中药匀采茶对高胆固醇血症动物模型

31JChinMed15(1):31-38,2004中藥勻采茶對高膽固醇血症動物模型降低膽固醇之功能評估黃國欽1李誌雄2賴呈委2游明謙3許清祥41中國醫藥大學中西醫結合研究所台中2景岳生物科技股份有限公司台南中國醫藥大學附設醫院3中西合作醫療中心4小兒部台中(2003年10月24日受理，2004年2月10日接受刊載)隨著人口的老化，慢性病已成為國人主要的死亡原因，心血管病變相關疾病更是名列前茅，而高膽固醇血症便是導致心血管疾病的一個重要因素。本研究以紫蘇、山楂、烏梅、白扁豆、赤小豆、洛神花等六味藥食同源的藥材製成勻采茶，針對倉鼠的高膽固醇血症動物模型進行實驗。在造症成功後隨機分配倉鼠為勻采茶低劑量組、勻采茶高劑量組與安慰劑組相比較，各餵食四週。實驗前後測定血中三酸甘油脂、總膽固醇、高密度脂蛋白（Highdensitylipoprotein；HDL）、低密度脂蛋白（Lowdensitylipoprotein；LDL）作為療效評估指標，結果發現血清LDL含量、總膽固醇上升率、LDL上升率、LDL/HDL上升率均較安慰劑組低，而HDL上升率較安慰劑組為高。其中血清LDL含量、LDL上升率、LDL/HDL上升率均具統計上顯著意義，顯示中藥勻采茶具有降低低密度脂蛋白膽固醇的作用及提升高密度脂蛋白膽固醇的趨勢，而高劑量組的效果更優於低劑量組。但對於三酸甘油脂，低劑量組反呈上升趨勢。勻采茶是否將來可以做為高膽固醇血症預防心血管疾病之參考，則仍需要進一步的臨床實驗加以證實。關鍵字：高脂血症，高密度脂蛋白，低密度脂蛋白。前言自民國八十五年起，臺灣地區六十五歲以上的人口比例達百分之七以上，正式進入高齡化社會。隨著聯絡人：許清祥，中國醫藥大學附設醫院小兒部，電話：[phone]轉4163，傳真：[phone]，E-mail:[e-mail]。中藥勻采茶降低膽固醇之功能評估32人口的老化、營養的提升及衛生醫療的改善，慢性病已成為國人主要的死亡原因。根據行政院衛生署九十年的統計資料顯示，腦血管疾病、心臟疾病及高血壓性疾病分居國人十大死亡原因的第二、三及第十位，而高膽固醇血症便是導致心血管疾病的一個重要因素。據統計，血中膽固醇濃度大於181mg/dl以上時，血中膽固醇濃度與心血管疾病死亡率呈線性正相關1；而每減少一個百分點的血中膽固醇濃度約可減少二個百分點的心血管疾病死亡率2。根據行政院衛生署九十一年度台灣地區高血脂盛行率調查，高膽固醇血症之盛行率達10.9%，其中65歲以上更高達21.5%。因此，高膽固醇血症的預防及治療對國人的健康與社會醫療成本是相當重要的。目前常用的西藥如hydroxymethylglutaryl-coenzymeAreductaseinhibitors，膽酸交換樹脂（Bileacid-bindingresins），纖維酸衍生物（Fibricacidderivatives），存在著價格昂貴、順應性差及毒副反應等問題。因此，愈來愈多具有預防醫學觀念的患者，尋求以中藥、魚油等天然食品，作為預防及治療的替代方案。傳統中醫學認為高膽固醇血症屬於“痰濁”、“血瘀”3,4,5，以健脾化痰、活血袪瘀為主要治療方式。在中藥方面，也有許多學者對紫蘇6、山楂7,8、澤瀉9、丹參10、何首烏11等多味藥材之單複方進行降血脂研究。但由於降血脂藥物需要長期服用，藥補不如食補，我們選取了紫蘇、山楂、烏梅、白扁豆、赤小豆、洛神花等六味藥食同源的藥材，組合成為勻采茶，以研發較無毒性的降膽固醇中藥，提供高膽固醇血症患者不同的選擇。研究以倉鼠12為實驗動物，餵食含膽固醇飼料誘導成為高膽固醇血症動物模型，並使用不同濃度中藥勻采茶餵倉鼠，評估中藥勻采茶對高膽固醇血症動物模型之膽固醇調節能力。材料與方法一、實驗動物：由國家實驗動物繁殖及研究中心購得之雄性倉鼠（Hamsters），體重120-140克，飼養於光照、黑暗各12小時，室溫維持在25±1°C，濕度維持在60±5%，水分與飼料充分供給之獨立空調的動物房內。