分支杆菌属

病原生物学教研室胡文洁第14章分枝杆菌属（mycobacterium）•分枝杆菌属结核分枝杆菌麻风分枝杆菌非结核分枝杆菌分枝杆菌属电镜下图片第一节结核分枝杆菌（Mycobacteriumtuberculosis）•结核病是一种古老的疾病。其危害人类健康超过5000年以上。在埃及史前木乃伊身上，即发现TBspine与coldabscess的存在。•在十八、十九世紀時的歐洲，結核病大肆流行，造成重大傷亡，被稱為「白色瘟疫」(whiteplague)與「所有人類死亡的首領」。•1882年時，德國郭霍(RobertKoch)，發現結核菌(Mycobacteriumtuberculosis)是結核病的病原菌，才確立了結核病的病因。•柯霍在3月24日發表重要演說，WHO據此將3月24日訂為「世界結核病防治日」。RobertKoch•1882年3月24日郭霍在德国柏林生理学會上宣布了结核菌是结核病的病原菌。•1908年Calmett与Guerin发明了BCG(BacillusofCalmettandGuerin)，开始了结核病疫苗的新里程。•1944年SelamanAWaksman(诺贝尔奖得主)发现了第一个对抗结核菌的特效药-链霉素(Streptomycin)，使得治疗结核病露出曙光。流行情况介绍•1882年发现•1/3感染•800万新病例/年•300万/年死亡•50年代初抗结核药出现•希望21世纪消灭结核病•但结核病疫情回升•1993WHO告诫：全球健康紧急事件•我国每年因结核病导致经济损失35亿一、生物学性状结核杆菌抗酸染色(×1000)细胞壁脂质含量高染色培养抵抗力致病特点免疫特点“馋懒顽变”“馋、懒”：专性需氧罗氏培养基（含蛋黄、甘油、马铃薯、天门冬酰胺、无机盐、孔雀绿等）液体培养基：菌膜生长缓慢；培养需3-4周有菌落生成•在液体培养基中呈粗糙皱纹状菌膜生长“顽”抗干燥：在干燥痰中可生存6-8个月，附在尘埃上传染性可保持8-10d;抗酸碱：抗3%HCl，4%NaOH,5%石炭酸，6%H2SO4达30min抗染料：1:13000孔雀绿或1:75000结晶紫抗青霉素等抗生素“四不怕”“四怕”对紫外线敏感对湿热敏感对乙醇敏感对抗痨药物敏感毒力、耐药性、形态等均可变异卡介苗（BacilleCalmette-Guerin，BCG）“变”耐药变异株L型变异二、致病性•致病与细菌结构成分有关：脂质•致病与迟发性超敏反应有关（IV型）致病物质•脂质索状因子:破坏线粒体、慢性肉芽肿磷脂:结核结节、干酪样坏死硫酸脑苷酯:使结菌在吞噬细胞中长期存活腊质D:超敏反应、佐剂•蛋白质：结核菌素与腊质D结合后使机体发生超敏反应呼吸道消化道破损皮肤入侵途径？原发综合征纤维化钙化/播散细菌原发综合征原发综合征肺部X光片急性粟粒性肺结核结核结节诱发因素：原发病灶中潜伏的结核杆菌；外界的结核杆菌再次侵入。感染特点：病灶局限，不累及邻近淋巴结，但易发生慢性肉芽肿、干酪样坏死和空洞。