《中国药典》XXXX年版附录通用检测方法和指导原则主要

《中国药典》2010年版附录通用检测方法和指导原则主要增修订内容一、主要报告内容1、附录增修订原则2、拟增修订项目3、主要增订项目内容4、主要修订项目内容5、评价与展望二、附录增修订原则1、新增通用检测方法应是目前药品检验检测急需的、能解决目前存在突出问题的，并能引导药品检验检测水平不断增高，能充分反映现阶段国内和国际药品质量控制先进技术的成熟可靠的方法。急需、前瞻、先进、成熟2、指导原则的增订，理由和意义要充分，应对药品质量标准和质量控制有实际指导意义。3、修订内容应紧密围绕药品标准以及药品监督管理工作，修订必须有充分的理由和科学依据，不轻易修改。三、拟增修订项目1、一部共16项，其中新增6项：电泳测定法渗透压摩尔浓度测定法等离子体发射光谱法大孔树脂有机残留物测定法聚合酶链式反应法中药特征图谱指导原则三、拟增修订项目2、二部共45项，新增12项：核磁共振波谱法离子色谱法电导率测定法锥入度检查法2-乙基己酸测定法光学显微镜法拉曼光谱法指导原则溶出度测定指导原则药物多晶型研究指导原则蛋白质含量测定法合成多肽中醋酸测定法氨基酸测定指导原则四、主要增订项目内容核磁共振波谱法1、未知物的结构测定2、已知物的结构确证功能团分析异构体分析打假工作（肝素钠中的掺伪物在2.16ppm有特征信号）3、含量分析（多组份抗生素）四、主要增订项目内容离子色谱法1、有机、无机阴阳离子和低分子量亲水性有机分子的分离测定2、氨基酸不经衍生化直接测定3、某些抗生素的有关物质检查4、金属的形态与价态分析四、主要增订项目内容拉曼光谱法指导原则1、与红外光谱一样，同为分子的振动光谱IR与偶极矩变化相关│Mnm│=Raman与极化率变化相关│(aij)nm│=2、两者选一律互为补充3、拉曼光谱测定快速、准确，样品制备简单甚至无需制备4、拉曼光谱通常处于可见与近红外区可以有效地用光导纤维将各光学元件联结样品可以包封在对激光光源透明的玻璃、塑料中或将样品溶于水中5、一些特殊的拉曼技术，如共振拉曼和表面增强拉曼光谱可以使谱带强度增加103～106倍，使痕量物质的结构研究成为可能。τdΡΨΨmn∫∞∞-τdΨaΨmijn∫∞∞-四、主要增订项目内容重金属检查与测定法1、重金属检查法（化学法）一法硫代乙酰胺比色法适用于溶于水、稀酸或乙醇等的药物甲（Pb）乙（样品）加设监控管丙（Pb+样品）要求丙＞甲＞乙合格如丙＜甲采第二法二法炽灼后的硫代乙酰胺比色法适用于含芳环、芳杂环以及难溶于水、稀酸或有机溶剂的药物。配成溶液后同一法操作。三法硫化钠比色法适用于碱溶性药物，同原附录未加监控管。四、主要增订项目内容2、原子吸收与光焰光度法无实质修改3、等离子体质谱修订附录完善了原附录增加了干扰与校正，样品溶液的制备以及测定方法中增加了标准加入法等段落。本法是重金属测定中最灵敏的一个方法（10-12～10-15）4、等离子体发射光谱新增附录本法灵敏（10-9～10-12）、准确、线性范围宽、元素覆盖范围宽、可实现多种元素同时测定。5、离子色谱新增附录可实施金属的形态与价态分析6、原子荧光未收载与ICP-MS和ICP-AES比差与AA比相仿四、主要增订项目内容制药用水1、生产工艺纯化水饮用水经蒸馏、离子交换、反渗透等方法注射用水纯化水经蒸馏灭菌注射用水注射用水按注射剂生产工艺制备2、修订后质量标准增二项检查电导率检查新增附录用于检查各种阴阳离子的污染程度总有机碳检查控制有机污染（有机小分子、微生物）修订附录：（1）除控制水中TOC外，增加了对制水系统的流程监控作用（2）对TOC测量的各种原理和方法不作任何褒贬，只强调技术要求四、主要增订项目内容a、能区分水中的有机碳与无机碳，并能排除无机碳的干扰b、应满足系统适用性试验要求85%＜（rss-rw）/（rs-rw）×100＜115%c、具有足够的灵敏度（0.05mg/L）（3）TOC测量的意义控制化学污染与微生物污染ATOCmeasurementisnotareplacementtestforendotoxinormicrobiologicalcontrol.Whiletherecanbeaqualitativerelationshipbetweenafoodsouce(TOC)andmicrobiologicalactivity.thereisnodirectnumericalcorrelation.