本研究中對實驗動物之處理及一切實驗過程，均依據實驗動物委員會之標準章程規範進行。二、實驗中藥之配製：中藥勻采茶之組成為紫蘇、山楂、烏梅、白扁豆、赤小豆、洛神花等六味中藥，依等體積比例組合而成，重量比例紫蘇：山楂：烏梅：白扁豆：赤小豆：洛神花為6：10：2：4：4：5，用水煮濃縮後冷凍乾燥。勻采茶1倍液：取勻采茶乾燥粉末7.886毫克溶於1毫升水中即為勻采茶1倍液。勻采茶10倍濃縮液：取勻采茶粉末78.86毫克溶於1毫升水中即為10倍濃縮液。三、實驗方法：實驗前先將雄性倉鼠隨機分為控制組、安慰劑組、低劑量組及高劑量組（每組6隻小鼠）。控制組餵食正常飼料，其餘三組餵食高膽固醇飼料（添加2%膽固醇），每鼠每日定量餵食6.3±0.1gm飼料，2週後黃國欽李誌雄賴呈委游明謙許清祥33表1各組於實驗各週餵食飼料及藥物時程表實驗前2週實驗前1週第1週第2週第3週第4週控制組NDNDND/NSND/NSND/NSND/NS安慰劑組HDHDHD/NSHD/NSHD/NSHD/NS低劑量組HDHDHD/YCT1XHD/YCT1XHD/YCT1XHD/YCT1X高劑量組HDHDHD/YCT10XHD/YCT10XHD/YCT10XHD/YCT10X低劑量組：勻采茶1倍組；高劑量組：勻采茶10倍濃縮液組；ND：正常飼料；HD：高膽固醇飼料；NS：生理食鹽水；YCT1X：勻采茶1倍液；YCT10X：勻采茶10倍液以眼窩採血1.5mL測定三酸甘油脂、總膽固醇、高密度脂蛋白（Highdensitylipoprotein；HDL）、低密度脂蛋白（Lowdensitylipoprotein；LDL）。確定造症成功後，才開始正式實驗。1.控制組：仍持續給予正常飼料，並以餵食管餵食生理食鹽水，每天2次，每次1毫升，連續4週。2.安慰劑組：仍持續給予高膽固醇飼料，並以餵食管餵食生理食鹽水，每天2次，每次1毫升，連續4週。3.低劑量組：仍持續給予高膽固醇飼料，並以餵食管餵食1倍濃度勻采茶，每天2次，每次1毫升，連續4週。4.高劑量組：仍持續給予高膽固醇飼料，並以餵食管餵食10倍濃度勻采茶，每天2次，每次1毫升，連續4週。各組於實驗各週餵食飼料及藥物時程如附表1。四、療效評估實驗4週後再以眼窩採血1.5mL測量三酸甘油脂、總膽固醇、HDL、LDL等血清脂質指標。五、血清脂質指標測定三酸甘油脂、總膽固醇、HDL、LDL等血清脂質指標均以HITAICHI7050生化分析儀測定。六、統計方法本研究資料利用統計軟體SPSS10.0版進行統計分析，採用無母數統計Kruskal-WallisHTest及DunnettTest作為事後檢定法，藉以檢定血清中三酸甘油脂、總膽固醇、HDL、LDL兩組及兩組以上之差異情形，凡p值小於0.05者為具有統計學顯著差異。結果一、高膽固醇血症之動物模型造症經過為期兩週餵食含高膽固醇飼料後，以眼窩採血收集血清測其脂質指標。結果顯示控制組血清中三中藥勻采茶降低膽固醇之功能評估34表2　正式實驗前，各分組血清中三酸甘油脂、總膽固醇、高密度脂蛋白、及低密度脂蛋白的含量控制組(mg/dl)安慰劑組(mg/dl)低劑量組(mg/dl)高劑量組(mg/dl)PvalueHDL70.5±3.6*117.6±10.8109.7±8.8111.9±4.20.001LDL23.5±1.3*105.4±8.4132.0±29.5137.3±20.20.020TC104.0±4.1*398.8±31.2444.8±62.7465.57±36.80.001TG224.0±23.1*421.0±59.9409.8±53.2621.5±56.3*0.008實驗數據以平均值±標準誤差表示低劑量組：勻采茶1倍組；高劑量組：勻采茶10倍濃縮液組；*：與安慰劑組比較具統計上顯著意義（p0.05）；HDL：高密度脂蛋白；LDL：低密度脂蛋白；TC：總膽固醇；TG：三酸甘油脂表3　