抗磷脂酶A2受体(PLA2R)抗体

抗磷脂酶A2受体（PLA2R）抗体---特发性膜性肾病特异性诊断指标康圣环球肾内项目组--方堃主要内容1、原发性膜性肾病的疾病概况2、抗PLA2R抗体的临床意义与应用价值3、抗PLA2R抗体的指标检测性能主要内容1、原发性膜性肾病的疾病概况2、抗PLA2R抗体的临床意义与应用价值3、抗PLA2R抗体的指标检测性能•膜性肾病，又称膜性肾小球肾炎。•一种针对正常肾小球上皮细胞膜上的抗原成分产生的自体抗体介导的肾小球损害，免疫复合物由上皮细胞膜上脱落到基底膜的上皮细胞形成典型的免疫复合物沉着。沉着的免疫复合物激活补体，补体膜攻击复合物引起蛋白尿。•病变过程中激活的细胞因子导致基底膜细胞外基质成分改变引起基底膜增厚。•临床特点：临床以肾病综合征(NS)或无症状性蛋白尿为主要表现•膜性肾病（MN）膜性肾病-定义特发性MN（IMN)70-80%抗PLA2R抗体（90%）膜性肾病（MN）的病因THSD7A或查无自身抗体或已知的继发病因（10%）继发性MN(sMN)（可参见KDIGO列表）20-30%病原体感染（例如HBV、HCV、梅毒和疟疾）自身免疫性疾病（例如系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、干燥综合征和类天疱疮）癌症其他疾病（例如镰状细胞贫血、格林-巴利综合征）药物诱导（例如非甾体类抗炎药，黄金，汞和青霉胺、布洛芬、双氯芬酸等）膜性肾病-分类特发性膜性肾病-致病机制PLA2R表达于人肾小球足细胞表面，抗磷脂酶A2受体抗体阳性的膜性肾病患者中，抗原/抗体复合物沉积在肾小球基底膜上，激活补体系统，最终引起足细胞和肾小球滤过屏障损伤，蛋白进入原尿，随后出现蛋白尿。BeckLHJr.BonegioRG,LambeauG,BeckDM,etal.M-typephosphorlipaseA2receptorastargetantigeninidiopathicmembranousnephropathy.NEnglJMed361:11-21,2009特发性膜性肾病–诊断病理：肾小球上皮细胞下免疫复合物沉积，导致毛细血管基底膜弥漫性增厚。Fervenza,F.C.etal.ClinJAmSocNephrol2008;3:905-919光镜：基底膜增厚，钉突形成，无系膜细胞增生免疫荧光：IgG和C3沉积电镜：上皮下电子致密物沉积诊断:•肾活检组织学检查（光镜、免疫荧光染色）肾脏组织电镜检测主要内容1、原发性膜性肾病的疾病概况2、抗PLA2R抗体的临床意义与应用价值3、抗PLA2R抗体的指标检测性能（1）原发性膜性肾病的诊断和鉴别诊断抗PLA2R抗体是原发性膜性肾病的高特异性和灵敏度的血清学标志物，可以用于区分原发和继发性膜性肾病。(Hoxha,Harendzaetal.2011,Dahnrich,Komorowskietal.2013)抗PLA2R抗体检测的临床意义与应用价值37例MN患者纳入研究•IMN：37例•sMN：8例•疾病对照：22例•健康对照：30例PLA2R是原发性膜性肾病的靶抗原!抗PLA2R仅出现于原发性膜性肾病中Becketal.,NEnglJMed361,11-21(2009)（2）疾病活动性和病情预测抗PLA2R抗体的水平与临床疾病活动性密切相关，抗体含量的变化与临床结局存在一致性，是预测疾病进程的良好指标。抗PLA2R抗体滴度越高，低白蛋白、eGFR下降越明显，肾病范畴蛋白尿比例越高；疾病的自发缓解率越低；抗体滴度高组仅有很小比例（4%）的患者获得自发缓解，当IMN自发缓解或免疫抑制剂治疗获得缓解后该抗体迅速转阴；肾功能衰竭风险及非肾病患者发生肾病综合征的风险越高；治疗时间越长。抗PLA2R抗体检测的临床意义与应用价值Becketal,KidneyInt77,765-770（2010）抗PLA2R与临床结局存在一致性抗PLA2R抗体滴度越高，低白蛋白、eGFR下降越明显ChinJInterMed，September2015，Vol.54，No.9抗体滴度越高，自发缓解率越低HofstraJMetal.JAmSocNephrol23:1735–1743,2012合并肾衰病例极少表达较低滴度的抗PLA2R抗体自发性痊愈的病例极少表达较高滴度的抗PLA2R抗体结果抗PLA2R抗体低滴度抗PLA2R抗体中等滴度抗PLA2R抗体高滴度P值部分缓解42%31%41%n.s.完全缓解27%35%30%n.s.肾衰竭4%12%19%n.s.持续蛋白尿27%23%11%n.s.自发缓解38%31%4%0,01需要免疫抑制治疗48%54%88%-Hofstraetal,JAmSocNephrol23,1735-1743（2012）抗PLA2R抗体滴度–疾病活动性与病情预测（3）治疗监测：成功的免疫抑制治疗原发性MN患者可观察到抗PLA2R抗体滴度的下降，并在复发时抗体滴度再度升高。抗体滴度在蛋白尿水平升高之前升高，并在蛋白尿水平降低前降低。