中药鉴定学实验指导主编：颜益志湖北民族学院中药专业教研室

中药鉴定学实验指导主编：颜益志湖北民族学院中药专业教研室前言《中药鉴定学》是建立在实验基础上的中药专业的一门重要的专业课，为强化学生动手能力，培养规范化操作和中药专业工作程序，结合本科教学的要求，我们编写了这本实验指导，供四年制中药本科教学使用。由于各种局限，本实验指导难免存在许多不足，欢迎使用者提出宝贵意见。目录基本操作介绍………………………………………………………………3实验一显微测定…………………………………………………………6实验二显微描绘…………………………………………………………7实验三根和根茎类中药（一）：贯众类的鉴别………………………8实验四根和根茎类中药（二）：大黄、牛膝等的鉴别………………9实验五根和根茎类中药（三）：黄连、乌头、甘草等的鉴别………11实验六根和根茎类中药（四）：人参、桔梗等的鉴别………………13实验七根和根茎类中药（五）：石菖蒲、半夏、天麻等的鉴别………15实验八茎木类中药（一）：关木通、沉香等的鉴别…………………17实验九皮类中药（一）：厚朴、肉桂、杜仲等的鉴别…………………19实验十皮类中药（二）：黄柏、秦皮、番泻叶等的鉴别………………21实验十一花类中药（一）：丁香、洋金花、金银花等的鉴别…………23实验十二花类中药（二）：红花、番红花等的鉴别……………………24实验十三果实及种子类中药（一）：五味子、补骨脂等的鉴别………26实验十四果实及种子类中药（二）：小茴香、马钱子等的鉴别………28实验十五果实及种子类中药（三）：槟榔、白豆蔻等的鉴别…………29实验十六全草类中药（一）：麻黄、金钱草、广藿香等的鉴别……30实验十七全草类中药（二）：薄荷、穿心莲、石斛等的鉴别………31实验十八各种石细胞的鉴别……………………………………………33实验十九藻菌类中药：猪苓、茯苓等的鉴别…………………………34实验二十各种特异薄壁细胞的鉴别……………………………………35实验二十一动物类中药（一）：珍珠、蟾酥、土鳖虫等的鉴别………36实验二十二动物类中药（一）：金钱白花蛇、乌梢蛇、麝香等的鉴别…37实验二十三复习…………………………………………………………38实验二十四实验考核……………………………………………………39基本操作介绍一.显微镜的使用注意事项1.使用显微镜之前，应仔细检查其零件有无损失，破损。2.取镜时一手握镜臂，另一手托住镜座，不可斜提（防止目镜滑出或损伤螺旋），更不可一只手提显微镜。3.放置时应使镜座轻轻着落，不得使显微镜遭受震动。4.使用倾斜关节时，一方面要注意显微镜重心，不可倾斜过度，以防止倾倒摔坏；另一方面要注意检查载玻片上的试剂，防止因倾斜过度而流出后污染或腐蚀载物台。5.在使用显微镜的中途，若欲进行其它操作时，需将显微镜的倾斜关节还原，并移至试验台的中央，以免碰落在地。6.在观察切片之前，要认真检查盖玻片外是否有残留试液，以防腐蚀镜头。用高倍镜观察时，应先用低倍镜调好距离后，然后转换成高倍镜。7.观察完后，应先转开镜头，然后拆除切片，以防腐伤或碰伤镜头。8.使用完后，用纱布揩拭机械部分，用绸布揩拭光学部分。镜头等模糊时，可用绸布沾少许二甲苯和石油醚轻轻揩拭。忌用醇清洗。如遇显微镜机械不灵和光学部分异样，应报告老师解决，严禁擅自拆卸、处理。9.实验完毕，及时拆除切片，还原各部（如镜头偏于两侧，聚光器还原等），使镜头完全处于非工作状态，放回原处，并填写使用登记卡。二.中药及成方制剂的显微鉴别法显微鉴别是指用显微镜观察中草药及成方制剂的组织、细胞等特征，进行鉴别的办法。鉴别时可选用具有代表性的样品，制作不同的显微制片。一般作横切片、粉末制片鉴别叶或其它器官的表面制片。1.横切片或纵切片选取中草药样品所要观察的部分，截成适当大小的短段，软化后，用徒手切片或滑走切片机横向或纵向切成10~20um的薄片，然后选用适当的试液观察。必要时可用石蜡切片法制片。2.