004年NCCLs称为可能成为生物恐怖的细菌（炭疽杆菌（Bacillusanthraci）属于需氧芽胞杆菌属，能引起羊、牛、马等动物及人类的炭疽病。炭疽杆菌曾被帝国主义作为致死战剂之一。平时，牧民、农民、皮毛和屠宰工作者易受感染。马勒伯克霍尔德菌与伪马勒伯克霍尔德菌两菌均人兽共患病原菌人类感染是经伤口、粘膜、呼吸道急性患者可有高热、衰竭等全身症状肺鼻疽病、皮肤鼻疽病、内脏脓肿、菌血症、脓毒血症临床意义（鼠疫耶尔森菌,炭疽芽胞杆菌,布鲁菌属,巴斯德菌属和弗朗西斯菌属等）生物学特性革兰阴性杆菌无芽胞、无荚膜伪马勒鼻伯克霍尔德菌一端有丛鞭毛(1~4根)，4℃不能生长马勒鼻伯克霍尔德菌无鞭毛无动力，42℃不生长微生物检验分离培养与鉴定需氧菌生长温度35℃普通培养基、血琼脂、麦康凯生化鉴定荧光直接法染色镜检，可快速诊断嗜麦芽窄食单胞菌分类分类曾经过两次反复，最终定为假单胞菌属。临床意义分布广泛，为条件致病菌，可引起抵抗力低下患者呼吸道、泌尿道、伤口等部位的感染，严重者可出现菌血症和心内膜炎。假单胞菌的感染中居第二位，非发酵菌所致的感染中居第三位。微生物特性G-杆菌，具有端鞭毛1-8根，有动力，无芽孢无荚膜。微生物检验标本采集：血液标本先增菌后分离培养，其他标本直接接种。分离培养：营养需求不高，在血平板和普通琼脂平板上生长良好，经35℃培养18-24h后可形成中等大小、圆形、光滑、湿润、不溶血的菌落，并可产黄色色素。4℃不生长，42℃近半数生长。并在MAC平板上生长良好。微生物检验鉴定：氧化酶（-），明胶液化试验（+），七叶苷（+），赖氨酸脱羧酶（+），氧化分解葡萄糖。药敏试验含内酰胺酶。临床治疗首选磺胺类和奎诺酮类抗生素（磺胺嘧啶，环丙沙星）。对亚胺培南天然耐药鉴定实验不用K-b法做药敏试验。嗜麦芽窄食单胞菌初步鉴定要点在血平板和MAC上生长良好氧化酶（-）OF试验氧化型赖氨酸脱羧酶阴性可产黄色色素抗生素的敏感方式不动杆菌属分类定义：为一群不发酵糖类、氧化酶阴性、不能运动的G-杆菌。属奈瑟菌科17个杂交群临床分离最多的为鲍曼不动杆菌，排在非发酵菌的第二位，仅次于铜绿假单胞菌。临床意义分布广泛条件致病菌医院感染的常见病原菌微生物特性G-球杆菌，常成对排列，也可单个存在。无芽孢，无鞭毛，粘液型菌株有荚膜。奈瑟菌科。营养要求一般，在普通琼脂平板和MAC平板上均能生长。SS平板上部分菌株可生长。微生物检验标本采集：对于含菌量较多的标本采取直接接种血平板和麦康凯平板，含菌量较少的标本需增菌后再培养。直接镜检：标本经革兰染色后镜检可见G-球杆菌常成双排列，并可见白细胞吞噬现象。抗原检测和分型：微生物检验分离培养：血平板形成圆形、灰白色、光滑、边缘整齐、直径2-3mm的菌落。洛菲不动杆菌菌落小，1-1.5mm。溶血不动杆菌可出现溶血。MAC平板生长良好，鲍曼不动杆菌可呈轻微红色。鉴定：氧化酶（-）、动力（-）、硝还（-）药敏试验和结果解释可采用K-B法药敏试验鲍曼不动杆菌对全部氨基青霉素、一代二代头孢菌素和一代奎诺酮类抗生素天然耐药。鲍曼不动杆菌初步鉴定要点OF试验：O/-MAC上生长良好，菌落呈轻微粉红色氧化酶（-）快速分解葡萄糖和乳糖无动力对青霉素耐药产碱杆菌属1.