五、主要修订项目内容紫外-可见分光光度法1、波长校正增加了高氯酸钬溶液的校正（以10%高氯酸为溶剂，配制含4%氧化钬的溶液）λmaxnm：241.13，278.10，287.18，333.44，345.47，361.31，416.28，451.30，485.29，536.64，640.52nm。2、波长允差紫外区±1nm500nm±2nm700nm±4.8nm五、主要修订项目内容红外光谱1、原料药鉴别遇多晶干扰（1）按规定对样品进行预处理（重结晶与干燥）（2）采用对照品平行操作（3）采用溶液法2、制剂鉴别（1）提取（溶剂的选择）辅料无干扰，晶型不变直接与标准光谱比对辅料无干扰，晶型有变与对照品同法处理后比对辅料有干扰，晶型不变在指纹区选择3～5个特征谱带波数允差为0.5%辅料有干扰，晶型有变不宜采用红外鉴别五、主要修订项目内容3、多组份原料药的鉴别可借鉴制剂鉴别的方法4、混晶中无效或低效晶型的限度控制采用基线密度法计算指定谱带的吸光度后再计算各晶型的相对含量（甲苯咪唑和棕榈氯霉素）五、主要修订项目内容高效液相色谱法1、色谱柱（1）常用色谱柱填料粒径3～10μm（2）微径柱填料粒径约2μm（UPLC或UFLC）硬件须匹配色谱条件可适当调整以品种正文规定条件的测定结果为准2、柱温（1）通常为室温（2）以硅胶为载体的普通色谱柱，最高使用温度不得超过60℃，（HTLC）五、主要修订项目内容3、有些色谱条件可适当调整，但流动相比例的调整有明确规定。组分比例较低者（＜50%）相对于自身的改变量不超过±30%，相当于总量的改变量不超过±10%。如±30%的相对改变量超过总量的10%时，则以后者为准。4、系统适用性试验（1）理论板数nn=16（）2或n=5.54（）2（2）分离度R（关键指标）R=2或R=5、拖尾因子必要时，应规定拖尾因子n/2RWtWtR21RRW+Wt-t12()()2n2,2n1,RRW+W1.70t-t212五、主要修订项目内容pH值测定法1、pH的含义pH=-logaH+2、pH值的测定pH=pHs+（E-Es）/RR=0.05916+0.000198（t-25℃）影响pH值测定的因素表观pH值3、弱缓冲液的pH测定除另有规定外，按下法测定先用苯二甲酸盐缓冲液（pH4.01）校正仪器，1min内pH改变＜0.05时读数，再用硼砂缓冲液（pH9.18）校正仪器，1min内pH改变＜0.05时读数，取二次读数的平均值。4、水的pH值测定加KCl适量（由制药用水正文自行规定）五、主要修订项目内容电位滴定1、作图法零阶E～V曲线突跃部的中点或拐点所对应的滴定液体积一阶导数一级微商（△E/△V）的极值所对应的滴定液体积二阶导数二级微商（△2E/△V2）等于零时所对应的滴定液体积五、主要修订项目内容2、计算法二阶导数法较一阶导数法更准确，故最常用采用线性内插法V0=V+△V式中V0：终点时的滴定液体积a：二级微商为零前的二级微商值b：二级微商为零后的二级微商值V：二级微商为a时的滴定液体积b+aaV0=V+(a/a+b)△V=34.30+[1100/(1100+3600)]×0.10=34.32mlV（ml）E(mv)△E△V△E/△V△2E/△V233.00405100.402533.404153370.203533.604225090.204533.8043175120.206034.00443400120.1012034.10455300150.1015034.204702