原发后感染（多发生于成年人）肺结核临床症状•全身症状：发热（低热），疲倦、乏力、夜间盗汗,消瘦•呼吸系统症状：咳嗽、咳痰咯血、胸痛、气急三、免疫与超敏反应有菌免疫（菌体或成分消失，免疫也消失）细胞免疫（致敏T细胞、淋巴因子）细胞免疫与Ⅳ型变态反应并存免疫特点杀死结核杆菌—细胞免疫损伤正常组织细胞—Ⅳ型超敏反应第1次10～14天结菌健康豚鼠局部皮下注射•出现溃疡，不易痊愈附近淋巴结肿大扩散全身多数豚鼠死亡（结核菌素试验阴性，原发肺结核特点）郭霍现象第2次1~2天结菌存活豚鼠局部较等量皮下注射浅溃疡，易痊愈附近淋巴结不肿大，结菌不扩散全身豚鼠无死亡（结核菌素试验阳性，原发后肺结核特点）郭霍现象大量第3次结菌康复豚鼠注射局部及全身严重的迟发型超敏反应郭霍现象甚至导致动物死亡（严重而恶化的肺结核）结核菌素试验•概念：是应用结核菌素tuberculin来测定机体是否有Ⅳ型超敏反应的一种皮肤试验•原理•意义如何？theMantouxtest结核菌素试验结核菌素试验结果结核菌素试验结果分析阳性强阳性阴性硬结、红肿直径0.5-1.5cm之间有结核免疫力不表示正患结核病硬结直径超过1.5cm以上表明可能有活动性结核，应进一步检查注射部位有针眼大的红点或稍有红肿，硬结直径小于0.5cm无结核免疫力，但应考虑：原发感染的早期正患严重结核病正患其他传染病（麻疹）实际应用：1.选择BCG接种对象和测定BCG接种后的免疫效果；2.结核杆菌感染的流行病学调查；3.作为婴幼儿（尚未接种BCG）结核病的辅助诊断；4.测定肿瘤患者的细胞免疫功能。四、微生物学检查1.标本的采取和集菌2.涂片染色镜检3.培养4.动物试验5.基因诊断6.免疫学检测（结核菌素试验、血清学试验）抗酸染色荧光染色标本采取•肺结核可采取痰液•肾或膀胱结核以无菌导尿或取中段尿液•肠结核采取粪便标本；•结核性脑膜炎进行腰穿采取脑脊液；•脓胸、腹膜炎等可穿刺取脓汁。抗酸染色结果荧光金胺染色卡介苗预防接种对象：新生儿结核菌素试验阴性儿童卡介苗面临挑战！五、防治原则“DOTS（DirectlyObservedTreatment，ShortCourseChemotherapy）”即直接督导下的短程化疗，•目前最有效的控制结核病新策略。•1977年国际防痨肺病联合会提出第三节麻风分枝杆菌麻风杆菌不能在体外人工培养基中生长动物模型：犰狳（qiúyú）传播途径：呼吸道传播、破损的皮肤、粘膜潜伏期:长，数年-数十年。临床病理表现:分为瘤型麻风和结核样型麻风。（传染性强）（传染性弱）复习题•名词解释BCG抗酸杆菌•简答题如果要你去幼儿园调查幼儿结核杆菌感染情况,你应该如何做?并提出预防措施。试述结核菌素试验原理、结果分析及实际应用。•选择题1、下列哪种对象最适合接种卡介苗A.长期低热和咳嗽,疑为肺结核的患儿;B.OT试验阴性的麻疹患儿;C.OT试验阳性儿童;D.OT试验阴性儿童;E.OT试验阴性的细胞免疫缺陷者2、关于结合分枝杆菌生物学特性的叙述，错误的是（）A.专性需氧;B.抗酸染色呈红色;C.菌落表面粗糙呈菜花状；D.耐酸碱；E.耐煮沸，100℃，15分钟才死亡3、关于结核菌素试验,下列哪项是错误的A.可用来选择卡介苗接种对象;B.检测机体细胞免疫和体液免疫状况;C.作为婴幼儿结核病的辅助诊断;D.红肿硬结直径大于0.5cm为阳性;E.试验阳性说明已感染过结核杆菌4、结核杆菌侵入机体的途径,不可能的是A.呼吸道;B.消化道;C.破损的皮肤;D.泌尿道;E.节肢动物的叮咬•填空题1、结核杆菌侵入机体的途径有、、等.最常见的结核病为.抗结核免疫为-------，属于——。2、结核杆菌对湿热较敏感,在液体中加热——℃min即可杀死.3、结核菌素有和两种.结核菌素试验阳性说明;预防结核病可接种.4、卡介苗是用菌制备而成的疫苗.