表面制片将样品软化后，切取一部分或撕其表面，再选用适宜的试液制片观察。3.解离组织制片法如样品内薄壁组织占大部分，木化组织少或分散存在，可用氢氧化钾法；如薄壁细胞较少，木化组织较多或集成较大群束，可用硝铬酸法或氯化钾法。进行解离前，宜先将样品切成直径或宽2mm的条状或片状。(1)氢氧化钾法：取上述材料，置试管中，加5%氢氧化钾液适量，加热煮至用玻璃棒挤压能离散为止，倾去碱液，加水洗涤后，取少许置载玻片上，用解剖针撕开，以稀甘油封藏装片观察。(2)硝铬酸法：取上述材料，置试管中，加20%硝铬酸试液适量，放置，至用玻璃棒挤压能离散为止，倾去酸液，加水洗涤后，取少许置载玻片上，用解剖针撕开，以稀甘油封藏装片观察。(3)氯酸钾法：取上述材料，置试管中，加50%硝酸溶液及氯酸钾粉少许，缓缓加热，待产生的气泡减少时，再及时加入氯酸钾少许，以维持气泡稳定地发生，至用玻璃棒挤压能离散为止，倾去酸液，加水洗涤后，取少许置载玻片上，用解剖针撕开，以稀甘油封藏装片观察。4.鉴别中成药时，如为散剂，照粉末制片法制片观察。如为丸、片剂，可取样品从正中切开，于切开面外至内刮取少量样品，滴加常规的试剂，搅拌均匀，使粘结的细胞、组织解离，再按粉末的特征进行鉴别。蜜丸可直接挑取少量样品制片。5.为了使切片和粉末的组织、细胞能观察清楚，常用水合氯醛试液透化后再进行观察。6.观察细胞内含物的形状，应选用不同的试液制片，一般观察淀粉用水或甘油醋酸试液；糊粉粒用甘油；水溶性内含物（如菊糖、橙皮甙等）用乙醇或水合氯醛（不加热）。7.细胞壁性质的鉴别(1)木质化细胞壁加间苯三酚试液1~2滴，稍放置，加盐酸1滴，因木化程度不同，显红色或紫红色。(2)木栓化或角质化细胞壁加苏丹Ⅲ试液，稍放置或微热，显桔红色至红色。(3)纤维素细胞壁加氯化锌碘试液；或先加碘试液湿润后，稍放置，再加硫酸溶液（33%~50%），显蓝色或紫色。(4)硅质化细胞壁加硫酸无变化。8.细胞内含物性质鉴定(1)淀粉粒a.加碘试液，显蓝色或紫色。b.用甘油醋酸试液装片，置偏光显微镜下观察，未糊化的淀粉粒显偏光现象；易糊化的无偏光现象。(2)糊粉粒a.加碘试液，显棕色或黄棕色。b.加硝酸供试液，显砖红色。材料中如含有多量脂肪油，宜先用乙醚和石油醚进行脱脂后进行实验。(3)脂肪油、挥发油或树脂a.加苏丹Ⅲ试液，显橘红色、红色或紫红色。b.加90%乙醇，脂肪油不溶解（蓖麻油和巴豆油例外），挥发油则溶解。(4)菊糖加10%a-萘酚乙醇溶液，再加硫酸，显紫红色并很快溶解。(5)粘液加钌红试液，显红色。(6)草酸钙结晶a.加稀醋酸不溶解，加稀盐酸溶解而无气泡产生。b.加硫酸溶液，逐渐溶解，片刻后析出针状硫酸钙结晶。(7)碳酸钙（钟乳体）加稀盐酸溶解，同时有气泡产生。(8)硅质加硫酸不溶解。实验一显微测定1目的要求掌握显微测定尺的使用方法。掌握显微则量的方法。2仪器、试剂、材料仪器：目镜测微尺、载台测微尺、生物显微镜、酒精灯试剂：水合氯醛、甘油药材：大黄、肉桂粉末：大黄、肉桂三、实验内容测量大黄簇晶直径、肉桂纤维直径及长度四、实验方法1．装好测量目尺和物尺，按下列计算公式校对显微测量目尺。计算公式：目尺每小格代表长度=2．取大黄、肉桂粉末，分别以水合氯醛透化装片，测量大黄簇晶直径、肉桂纤维直径及长度。五、作业1．校对显微镜-目尺放大倍数。2．测量大黄簇晶直径和肉桂纤维直径及长度。实验二显微描绘1目的要求掌握显微描绘方法熟悉显微描绘器的使用及应用二、仪器、试剂、材料仪器：目镜测微尺、载台测微尺、显微描绘器、绘图板、生物显微镜试剂：水合氯醛、甘油药材：半夏、肉桂粉末：半夏、肉桂三、实验内容1．描绘半夏针晶、肉桂纤维和石细胞。2．测量放大倍数。四、实验方法1．取半夏、肉桂粉末、分别以水合氯醛透化装片。2．装好描绘目镜和描绘架。3．描绘半夏针晶和肉桂细胞及纤维。4．测量放大倍数。五、作业描绘半夏针晶和肉桂纤维及石细胞。