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生物膜•生物膜•绝大多数细菌是附着在有生命或无生命物体表面首次发现于溪流•1978costerton等首先提出了BF理论•BF是细菌在物体表面形成的高度组织化的多细胞结构•细菌和同一菌株的BF细菌和浮游生长细菌具有不同的特性•对抗生素和免疫防御机制的抗性很强,导致严重的临床问题•20世纪70年代末,作为独立科学发展•1990年,蒙大拿州立大学建立了世界上第一个生物膜工程中心•目前国内外越来越重视生活中的生物膜•生物膜在生活中是无处不在的•花瓶内部的粘液•城市输水管道•牙科器械与管路•快餐店的制冰机•饮水机•牙菌斑•隐形眼镜医疗的视角在医疗领域,只要是存在非灭菌水的场所都有可能形成生物膜。那些有非灭菌水附着的表面,包括外来器械的缝隙、内镜的管腔以及各种植入物都是生物膜滋生的场所。生物膜很长时间内一直是齿科关注的对象。牙菌斑就是生物膜的一种形式,而生物膜也在齿科所用的水管与吸引器内存在。生物膜?•在温湿度,营养合适的任何表面•99%的细菌生活在生物膜内•好处:如生物修复,反刍•坏处:人体表面如牙齿,组织内,植入物周边等生物膜的定义•生物膜(或生物被膜):•集聚的细菌和细胞外物质,紧紧地粘附在表面并不容易被去除•一些微生物,在水中或水溶液或体内(如:血流)生长时,有能力粘附表面,然后包埋在多聚糖基质中。基质含细胞,活和死的微生物和多聚糖,阻止抗菌剂,灭菌剂,消毒剂和抗菌素到达微生物生物膜的特点•细菌生存的一种机制•抵抗力大大增加•细菌集合体粘附于器械表面,并通过分泌的粘性基质形成菌落•菌落个体之间进行信号传递,整体适应外部环境器械上生物膜•严重影响有效的清洗过程•腐蚀器械,影响器械功能•影响消毒灭菌因子的穿透,导致消毒灭菌的失败•降低化学灭菌剂的活性•持续性释放微生物污染,导致病人感染植入物与生物膜的关系•植入物,大大增加感染的发生•活细菌,容易附着于植入物•抗菌素和人体免疫系统无法到达植入物•植入物上少量的细菌不易杀灭,逐渐形成生物膜•通常只能去除植入物,无其它有效治疗方法,死亡率高:5%—60%切口深部组织的SSI•感染发生在术后:•30天以内(无植入物)•一年以内(有植入物)•感染与外科手术有关生物膜的危害•细菌可在人体组织如牙齿,牙龈,皮肤,肺,尿道及其它器官的表面形成BF,引起诸如牙周病,龋齿,慢性支气管炎,败血病,血栓性静脉炎,难治性肺部感染和心内膜炎等疾病。•在血液,组织液和淋巴液等体液中一般不形成BF.•体液中有适应细菌生长的有机营养成分。•体液中含有细菌,可在无生命物体表面形成BF(如隐形眼镜,人工关节和心脏人工瓣膜等)。•植入物增加细菌形成生物膜大约65%人类细菌性感染由BF细菌引起的。医疗器械上的生物膜•活的细菌引起感染,症状多反复•活的、死的细菌都会引发的:•炎症反应•肉芽肿•粘附•通常需要取出受到生物膜污染的器械或植入物•致死率:5%—60%•预防生物膜与相关感染是第一位的工作生物膜的危害•耐药性•与浮游细菌相比,BF细菌对抗生素的抗性可提高10-1000倍,甚至更高•影响消毒灭菌成功•对抗机体免疫防御•群体感应性•强繁殖力•不可逆性•强扶着性耐药性•BF中的EPS起屏障作用,阻止抗生素,消毒剂,灭菌因子的接触细菌•BF中微环境不同科影响抗生素活性•诱导产生BF特异性表型•多菌种BF中的协同作用生物膜对消毒灭菌的影响生物膜的强附着性生物膜的形成1.细菌粘附形成BF第一步•在鞭毛作用下移行至异物(如医疗设备,机械瓣膜,内置导管)或死亡组织(如坏死骨片)表面•-在菌毛作用下粘附固着•2.BF发展规律:-生长和繁殖•-分泌大量EPS(胞外多糖)•-EPS可粘结单个细菌形成细菌团块,既微菌落•-大量微菌落使BF加厚•-细胞启动包间信号系统,产生胞间信号生物膜的形成•3.BF的成熟:•-结构不均匀,类似蘑菇形状的微菌落组成•-菌落之间围绕着输水通道,可以运送养料,酶,代谢产物和排出废物,形成原始的循环系统。