900440.1044034.305141100550.1055034.40569-3600190.1019034.50588-800110.1011034.60599-40070.107034.70606五、主要修订项目内容不溶性微粒检查法1、应用对象由溶液型静脉注射液扩大至溶液型静脉注射液，注射用无菌粉末、注射用浓溶液及注射用无菌原料药2、统一了操作方法（1）取样体积大于5ml取5ml小于5ml根据实际装量取或合并成不少于25ml，每次取5ml（2）有效读数不少于3个，取平均值计算3、仪器校正（1）标准粒子10μm相对标准偏差不大于5%（2）8μm与10μm或10μm与12μm两个通道的差值计数≥68%10μm通道的累计计数五、主要修订项目内容可见异物检查法1、合并原附录ⅨH及《可见异物检查法补充规定》2、10ml及以下规格，每次手持不超过2支3、目视检测时间不超过20秒4、所检样品必须系随机抽取五、主要修订项目内容渗透压摩尔浓度测定法1、供试溶液的浓度（1）由仪器可测定范围改为不大于700mOsmol/㎏（2）经稀释的供试液，其渗透压摩尔浓度不能简单地用实测值乘以稀释倍数表示，而应将实测值和稀释倍数完整表述2、扩大了应用范围，在制剂通则的注射剂和眼用制剂项下有明确规定。3、各类制剂的渗透压摩尔浓度范围暂不作统一规定，原则要求与血液等渗或接近等渗（285～310mOsmol/㎏）五、主要修订项目内容酸败度检查法羰基值的原计算公式有误羰基值=1、854的各种醛的2,4-二硝基苯腙的ε，而不是mε2、V1供试品稀释总体积V2测定用供试品稀释液体积25ml5ml25ml3、修改为羰基值=1000×VVW×854A12S1000×W×854A×125六、评价与展望1、新版药典就采用的技术手段而言，已完全实现与国际接轨；各附录的技术要求也已达到或接近国际水平2、农药残留量测定法与重金属检查法的增、修订使中药安全性检查的技术水准得以大大提升，不仅实现了方法学与国际接轨，而且所涉及的农药品种和重金属种类也涵盖了国际上主要控制的品种3、总有机碳和电导率检查法的增修订以及在制药用水质量标准中的实施，使制药用水的化学污染与微生物污染得以有效控制4、PCR扩增技术在中药鉴别中的应用六、评价与展望5、离子色谱在重金属的形态与价态分析以及氨基酸分析中的应用6、溶出度的计量法判定7、重量（装量）差异的计量法判定8、渗透压摩尔浓度用于中药注射剂的检查9、新技术新方法在品种各论中的推广应用附一农药残留量测定法1、方法学由单一GC法扩大为GC、HPCL、GC/MS和LC/MS2、农药品种由24种（其中有机氯9、拟除虫菊酯3和有机磷12）扩充为色谱法124种（其中有机氯和拟除虫菊57、有机磷54和氨基甲酸酯13），按色-质联用法统计则为128种。3、测定方法分两个层次：一为色谱法（GC、HPLC）方法包括样品前处理（提取、净化）、色谱测定、色谱验证和质谱确证二为色-质联机法（GC/MS、LC/MS）方法包括样品前处理（提取、净化）、色-质联机测定附二溶出度与释放度测定法1、合并溶出度与释放度测定法两个附录2、新增流池法3、溶出介质体积删去900ml的规定，通常为500～1000ml，由正文自行规定4、先投样再启动仪器5、取液时间与规定时间的差异小于±2%附二6、只有当各论中有明确规定者，才可使用沉降篮或相应装置7、结果判定采用国际通行的三阶段法以普通制剂为例（1）6片每片d1≥Q+5%（2）6片D12≥Q，d1≥Q-15%（3）12片D24≥Q，低于Q-15%不过2片，d1≥Q-25%附三含量均匀度检查法1、扩大适用范围（1）剂型片剂、硬胶囊、注射用无菌粉末以及内容物为非均一溶液的软胶囊、单剂包装的口服混悬剂、透皮贴剂、吸入剂和栓剂。（2）规格每个标示量不大于25mg或主药含量小于每片重量25%（原10mg，5%）2、修改统计参数（以普通制剂为例）10个合格A+2.10S≤15.0，