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探究:培养液中酵母菌种群数量的变化目的要求1、学习利用血球计数板进行微生物计数的方法2、实验探究培养液中酵母菌种群数量的变化3、注意样方法的应用4、体会影响种群数量变化的因素1、酵母菌的繁殖方式主要是:2、酵母菌的呼吸方式是:兼性厌氧(可进行有氧呼吸和无氧呼吸)回顾思考:出芽生殖3、酵母菌的培养条件要注意那些问题?比如要用适宜的温度培养,调节好PH值,溶氧量的控制等。例如:酵母菌的种群数量在营养条件有限的情况下呈S型增长。探究:培养液中酵母菌种群数量的变化介绍:血球计数板的构造1、血球计数板:可用来测量细胞,细菌等一些微小物体的长度,还有就是测量数量,如单位体积细胞的数量。血球计数板是由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的.玻片中有四条下凹的槽,其中间又被一短横槽隔为两半,每半边上面刻有一个方格网.25个中格16个小格16个中格25个小格25X16=400小格16X25=400小格计数室有长×宽:1mm×1mm,2mm×2mm3mm×3mm等深度均为0.1mm。5、单位换算:大方格的长和宽各为1mm,深度为0.1mm,其体积为0.1mm3.换算为1mL为0.1/1000即1/10000mL即10-4mL。4、计数室的规格:1mm1mm1mm每个计数室共有400小格,总容积为0.1mm33、使用方法:将血球计数板用擦镜纸擦净,在中央的计数室上加盖专用的盖玻片.将稀释后的酵母菌悬液,用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘,使菌液缓缓渗入,多余的菌液用吸水纸吸取,稍待片刻,使酵母菌全部沉降到血球计数室内.如果使用16格×25格规格的计数室,要按对角线位,取左上,右上,左下,右下4个中格(即100个小格)的酵母菌数.6、如何计数呢?25个中格16个中格*********用规格为25格×16格的计数板,除了取其4个对角方位外,还需再数中央的一个中格(即80个小方格)的酵母菌数.(五点取样法)每1ml菌液中所含的酵母菌个数计算公式(如长和宽各为1mm):(1)16格×25格的血球计数板计算公式酵母细胞数/ml=(100小格内酵母细胞个数/100)×400×稀释倍数10-4即(100小格内酵母细胞个数/100)×4×106×稀释倍数(2)25格x16格的血球计数板计算公式:酵母细胞数/ml=(80小格内酵母细胞个数/80)×400×稀释倍数10-4即(80小格内酵母细胞个数/80)×4×106×稀释倍数7、课本中大方格的长和宽各为2mm,深度为0.1mm,其体积为0.4mm3.换算为1mL为0.4/1000即4/10000mL即4×10-4mL则:每1ml菌液中所含的酵母菌个数计算公式(如长和宽各为2mm):(1)16格×25格的血球计数板计算公式酵母细胞数/ml=(100小格内酵母细胞个数/100)×400×稀释倍数4×10-4即(100小格内酵母细胞个数/100)×106×稀释倍数(2)25格x16格的血球计数板计算公式:酵母细胞数/ml=(80小格内酵母细胞个数/80)×400×稀释倍数即(80小格内酵母细胞个数/80)×106×稀释倍数4×10-4使酵母菌混合均匀,减少误差不需要。因不同时间取样已形成对照需要。尽量减少误差。对每个样品计数三次,取其平均值。只计相邻两边及顶角的酵母菌稀释培养液。稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数7.对于压在小方格界线上的酵母菌应取相邻两边及顶角计数。第1天第4天第6天第7天死亡酵母菌种群个体数量变化0200040006000800010000120001234567时间/d酵母菌数量/万个·mL-1酵母菌的种群数量在营养条件有限的情况下是呈S型增长。但之后会下降。0酵母菌细胞数(×106个/mL)时间3.影响酵母菌的种群数量增长的因素可能是什么?在计数前,还应有哪些步骤?需注意些什么?•培养液配制•灭菌•接种•培养无菌操作培养条件试管编号培养液/mL无菌水/mL酵母菌母液/mL温度(℃)A10—0.128B10—0.15C—100.128针对“培养液中酵母菌种群数量的动态变化”,有人提出了新的问题,某同学按下表完成了有关实验。时间(d)酵母菌细胞数量(×106个/mL)A组B组C组A1A2A3平均B1B2B3平均C1C2C3平均1234567温度、营养物质对酵母菌生长的影响1.通常用血球计数板对培养液中酵母菌进行计数,若计数室为1mm×1mm×0.1mm方格,由400个小方格组成,若多次重复计数后,算得每个小方格中平均有5个酵母菌,则10mL该培养液中酵母菌总数有个。5×400×10000×10=2×1082、检测员将1mL水样稀释10倍后,用抽样检测的方法检测每毫升蓝藻的数量;将盖玻片放在计数室上,用吸管吸取少许培养液使其自行渗入计数室,并用滤纸吸去多余液体。已知每个计数室由25×16=400个小格组成,容纳液体的总体积为0.1mm3。现观察到图中该计数室所示a、b、c、d、e5个中格80个小格内共有蓝藻n个,则上述水样中约有蓝藻多少个。80个小方格细胞总数/80×400×10000×稀释倍数=n/80×400×10000×10=5n×105(4)在整个实验过程中,直接从静置的培养瓶中取培养原液计数的做法是错误的,正确的方法是和。(5)实验结束后,用试管刷蘸洗涤剂擦洗血球计数板的做法是错误的,正确的方法是。摇匀培养液后再取样培养后期的样液稀释后再计数浸泡和冲洗(2008江苏高考)3(1)图中曲线①、②和③分别是__________组、__________组和__________组的结果。(2)B组和A组的实验结果不同的原因是B组(3)D组和B组的实验结果不同的原因是D组BAD培养液较多,与空气接触面积较小,故供氧较少葡萄糖浓度较低,故营养物质供应较少4.取少量酵母菌液放入血球计数板直接计数,测得的数目是()A.活细胞数B.死细胞数C.菌落数D.细胞总数A5、探究酵母菌的种群数量实验中,某学生的部分操作过程如下:(1)把酵母菌培养液放置于冰箱中培养,(2)从静置试管中吸取酵母菌培养液计数,(3)到第七天取样计数,请纠正其错误:(1)___________________________(2)__________________________(3)_________________.该同学用25格x16格,其中长和宽各为2mm,深度为0.1mm的血球计数板计数,用五点取样法读取酵母菌有40个,其中稀释了10倍,则1ml菌液中所含的酵母菌个数为_____________应将静置改为轻轻振荡几次.应放在适宜温度下培养.应连续七天取样计数.(40/80)×106×10=5×106
本文标题:实验:酵母菌种群数量的变化
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