与临床有关的有粪产碱杆菌及亚型、皮乔特产碱杆菌、木糖氧化产碱杆菌及亚种，DNAG+Cmol%为56～70，典型菌种为粪产碱杆菌。2.人体的正常菌群，是医院感染的病原菌，可引起抵抗力低下患者发生败血症，并可从患者呼吸道、尿液、血液及脑脊液中分离出来。产碱杆菌属3.为G-杆菌，呈链状、周鞭毛、有动力，无荚膜。4.在普通培养基上18～24h形成无色透明菌落。氧化酶及触酶均阳性，不分解任何糖类，O-F试验碱性，脲酶阴性，不液化明胶。生物学特性革兰阴性杆菌周鞭毛、有动力最适生长温度为25~35℃普通培养基生长分离培养与鉴定pH至8.6为本菌特点氧化酶阳性触酶阳性不分解任何糖类O-F基础培养呈碱性脲素酶阴性不液化明胶黄杆菌属1.为一群无动力和无芽胞、氧化酶阳性的G-杆菌。与临床相关菌种有短黄杆菌、脑膜炎败血性黄杆菌、芳香黄杆菌、水田黄杆菌、嗜糖黄杆菌、嗜醇黄杆菌、嗜温黄杆菌。模式菌种为水田黄杆菌。2.本菌有两个特点：产生黄色素,菌落多数呈黄色；分解碳水化合物产酸不产气。DNAG+Cmol%含量31～42。3.存在于水、土壤和蔬菜中，还可从口腔、上呼吸道、皮肤中检出，是条件致病菌，也是引起医院感染的常见菌。可引起术后感染、菌血症、在新生儿及婴幼儿的化脓性脑膜炎中分离出脑膜败血性黄杆菌比例较高。黄杆菌属4.Ｇ-杆菌，需氧代谢，血琼脂培养基生长良好，典型菌落为淡黄色，氧化酶、触酶、磷酸酶阳性。脂溶性色素黄杆菌属5.临床上常见的脑膜炎败血性黄杆菌及芳香黄杆菌对广谱抗菌药(如氨基糖甙类、β-内酰胺酶类、四环素类、氯霉素)有耐药性，应根据药敏试验选择用药。黄杆菌属药物敏感试验及结果解释临床经验用药可选磺胺及大环内脂类的红霉素。临床上常见的脑膜炎败血黄杆菌及芳香黄杆菌等对广谱抗菌药有耐药性，所以最好根据药敏试验选择用药。第五节莫拉菌属分类莫拉菌属(Moraxella)属莫拉菌科（Moraxellaceae）医学上重要的莫拉菌有：腔隙莫拉菌（M.lacunata）卡他莫拉菌（M.catarrhalis）非液化莫拉菌(M.nonliquefaciens)奥斯陆莫拉菌(M.osloensis)亚特兰大莫拉菌(M.atlantae)狗莫拉菌(M.canis)林肯莫拉菌(M.lincolnii)临床意义引起眼结膜炎、气管炎、肺炎、脑膜炎、脑脓肿、心包炎、心内膜炎及泌尿生殖系统炎症微生物特性革兰阴性球杆菌呈双短链状排列，具有多形性微生物检验分离培养：营养要求较高生长温度32~35℃血琼脂平板上生长良好针尖大小的圆形凸起、光滑、半透明、边缘整齐不溶血的菌落。微生物检验鉴定：氧化酶阳性触酶阳性无动力不分解任何糖类吲哚试验阴性药物敏感试验及结果解释对青霉素类敏感对头孢类、四环素类、喹诺酮类、氨基糖甙类药物均为敏感脑炎或脑膜炎、脑脓肿应注意药物通过血脑屏障的问题第六节军团菌属分类军团菌属(Legionella)属于军团菌科（Legionellaceae）常见的与人类疾病有关的军团菌：嗜肺军团菌（Legionellapneumophila）米克戴德军团菌（L.micdadei）长滩军团菌（L.longbeachae）杜莫夫军团菌（L.dumoffii）波兹曼军团菌（