07临床药理学：化学药物药代动力学研究

新药（化学药物）的药代动力学研究内容要点*新药开发的风险与决策*药代动力学研究的影响因素*生物样品分析方法的建立和确证*受试者和试验药物选择和要求*新药动物药代动力学研究*新药人体药代动力学研究健康志愿者药代动力学：单、多次、进食、代谢产物、药物相互作用；目标适应症患者药代动力学；特殊人群药代动力学：肝病、肾病，老年人、小儿；群体药物动力学；*生物利用度和生物等效性试验一、新药开发的风险与决策开发过程疾病(disease)→确定目标化合物(targetdiscovery)→寻找药物(drugdiscovery)→临床前研究(Preclinicalreseach)→临床研究(clinicaltrail)→商业化(commercialization)beginswithadiseaseratherthanatreatmentusediseasemodeltopinpointrelevantgenetic/biologicalcomponents(possibledrugtargets)一、新药开发的风险与决策新药开发的特点高科技含量、高投入、高风险市场竞争激烈:apatentdrug8-10y技术昂贵:10-15y,800-900million$失败率极高:1/5000-10000多学科合作、交融、集成基础研究和前沿学科的发展(biologyandmedicinalchemistry)信息学科的应用和支持(informatics)个人创造性和集体协同性的体现一、新药开发的风险与决策Roleofbiologyunderstandingthemechanismofdisease;identifyingpotentialtargets;evaluatingpotentialdrugcandidatesRoleofmedicinalchemistrydiscoveryofcompounds;developmentofaseries;identificationandenterpretationofactionmodeRoleofinformaticsimprovingdesign;efficientknowledgesharing;creatingdatabase一、新药开发的风险与决策新药开发的特点系统工程受经济、社会、科技、管理水平的制约遵循科学发展的客观规律基础研究-发明发现-开发注册-防病治病-商业利润-扩大投入-基础研究研究领域MolecularModelling&DrugDesign,CombinationalChemistry&HTS;Biotechnology;Genomics;Proteomics;Bioinformatics一、新药开发的风险与决策新药开发成功的关键安全Thequalityofdrugdevelopmentbyscienceoftoxicology,providingtoxicmechanism有效Indiscoveryphase,impactonefficiency,providingspecificinformationonactionmechanismandpathologicalmechanism经济Reduceattritionduringdrugdevelopmentforunfavorablecompounds一、新药开发的风险与决策新药类别(化学药)类别临床试验耐受性试验药代动力学试验生物利用度试验一类√√√二类√√三类√√四类√√五类√√六类（仿制）√一、新药开发的风险与决策新药研究(investigation)Permissiontoconductclinicaltrail获得临床研究批件;Substantialevidenceofsafetyandeffectivenessinanimalsunderproposedlabeledconditionsforuse(动物实验安全有效数据),Substantialevidencefromadequateandwell-controlledanimalexperiments新药应用(application)Permissiontoconductamedicinalproduct;SubstantialevidenceofofsafetyandeffectivenessinhumanunderproposedlabeledconditionsforuseSubstantialevidencefromadequateandwell-controlledclinicaltrail二、药代动力学研究的影响因素药物治疗终点clinicalend-point遗传因素Genomics,polymorphism,genetics药物相互作用drug-druginteraction二、药代动力学研究的影响因素二、药代动力学研究的影响因素受试者条件(Subjectcondition)Baseline,genetic,diseases,race,sex药物对机体体的作用(Theactofdrugtobody)pharmacodynamics,effects,toxicologySensitivity,tolerance,feedback机体对药物的作用(Theactofbodyondrug)pharmacokinetics，Absorption,distribution,metabolism,elimination实验过程控制(Processcontrol)Compliance,formulation,co-administration心理和生理(Psychologyandphysiology)Placebo,excise,dailyactivity条件变化(Conditionchange)Disease,progression,growth,weather,womancircle三、生物样品分析方法的建立和确证生物样