(Beck,Fervenzaetal.2011,Hoxha,Thieleetal.2014)抗PLA2R抗体检测的临床意义与应用价值抗PLA2R抗体水平可检测病情Hoxhaetal.,JAmSocNephrol25,1-10(2014)CNI=钙调神经磷酸抑制酶Alk=烷化剂RTX=利妥昔单抗3种治疗方案无显著差异抗PLA2R抗体水平迅速下降，且先于尿蛋白（4）风险评估：40%的原发性MN患者在肾移植后会再次复发，尤其是移植前抗PLA2R抗体阳性的患者复发的风险更高。(El-Zoghby,Grandeetal.2009)抗体滴度可以用于评估肾移植后是否进行免疫抑制治疗或判断治疗剂量，有助于预防肾移植后MN复发。(Seitz-Polski,Payreetal.2014)抗PLA2R抗体检测的临床意义与应用价值抗PLA2R抗体-风险评估-肾移植术后的风险评估-原发性膜性肾小球肾炎的诊断与鉴别诊断评估疾病活动度和严重程度辅助临床选择治疗方案监测疾病的治疗效果预测疾病预后：痊愈/复发（免疫学反应先于临床症状）肾脏移植患者复发风险评估抗PLA2R抗体检测的临床意义与应用价值--抗PLA2R抗体定量检测的优势主要内容1、原发性膜性肾病的疾病概况2、抗PLA2R抗体的临床意义与应用价值3、抗PLA2R抗体的指标检测性能标准化ELISA:-试剂通用性,-温育时间短-30/30/15min-半定量检测（ratioorindex）或-定量检测（5个标准品,2–1500HEKPLA2R-transfectedHEKcontrol-transfectedRU/ml）transmembranedomainintracellulartailAnti-PLA2RELISA（EA1254-9601G）extracellulartail抗PLA2R抗体检测产品Anti-PLA2RRC-IIFT（FA1254-xxxx-50）nAnti-PLA2RpositiveIgGRC-IFTAnti-PLA2RpositiveIgGELISAPrimaryMN,beforetreatment,within8weeksafterbiopsy,anti-PLA2RRC-IFTpositive198198（100%）190（95.9%）Otherglomerulonephritides23000Otherautoimmunediseases31500Healthyblooddonors29101Specificity836100%99.9%抗PLA2R抗体的灵敏度和特异性•抗体滴度会随着疾病活动性而发生波动，甚至可能因取样时发生以下事件而检测不出：自发性缓解成功的免疫抑制治疗•原发性膜性肾病并非单一病因导致的疾病，可能存在多种靶抗原•一些患者可能被误判为特发性膜性肾病（实际为继发性）为什么并非所有的IMN患者均能检出抗PLA2R抗体?文献肾内科可以开展的项目项目名称标本要求送检时效检测方法临床意义报告时间价格备注β2微球蛋白（β2m）2微球蛋白（β2m）血清2ml或尿2ml2ml低温送检7天化学发光用于肾功能的评价和辅助诊断周一至周日，2个工作日50尿微量白蛋白（MAU）晨尿2ml不加防腐剂不加防腐剂低温送检7天散射比浊法糖尿病、高血压、心血管疾病、肾病的病变程度及预后的临床参考周一至周日，2个工作日25异常免疫球蛋白电泳血清1.5ml及尿液1ml及尿液1ml低温送检7天蛋白电泳辅助诊断多发性骨髓瘤及肾脏损伤程度及类型周一至周五，3个工作日810/960血清游离轻链κ、λ血清3ml或尿100ml（不加防腐剂）或尿100ml（不加防腐剂）低温送检7天散射比浊法辅助诊断多发性骨髓瘤及自身免疫性疾病、感染、肿瘤等周一至周五，2个工作日490免疫球蛋白+补体6项血清2ml低温送检7天免疫比浊法电化学发光法提示SLE、自身免疫性疾病、继发性免疫缺陷等、自身免疫性疾病、继发性免疫缺陷等周一至周日，2个工作日200免疫10项血清2ml低温送检7天免疫比浊法免疫荧光法增高提示SLE250抗中性粒细胞包浆抗体（ANCA）血清或血浆200μlμl低温送检14天免疫荧光法CANCA见于韦格氏肉芽肿血管炎，PANCA见于C-S综合征及溃疡性结肠炎见于C-S综合征及溃疡性结肠炎周一至周五，周日，2各工作日60抗核抗体谱（11项）血清2ml低温送检14天主要见于SLE，活动期阳性率达80%-90%，活动期阳性率达80%-90%周一至周五，周日，2个工作日410抗肾小球基底膜抗体（GBM）血清或血浆200μlμl低温送检14天免疫荧光法是抗GBM抗体型肾小球肾炎特异性抗体，包括Good-Pasture综合征，急进型肾小球肾炎及免疫复合物型肾小球肾炎，还见于药物诱导的间质性肾炎抗体型肾小球肾炎特异性抗体，包括Good-Pasture综合征，急进型肾小球肾炎及免疫复合物型肾小球肾炎，还见于药物诱导的间质性肾炎周一至周五，周日，2个工作日50抗内皮细胞抗体（AECA）血清2ml低温送检5天免疫荧光法主要见于原发性自身免疫性疾病等周三，9个工作日40SLE自身抗体普自身抗体普血清2ml低温送检14天系统性红斑狼疮的辅助诊断周三，9个工作日450Thankyou!