餵食勻采茶前後，倉鼠血清中高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、總膽固醇、及三酸甘油脂的含量及變化率安慰劑組(mg/dl)低劑量組(mg/dl)高劑量組(mg/dl)實驗前117.6±10.8109.7±8.8111.9±4.2HDL實驗後119.5±11.5124.7±9.9132.2±11.9△HDL（%)5.9±8.317.9±12.822.2±9.8實驗前105.4±8.4132.0±29.5123.7±15.1LDL實驗後243.6±25.2142.5±26.6*122.9±30.8*△LDL（%）148.6±42.213.5±13.2*-3.1±14.8*實驗前398.8±31.2444.8±62.7461.3±33.3TC實驗後485.5±70.4469.5±42.7452.7±97.0△TC（%）18.9±10.79.2±7.2-14.7±13.5*實驗前421.0±59.9409.8±53.2621.5±56.3TG實驗後365.8±65.9574.5±20.6539.0±100.5△TG（%）-10.5±14.747.2±13.6*-12.8±13.3實驗數據以平均值±標準誤差表示低劑量組：勻采茶1倍組；高劑量組：勻采茶10倍濃縮液組；*：與安慰劑組比較具統計上顯著意義（p0.05）；HDL：高密度脂蛋白；LDL：低密度脂蛋白；TC：總膽固醇；TG：三酸甘油脂；△HDL：實驗前後高密度脂蛋白改變率[（HDL實驗後－HDL實驗前）/HDL實驗前×100%]；△LDL：實驗前後低密度脂蛋白改變率[（LDL實驗後－LDL實驗前）/LDL實驗前×100%]；△TC：實驗前後總膽固醇改變率[（TC實驗後－TC實驗前）/TC實驗前×100%]；△TG：實驗前後三酸甘油脂改變率[（TG實驗後－TG實驗前）/TG實驗前×100%]酸甘油脂、總膽固醇、高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL），明顯低於安慰劑組，高劑量組三酸甘油脂高於安慰劑組（表2，p0.05）。總膽固醇、HDL、LDL於各實驗組間並無統計上顯著差異，顯示本實驗動物模型造症成功。二、中藥勻采茶對高膽固醇血症動物模型血清脂質濃度的影響實驗四週後，低劑量組、高劑量組和安慰劑組比較，LDL較安慰劑組低，且具統計上顯著意義（表3）。HDL呈上升趨勢，但尚未達統計上顯著差異。總膽固醇、及三酸甘油脂無顯著差異。黃國欽李誌雄賴呈委游明謙許清祥35安慰劑組高劑量組低劑量組-1000100200**LDL/HDL(%)△圖1.實驗前後倉鼠血清LDL/HDL比值改變情形低劑量組：勻采茶1倍組；高劑量組：勻采茶10倍濃縮液組；*：與安慰劑組比較具統計上顯著意義（p0.05）；HDL：Highdensitylipoprotein；LDL：Lowdensitylipoprotein；△LDL/HDL：（實驗後LDL/HDL-實驗前LDL/HDL）/（實驗前LDL/HDL）×100%實驗前後差異比較，低劑量組和高劑量組LDL上升率均較安慰劑組為低，且具有統計上顯著差異（表3）；HDL上升率均較安慰劑組為高（安慰劑組5.9%；低劑量組17.9%；高劑量組22.2%）；總膽固醇在高劑量組下降達14.7%，且與安慰劑組相較具有統計上顯著差異（表3）；LDL/HDL上升率均低於安慰劑組，且具有統計上顯著差異（圖1）。但低劑量組三酸甘油脂反呈上升趨勢（表3）。三、不同濃度中藥對對高膽固醇血症動物模型血中膽固醇濃度的影響比較低劑量組與高劑量組，高劑量組之LDL上升率小於低量組，而HDL之上升率高於低劑量組。低劑量組總膽固醇上升率低於安慰劑組，高劑量組更下降達14.7%。低劑量組LDL/HDL上升率低於安慰劑組，而高劑量組LDL/HDL則呈現下降趨勢（圖1）。討論過高的血中膽固醇濃度，是造成動脈粥樣硬化的重要條件，並與心血管疾病死亡率密切相關13。過氧化的低密度脂蛋白（LDL）會與巨噬細胞上的清道夫接受器結合，巨噬細胞吞噬低密度脂蛋白後形成泡沬細胞沈積於血管內皮下層