实验三贯众类的鉴别一、目的要求掌握贯众类药材的鉴别方法掌握常用贯众类药材叶柄，残基的显微结构特征熟悉徒手切片的操作方法二、仪器、试剂、材料仪器：生物显微镜、单、双面刀片试剂：水合氯醛、甘油药材：绵马贯众、紫萁贯众、荚果蕨贯众、狗脊试剂：水合氯醛、1%香草醛溶液、盐酸。三、实验内容1．观察以上药材性状特征。2．观察以上药材叶柄残基横切面显微特征。四、实验方法1．性状鉴别取绵马贯众、紫萁贯众、荚果蕨贯众、狗脊贯众、狗脊药材，观察性状特征。2．显微鉴别取绵马贯众、紫萁贯众、荚果蕨贯众、狗脊贯众叶柄残基徒手切片，观察横切面特征。3．理化鉴别取绵马贯众叶柄残基或根茎横切面切片，滴加1%香草醛溶液及盐酸，镜检，间隙腺毛呈红色。五、作业绘绵马贯众、紫萁贯众、荚果蕨贯众、狗脊贯众叶柄残基横切面显微结构简图。实验四大黄、何首乌的鉴别一、目的要求掌握大黄、何首乌异型维管束的结构及特征掌握大黄的显微鉴别方法及特征掌握微量升华的方法二、仪器、试剂、材料仪器：微量升华装置、滤纸、紫外光灯试剂：氢氧化钠、甲醇、45%乙醇、水合氯醛、甘油药材：大黄、何首乌永久制片：大黄、何首乌粉末：大黄、何首乌三、实验内容1．大黄、波叶组大黄、何首乌的性状鉴别。2．大黄、何首乌异型维管束的观察。3．大黄粉末鉴定及理化鉴别。四、实验方法1．性状鉴别取大黄、波叶组大黄进行性状鉴别观察。2．显微鉴别①横切面：取大黄、何首乌永久制片，观察显微特征。②取大黄粉末分别用稀甘油和水合氯醛装片，观察显微特征。3．理化鉴别①取大黄粉末少许进行微量升华，分别收集110℃、130℃、150℃附近升华物镜检，依次见菱形或针状、树枝状、羽毛状黄色结晶，结晶加氢氧化钠试液，则溶解并显红色。②取大黄粉末0.2g，加甲醇温浸10分钟，放冷，取上清液10μl点于滤纸上，以45%乙醇展开，取出，晾干，放置10分钟，置365nm紫外光灯下检视，观察结果。五、作业1．绘大黄、何首乌横切面结构简图。2．绘大黄微量升华产物简图，并注意反应现象。3．绘大黄粉末显微特征图。实验五黄连、乌头、甘草等的鉴别2目的要求熟悉川乌、附子、黄连、白芍、赤芍、黄芪、甘草、延胡索的性状特征掌握黄连横切面结构特征及简图掌握黄连、甘草的粉末显微特征二、仪器、试剂、材料仪器：紫外分光光度计、生物显微镜，分液漏斗、酒精灯试剂：乙醇、稀盐酸、漂白粉、95%硝酸、乙醚、氨试液、硫酸（0.25mol/L）、水合氯醛、甘油药材：川乌、附子、黄连、白芍、赤芍、黄芪、甘草、延胡索粉末：黄连、川乌、甘草三、实验内容1．观察川乌、附子、黄连、白芍、黄芪、甘草、延胡索的性状特征。2．观察黄连的横切面及粉末的显微特征。3．观察甘草粉末显微特征。4．作黄连理化鉴别试验。四、实验方法1．性状鉴别取川乌、附子、黄连、白芍、赤芍、黄芪、甘草、延胡索药材，观察性状特征。2．显微鉴别①横切面：取味连、雅连、云连永久制片、观察显微特征。②粉末：取黄连、甘草粉末，以水合氯醛透化装片，观察显微特征。3．理化鉴别①取黄连粗粉1g，加乙醇10ml，加热至沸腾，放冷、滤过。取滤液5滴，加稀盐酸1ml与漂白粉少量，振摇后，溶液显樱红色。（小檗碱）。②取黄连粉末置载玻片上，加95%乙醇1-2滴及30%硝酸1滴，盖上盖玻片，放置片刻，镜检，有黄色针状或针簇状结晶析出。（硝酸小檗碱）。③取川乌粉末0.5g，加乙醚10ml与氨试液0.5ml振摇10分钟，滤过。滤液置分液漏斗中，加硫酸（0.25mol/L）20ml，振摇提取，分取酸液适量，用水稀释，置可见紫外分光光计中测定，在231nm的波长处有最大吸收（示教）。五、作业1．绘黄连根茎横切面简图。2．绘黄连粉、甘草末显微特征图。3．记录黄连理化反应现象。实验六人参、桔梗等的鉴别3目的要求熟悉人参、西洋参、当归、独活、川芎、防风、柴胡、桔梗、党参的性状鉴别要点掌握人参横切面结构特点及粉末显微特点，了解人参理化鉴别方法熟悉桔梗、当归粉末显微特点二、仪器、试剂、材料仪器：紫外光灯、生物显微镜、酒精灯试剂：甲醇、正丁醇、硅胶G、0.5%CMC、醋酸乙酯、硫酸、水合氯醛、甘油药材：人参、西洋参、当归、独活、川芎、防风、柴胡、桔梗、党