品：全血、血清、血浆、尿液或其他组织特点：取样量少、药物浓度低、内源性物质干扰多（激素、维生素、胆汁及可能同服的其他药物）、个体差异大根据待测物结构、生物介质和预期的浓度范围，建立灵敏、专一、精确、可靠的生物样品定量分析方法，并对方法进行确证三、生物样品分析方法的建立和确证常用分析方法1）色谱法：气相色谱法(GC)、高效液相色谱(HPLC)法-紫外、荧光、二极管阵列检测器、色谱－质谱联用法（LC－MS、LC-MS-MS，GC-MS，GC-MS-MS）等，可用于大多数药物的检测，灵敏度达ng级2）免疫学方法：放射免疫分析法、酶免疫分析法、荧光免疫分析法等，用于蛋白质多肽类物质检测3）微生物学方法：主要用于抗菌药物的测定三、生物样品分析方法的建立和确证分析方法的可靠性、可行性、可重复性特异性(specifity)考察分析方法抗样品中干扰成分（内源性物质、代谢物、其他药物）的能力，应准确、专一标准曲线(calibrationcurve)表示所测定物质浓度与仪器响应值间的关系，提供回归方程和相关系数，表明线性相关程度线性范围标准曲线高低浓度范围，线性范围内浓度测定结果应达到试验要求的精密度和准确度。三、生物样品分析方法的建立和确证精密度(precision)指确定分析条件下，相同介质中相同浓度样品的一系列测量值的分散程度。通常用质控样品的批内和批间（日内和日间）相对标准差（RSD）表示。一般应小于15％，定量下限附近RSD应小于20％准确度(accuracy)指确定分析条件下，测得的生物样品浓度与真实浓度的接近程度（即质控样品实测浓度与真实浓度偏差），通过重复测定已知浓度分析物样品获得。一般应在85％-115％范围内（少于15％），在LLOQ附近应在80％-120％范围内。三、生物样品分析方法的建立和确证定量下限（lowerlimitofquanttation,LLOQ）标准曲线上的最低浓度点，表示测定样品中符合准确度和精密度要求的最低药物浓度。能满足测定3-5个消除半衰期时样品中药物浓度;能检测出Cmax的1/10-1/20时的药物浓度准确度应在真实浓度80%-120%范围内；RSD应小于20%；至少5个标准样品测试结果证明方法学质控由独立人员配制不同浓度的质控样品；每分析批建立新的标准曲线，并随行测定低、中、高浓度的质控样品；双样本，均匀分布；质控样品数大于5%；偏差小于15%（低浓度20%）；最多允许1/3质控样品超限；不能外延，高于定量上限稀释后测定，低于定量下限Cmax前以零计算，后以无法定量计算。三、生物样品分析方法的建立和确证样品稳定性(stability)含药生物样品在室温、冰冻和冻融条件下以及不同存放时间的稳定性考察，以确定生物样品的存放条件和时间。还应注意考察储备液的稳定性以及样品处理后的溶液中分析物的稳定性，以保证检测结果的准确性和重现性提取回收率生物样本基质中回收得到的分析物质的响应值与标准品响应值的比值，或供试生物样品中提取的分析物的比例高、中、低3个浓度的提取回收率，结果应一致、精密和可重现三、生物样品分析方法的建立和确证方法建立与确认的数据分析方法的详细描述；仪器、条件、对照品的来源；方法学数据；批内、批间精密度和准确度的结果；稳定性数据；特异性图谱（质谱图或色谱图）；方法的优缺点说明样品分析数据样品处理和保存情况；标准曲线列表；用于计算结果的回归方程；质控样品测定数据；未知样品浓度数据其他缺失样品原因，重复测试结果；舍弃或选择数据的理由三、生物样品分析方法的建立和确证记录分析数据“未记录意味着没有发生”分析方法的有效性应通过实验证明建立一般性和特殊性标准操作规程保存完整的实验记录完整记录并妥善保存生物分析方法建立中产生的数据和QC样品测试结果提交分析报告提交足够的评价方法学建立和样品测定的数据提交成功完成实验的原始资料、数据、记录、结果四、动物药代动力学试验设计动物种类家犬为主,不用兔,可用大鼠剂量组至少3个剂量,以便分析药代特征例数每组6-10例,雌雄各半，同步试验准备前一周体验，驱虫，前12h禁食不禁水麻醉最好不麻醉，必要时浅麻醉四、动物药代动力学给药药液灌胃先灌生理盐水10ml(犬)2ml(大鼠)再灌药液或混悬液40ml(犬)5ml(大鼠)再灌50ml(3ml)生理盐水.压管抽出.药片灌胃用血管钳送到咽后壁,再灌盐水.压管抽出.静注用下肢隐静脉(颈外静脉)可手术暴露.个别情况可腹腔注射.不用皮下注射.四、动物药代动力学取血预先制备肝素附壁管抗凝,总采血量不超过体重的1/100.犬颈外静脉,上腔静脉,舌下静脉鼠颈外静脉,尾静脉(允许减压加温)专人计时先制表,处理后填入操作人姓名编号编好取用,专人发管收管药名,剂量号,动物号,周期号,时间序号,如(A3-2-1-5,B6-13-2-5等)血样点血样一般不少于10点,每段3-4点.初试2例,静注者取零时血药浓度(C0)五、人体药代动力学研究5.1志愿者入选标准健康状况一般为健康志愿者，但如果药物毒性（特殊毒性）过大，有可能对受试者造成身心伤害，则应选择有相应疾病的患者；AIDS和HIV感染者、药物滥用者、3个月内献血者或作为受试者被采样者性别：男女兼有（但对于性别针对性的药物：性激素、前列腺肥大、男性性功能等）；年龄：19-45岁，同批受试者不宜相差10岁；体重：按体重指数=体重(kg)/身高(m2)计算，19-24之间其他：不吸烟、不嗜酒；无心、肝、肾、消化道、精神神经和血液等疾病史；试验前进行体检和心电图、血压、肝、肾、血常规检查正常；特殊药理作用的药物应增加相应检查；完全自愿，并签定书面知情同意书五、人体药代动力学研究排除标准体检及生化、血、尿检查超出正常范围；有药物过敏史或变态反应史，有心肝肾消化道病史，或有与试验药物作用相关的病史；妊娠及经期妇女；近三个月内有献血及试验采血史；试验前2周内应用其他药物五、人体药代动力学研究5.2药物要求试验药物应为质检部门检验符合质量标准的中试放大产品；稳定性、含量、体外溶出度及安全性指标检查合格；为报送生产及进