•因菌种,营养,附着表面和环境不同,形成疏松或致密以及厚薄不等的BF结构•-动态过程•-由纯菌种形成,也可由多菌种组成•-释放游离细菌,游离细菌粘附,形成新的循环系统生物膜的预防•立即清洗,防止干燥•避免长时间保湿•有机物有利于生物膜的形成•复杂物品必须结合手工刷洗和超声清洗•防止器械破损,污物容易堆积在破损处•选择正确的清洗剂并合理的使用•首选碱性清洁剂+多酶清洁剂:最佳的清洗组合,最有效地清洁•注意漂洗水质量和水管污染•干燥储存•加强清洗效果的评价和监测•一旦生物膜的形成采取多种清洗手段生物膜对清洗的挑战•反复使用器械伴随生物膜聚集•细菌受到基质的保护,更难被清洗•成熟的生物膜厚度可达300个细菌•干燥的生物膜仅仅降低代谢速度,任然保持活性•生物膜一旦形成,常规清洗无法去除•防止生物膜形成,是成功的关键生物膜的去除•一般清洗手段无法彻底去除生物膜•建议结合多种方法:•—机械清除:刷洗+超声清洗•—酶清洗剂:(1)浓度增加,如常规使用1:270;生物膜:1:50或根据厂商规定•(2)延长浸泡时间•(3)多酶•含消毒剂清洗剂:清洗和杀菌清洁剂的分类•⑴碱性清洁剂:•PH值≥7.5,•应对各种有机物有较好去除作用,•对金属腐蚀性小,不会加快返锈的现象。•⑵中性清洁剂:•PH值6.5-7.5•应对各种有机物有较好的去除作用,•对金属无腐蚀。清洁剂的分类•⑶酸性清洁剂:•PH值≤6.5•对无机固体粒子有较好的溶解去除作用,•对金属物品腐蚀性较小。•⑷酶清洁剂:•含酶的清洁剂有较强的去污能力,•能快速分解蛋白质等多种有机物。理想去除生物膜的清洁剂•特殊表面活性剂去除生物膜表面污物•杀菌成分有效杀灭关键微生物•高效多酶分解多聚物基质•配方协同增效如何判断清洁剂的好坏•1、是否有泡•有泡的危害:•(1).泡沫会产生气溶胶,将污水中的细菌、•病毒散发到空气中,危及到医务人员的身•体健康;•(2).泡沫会阻隔多酶清洗剂与器械上的污•物直接接触,特别是管道器械,造成浪费•和清洁不彻底,从而影响消毒灭菌。如何判断清洁剂的好坏•(3)如果有泡沫,取出器械时又会把粘附在•气泡上的污物带回到器械上,造成清洁不彻•底,从而影响消毒灭菌。•同时,泡沫也会增加清洗的时间。•(4)泡沫会阻隔视线,清洗人员无法看清水•面下的情况,增加了清洗人员被水面下的刺•伤、割伤的危险,从而造成交叉感染。•(5)泡沫容易造成自动清洗机排水管的堵塞•及吸液泵、排水泵的损坏,更换这些部件价•格昂贵。清洗•清洗是保证无菌物品质量的重要环节。提高清洗•质量是落实标准的重点内容。•影响清洗质量的因素•污染物的性状—选择合适的清洗剂•器械材质和形状•清洗介质(水、清洗剂)•清洗工艺方法(温度、时间、机械力)清洗设备运行程序等超声机使用的注意事项•1超声清洗机电源及加热器电源必须有良好的接地装置•超声清洗机严禁无清洗液开机,既清洗缸没有加一定数量的清洗液,不得开超声清洗波开关。•有加热设备的清洗设备严禁无液时打开加热开关。CSSD内一般场所的生物膜预防•保持物品干燥•将刷子等物品悬挂放置•不要重新灌装瓶体肥皂和洗手液•环境死角的清洗和消毒•不论采用何种方式进行清洗,在终末漂洗之后都要确保器械的干燥。不应该任由湿的器械自然干燥。清洗是去污的根源,也是防止生物膜在器械表面形成其中最重要的一步。正确的清洗流程以及对细节的关注可以预防生物膜在器械上的滋生。
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